目的:探讨强冲击震动对山羊脑皮质损伤及外周血免疫细胞的影响。方法:选取17只波尔山羊，雌雄不限，按随机数字表法将山羊分为正常对照组（5只）和震动伤组（12只）。正常对照组不做任何处理，处死后进行常规解剖及取脑；震动伤组以束缚状态固定于BY10-100型瞬态冲击震动试验平台的载物平台，并通过垂直冲击波形发生器建立强冲击震动伤模型，在伤前及伤后0、3、6及24 h采集静脉血后处死，后续操作与正常对照组一致。伤后24 h行大体病理解剖检查和HE染色观察正常对照组和震动伤组脑组织损伤情况及大脑皮层组织病理学变化；采用荧光定量PCR检测正常对照组和震动伤组大脑皮层组织闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、紧密连接蛋白-5（Claudin-5）、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙结合衔接分子-1（IBA-1）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6及分化抗原簇177（CD177）基因表达水平；采用蛋白印迹检测正常对照组和震动伤组大脑皮层组织ZO-1和Claudin-5蛋白表达水平。采用血球分析仪和凝血分析仪检测震动伤组伤前及伤后0，3，6及24 h外周血白细胞计数、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、凝血酶原时间1（PT-1）、凝血酶原时间国际标准化比值（PT-INR）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、凝血酶原活动度（PTA）及纤维蛋白原（FIB）水平。结果:伤后24 h，震动伤组脑组织无肉眼可见的明显挫伤或坏死；脑微血管呈局部扩张、充血、水肿，炎性细胞聚集，血管壁结构受损，红细胞渗漏；正常对照组脑组织未见上述损伤。震动伤组大脑皮层组织ZO-1和Claudin-5基因表达水平分别为0.25±0.10、0.09（0.04，0.44），显著低于正常对照组的1.00±0.15、0.99（0.80，1.20）；GFAP、IBA-1、IL-1β、IL-6和CD177基因表达水平分别为4.40（3.88，6.75）、2.60±1.07、3.04±0.51、2.71±0.45及2.93±0.62，显著高于正常对照组的1.00（0.78，1.22）、1.00±0.37、1.00±0.27、1.00±0.57及1.00±0.35；ZO-1和Claudin-5蛋白表达水平分别为0.41±0.06、0.42±0.11，显著低于正常对照组的1.08±0.12、0.91±0.23（ P均<0.01）。震动伤组伤前外周血白细胞计数、中性粒细胞和淋巴细胞水平分别为（13.7±3.3）×10 9/L、（35.3±14.8）%及（57.2±15.1）%，伤后3 h分别为（19.4±3.1）×10 9/L、（60.5±12.5）%及（33.6±14.2）%，伤后6 h分别为（20.6±3.6）×10 9/L、（63.6±13.0）%及（30.9±15.0）%；伤后3、6 h白细胞计数和中性粒细胞水平较伤前显著升高，淋巴细胞水平较伤前显著下降（ P<0.05或0.01），伤后0、24 h上述各项指标较伤前差异无统计学意义（ P均>0.05）；伤前和伤后各时间点单核细胞水平差异无统计学意义（ P均>0.05）。震动伤组伤前和伤后各时间点PT-1、PT-INR、APTT、TT、PTA和FIB水平差异无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:强冲击震动早期可致山羊大脑皮质微血管和血脑屏障受损，同时伴有中枢和外周炎症反应发生。

目的 利用高速荧光摄影技术,探究一氧化氮(NO)对成年斑马鱼骨骼肌细胞钙瞬态的调控作用.方法 利用成年斑马鱼分离提取其游离骨骼肌细胞,将细胞以Fluo-4,AM荧光探针孵育后,使用高速荧光摄像机记录单个电刺激后斑马鱼游离骨骼肌细胞内钙瞬态的荧光变化,并定量计算细胞内钙瞬态相关的生物物理学参数.实验分组为对照组、S-亚硝基-N-乙酰基-DL-青霉胺(SNAP)组和N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组,使用NO供体SNAP和非特异性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME探究NO对成年斑马鱼骨骼肌细胞钙瞬态的调控作用.实验再分组为对照组、N-乙基马来酰亚胺(NEM)组、1H-[1,2,4]恶草灵并[4,3-A]喹喔啉-1-酮(ODQ)组、SNAP组和SNAP+ODQ组,使用sGC-cGMP-PKG通路抑制剂ODQ和S-亚硝基化抑制剂NEM探究NO对成年斑马鱼骨骼肌细胞钙瞬态的调控机制.结果 高速荧光摄影技术可以完整记录成年斑马鱼骨骼肌细胞内的钙瞬态荧光变化,并计算出细胞内钙瞬态相关的生物物理学参数.与对照组比较,SNAP组骨骼肌细胞钙瞬态明显降低,而L-NAME组骨骼肌细胞钙瞬态较对照组明显增强.ODQ组骨骼肌细胞钙瞬态明显强于对照组,而NEM组与对照组比较各钙瞬态相关参数差异无统计学意义(P＞0.0 5).SNAP+ODQ组骨骼肌细胞钙瞬态也明显强于SNAP组.结论 NO能够通过sGC-cGMP-PKG途径负向调控成年斑马鱼骨骼肌细胞内的钙瞬态过程.

背景:瞬态受体电位通道构成了一个庞大而多样的阳离子通道家族,作为细胞传感器对机体内外大量的物理和化学刺激做出反应.钙是骨组织的重要组成部分,钙相关调节因子可以通过Ca2+浓度的改变在骨形成和骨吸收中发挥作用,而骨质疏松发生过程中的骨代谢较大程度上就是Ca2+的代谢过程.TRPV5/TRPV6是跨细胞Ca2+转运的重要通道,在瞬态受体电位家族中对于Ca2+具有高度通透性,因此上皮Ca2+通道与骨代谢之间存在着密切关系.目的:综述骨代谢与钙的关系、Ca2+通道TRPV5/TRPV6的特性及生理功能和TRPV5/TRPV6与骨质疏松发生过程中骨代谢之间的关系,为祖国医学在抗骨质疏松中的具体机制研究提供更加充分的证据支持.方法:以"calcium channel,TRPV5,TRPV6,bone metabolism,osteoporosis,traditional Chinese medicine"为英文检索词,以"钙离子通道、TRPV5、TRPV6、骨代谢、中医药"为中文检索词,由第一作者检索2000年1月至2021年4月PubMed数据库、中国知网、万方全文数据库,查阅Ca2+通道TRPV5/TRPV6与骨代谢研究相关的文献,最终保留58篇进行综述.结果 与结论:①破骨细胞与成骨细胞的平衡在骨代谢活动维持正常状态中起重要作用,人体上皮组织中高度表达的Ca2+通道TRPV5/TRPV6对全身Ca2+代谢有着非常重要的作用.②Ca2+通道TRPV5、TRPV6对Ca2+具有高选择通透特性,在磷酸化、糖基化、泛素化等多种翻译修饰后对于骨代谢产生作用,进而对破骨细胞或者成骨细胞发挥效应,以抑制破骨细胞,增加钙的吸收,促进成骨作用.③中医药抗骨质疏松可能是通过增加体内肠道或者肾脏TRPV5/TRPV6的表达或TRPV5/TRPV6通道开放量增加,进一步提高TRPV5/TRPV6的活性,以达到抑制破骨细胞的骨吸收、促进成骨细胞的骨形成,最终发挥防治骨质疏松的作用.

目的 研究不同比例益气活血药对舒张性心力衰竭(DHF)大鼠的疗效,探讨其对心肌细胞钙稳态的影响机制.方法 采用改良缩窄腹主动脉术制备压力负荷致DHF大鼠模型.将大鼠分为假手术组、模型组、益气组(黄芪3 g、党参1.5 g)、益气活血1:1组(黄芪3 g、党参1.5 g、丹参3g、三七1g)、益气活血2:1组(黄芪6g、党参3g、丹参3g、三七1g),每组20只,连续干预12周.治疗4、12周进行心功能检测,测量舒张期左室前壁厚度、舒张期左室后壁厚度、舒张期左室内径、左室射血分数和左室短轴缩短率及舒张早期跨二尖瓣血流速度(E)与舒张早期二尖瓣环运动幅度(e)比值(E/e);12周进行血流动力学检测,分别在静息状态和盐酸多巴胺负荷状态下记录左室压力下降速率、左室舒张末期压力(LVEDP)以评价左室舒张功能,记录左室压力上升速率,左室收缩压力(LVESP)以评价左室收缩功能,并记录心率及颈动脉压力;12周后处死大鼠,检测心肌细胞舒缩功能及钙转运情况,测量心肌细胞的收缩速率、舒张速率、收缩50％时间(CT50)和舒张50％时间(RT50);测定钙释放速率、钙回摄速率、钙释放50％时间(CaT50-on)和钙回摄50％时间(CaT50-off),分析钙瞬态数据;Western blot法检测钙转运相关蛋白钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、蛋白激酶A(PKA)、16-丝氨酸位点磷酸化受磷蛋白(PLBS16)、17-苏氨酸位点磷酸化受磷蛋白(PLBT17)表达水平.结果 干预12周后,全部治疗组均改善大鼠舒缩功能LVEDP、RT50、CT50,益气活血2:1组改善舒张早期二尖瓣血流速度E峰/舒张早期二尖瓣环纵向运动速率e峰(E/e)比值、多巴胺负荷下LVEDP和逆转心室重构(降低左室前壁和后壁厚度).在细胞水平,全部治疗组均缩短心肌细胞CT50、RT50、CaT50-on和降低CaMKⅡ表达,两组益气活血治疗组还可降低PKA过表达,益气活血2:1组可降低CaT50-off和改善PLBS16低磷酸化.结论 益气和活血药物以2:1比例配伍比1:1配伍治疗DHF具有更好的疗效,其作用机制可能与调节钙转运有关.

目的 提出一种基于真实颈动脉狭窄患者的双向流固耦合计算方法,用于分析不同类型颈动脉斑块在病变处的血流动力学参数以及斑块自身的变形和应力变化.方法 对颈动脉中度狭窄病人CT血管造影数据进行3D建模,分离出颈动脉血管壁模型和斑块模型,并进行瞬态流固耦合计算.模拟颈动脉粥样硬化的早期到形成斑块,将斑块类型分为增厚斑块、脂质斑块、混合斑块和钙化斑块,其中增厚斑块视为无斑块的情况,代表血管内膜-中膜的增厚,并对不同斑块类型的狭窄颈动脉进行对比分析.结果 不同类型斑块对整体血流流动影响不大,但是脂质斑块病变处的壁面剪切应力低于其余斑块;以增厚斑块作为对照,斑块出现会抑制动脉的扩张,其中脂质斑块最为明显;钙化斑块有最高的平均结构应力,相反脂质斑块平均结构应力则是最低.结论 本文所提出的计算方法能够同时对流体和固体区域进行分析.研究结果有助于更好理解不同斑块类型对于颈动脉病变处的影响.