目的 探究畅舟通便方对功能性便秘(functional constipation,FC)合并抑郁大鼠的干预机制.方法 采用盐酸小檗碱法联合慢性不可预知温和刺激建立功能性便秘合并抑郁样行为大鼠模型,随机分为空白组、模型组、乳果糖组及畅舟通便方高、中、低剂量组,干预 5 周.分别于干预前、干预后计算粪便含水量;干预结束后计算小肠推进率;分别于干预前、干预后采用强迫游泳实验、糖水偏好实验评估大鼠的抑郁样行为水平;HE染色观察结肠黏膜形态;尼氏染色观察海马CA1、DG区锥体细胞形态和数量;Western Blot法检测各组大鼠结肠组织的TRP离子通道香草香素 4 型(TRPV4)及海马脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体(TrkB)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)蛋白相对表达量.结果 与空白组比较,模型组大鼠的粪便含水率明显减少(P＜0.001),小肠推进率明显降低(P＜0.01),糖水偏好指数明显下降(P＜0.001),海马CA1 区、DG区的锥体细胞数量明显减少(P＜0.001),结肠TRPV4 以及海马BDNF、TrkB、MAPK、CREB蛋白含量均明显下降(均P＜0.001).与模型组比较,畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组大鼠的粪便含水率均明显增高(P＜0.001,P＜0.01);畅舟通便方高、低剂量组及乳果糖组的小肠推进率明显增高(P＜0.01,P＜0.05);畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组的糖水偏好指数明显升高(P＜0.01,P＜0.05);结肠病理无异常;畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组的海马CA1、DG区锥体细胞数目明显增多(P＜0.01,P＜0.001);畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组的结肠TRPV4 含量明显增加(P＜0.001),海马BDNF、TrkB、MAPK、CREB蛋白含量均明显增加(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 畅舟通便方干预后可明显提高功能性便秘合并抑郁模型大鼠结肠的TRPV4 含量,增加粪便含水量,促进肠蠕动,可改善便秘;同时TRPV4 可激活BDNF/TrkB/MAPK通路,引发下游CREB的增高,从而改善神经可塑性,减轻部分抑郁样行为.

目的:评价瞬时受体电位香草酸4(TRPV4)在右美托咪定改善机械通气致脑损伤小鼠认知功能降低中的作用。方法:清洁级健康雄性C57BL6小鼠90只，体质量20~25 g，8~12周龄，采用随机数字表法分为5组( n＝18)：对照组(C组)、机械通气组(V组)、HC-067047组(H组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+GSK1016790A组(DG组)。C组不行机械通气，自主呼吸空气6 h；V组机械通气6 h；H组机械通气3和6 h时分别脑室内注射TRPV4阻断剂HC-067047 10 mmol；D组和DG组机械通气前30 min腹腔注射右美托咪定50 μg/kg；DG组机械通气前60 min脑室内注射TRPV4激动剂GSK1016790A 5 μmol。每组随机取6只小鼠分别于机械通气前1 d、机械通气后3和7 d时行Morris水迷宫实验。机械通气后1 d，每组随机处死6只小鼠取脑组织，采用TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡情况，计算凋亡指数。每组随机处死6只小鼠取海马组织，采用Western blot法检测TRPV4、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)、p-Akt、Bcl-2、Bax和caspase-3的表达。 结果:与C组比较，V组和DG组机械通气后3和7 d逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马TRPV4和caspase-3表达上调，p-Akt表达下调，Bcl-2/Bax比值降低，神经元凋亡指数升高( P<0.05)；与V组比较，D组和H组机械通气后3和7 d逃避潜伏期缩短，穿越原平台位置次数增加，海马TRPV4和caspase-3表达下调，p-Akt表达上调，Bcl-2/Bax比值升高，神经元凋亡指数降低( P<0.05)；与D组比较，DG组机械通气后3和7 d逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马TRPV4和caspase-3表达上调，p-Akt表达下调，Bcl-2/Bax比值降低，神经元凋亡指数升高( P<0.05)。 结论:TRPV4参与了右美托咪定改善机械通气致脑损伤小鼠认知功能降低的过程，与其上调p-Akt表达，抑制海马神经元凋亡有关。

目的:评价瞬时受体电位香草酸1(TRPV1)/核因子-κB (NF-κB)信号通路在右美托咪定减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠100只，体重270~320 g，4~5月龄，采用随机数字表法分为5组( n＝20)：对照组(C组)、VILI组(V组)、AMG9810组(A组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定＋RTX组(DR组)。采用潮气量40 ml/kg机械通气4 h的方法制备VILI模型。A组机械通气前1 h腹腔注射TRPV1抑制剂AMG9810 30 mg/kg；D组与DR组机械通气前经20 min静脉输注右美托咪定5.0 μg/kg，机械通气期间以5.0 μg·kg -1·h -1的速率静脉输注；DR组机械通气前连续3 d每天腹腔注射TRPV1激动剂RTX 70 μg/kg。机械通气4 h时，检测支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-1β、TNF-α和IL-6浓度，测定氧合指数(OI)和肺湿重/干重(W/D)比值，观察肺组织病理学结果，行肺损伤评分。Western blot法检测肺组织TRPV1和NF-κB的表达，RT-PCR法检测TRPV1 mRNA和NF-κB mRNA的表达。 结果:与C组比较，V组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高，OI降低，W/D比值和肺损伤评分升高，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达上调( P<0.05)；与V组比较，A组、D组、DR组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度降低，OI升高，W/D比值和肺损伤评分降低，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达下调( P<0.05)；与D组比较，DR组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高，OI降低，W/D比值和肺损伤评分升高，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达上调( P<0.05)。 结论:右美托咪定减轻大鼠VILI的部分机制与抑制TRPV1/NF-κB信号通路激活，抑制肺组织炎症反应有关。

目的:观察祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠咳嗽次数、气道反应性及瞬时受体电位香草素4(TRPV4)/P2X3信号通路相关指标的影响，初步探讨其疗效机制。方法:本研究为实验性研究。采用随机数字表法，将25只SPF级雄性健康豚鼠随机分为空白组、模型组、中药组、TRPV4抑制剂组、P2X3抑制剂组，每组5只。除空白组外，其余各组建立咳嗽敏感性增高豚鼠模型。造模成功后，空白组及模型组给予生理盐水，中药组给予祛风宣肺方，TRPV4抑制剂组及P2X3抑制剂组分别给予GSK2193874、AF-353，干预7 d。用TRPV4激动剂GSK1016790A测定各组豚鼠的咳嗽次数，肺功能仪检测豚鼠气道阻力，酶联免疫吸附试验法检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-8、IL-1β水平及支气管肺泡灌洗液(BALF)中TRPV4、P2X3、P物质(SP)蛋白表达水平，蛋白质印迹法检测肺组织中TRPV4、P2X3、SP蛋白表达。结果:与空白组比较，模型组咳嗽次数增多[(4.00±0.82)次比(14.75±2.22)次， P<0.01]，气道阻力[氯化乙酰胆碱浓度为400 mg/L：(2.32±1.07) cmH 2O·s/L比(6.50±2.03) cmH 2O·s/L，800 mg/L：(2.88±0.86) cmH 2O·s/L比(9.47±3.52) cmH 2O·s/L]、血清炎性因子[IL-6、IL-8、IL-1β分别为(16.32±0.17) ng/L比(24.49±0.19) ng/L、(33.48±1.36) ng/L比(59.33±2.15) ng/L、(10.71±1.22) ng/L比(38.79±2.22) ng/L]、BALF及肺组织相关指标[BALF中TRPV4、P2X3、SP分别为(46.14±0.35) μg/L比(91.62±0.25) μg/L、(78.37±0.35) μg/L比(156.62±0.25) μg/L、(38.20±1.75) μg/L比(79.84±2.45) μg/L，肺组织中TRPV4、P2X3、SP分别为(0.34±0.01)比(1.09±0.12)、(0.28±0.09)比(0.77±0.18)、(0.26±0.04)比(0.87±0.09)]升高(均 P<0.01)。与模型组相比，中药组咳嗽次数减少[(2.00±0.82)次]，气道阻力[氯化乙酰胆碱浓度为400 mg/L：(4.01±0.43) cmH 2O·s/L，800 mg/L：(3.77±0.73) cmH 2O·s/L]、血清炎性因子[IL-6、IL-8、IL-1β分别为(18.94±0.43) ng/L、(36.42±1.60) ng/L、(25.20±3.22) ng/L]、BALF及肺组织相关指标[BALF中TRPV4、P2X3、SP分别为(82.24±0.33) μg/L、(141.09±0.88) μg/L、(59.74±2.75) μg/L，肺组织中TRPV4、P2X3、SP分别为(0.45±0.02)、(0.38±0.09)、(0.47±0.05)]降低( P<0.05或 P<0.01)。 结论:祛风宣肺方可降低模型豚鼠咳嗽敏感性，减轻气道反应性，可能与抑制TRPV4/P2X3信号通路、减轻气道神经源性炎症有关。

目的:观察芳樟醇通过瞬时受体电位香草酸1(TRPV1)通路对中枢及外周神经的影响，以及其缓解肠易激综合征(IBS)内脏高敏感的作用。方法:选择36只无特定病原体动物级雌性Sprague-Dawley(SD)新生幼鼠，其中30只用于行为学实验，6只用于电生理实验。行为学实验：将30只SD新生幼鼠随机分为正常对照组(结直肠内注射0.2 mL 0.9%氯化钠溶液)，新生期结肠炎性刺激(NCI)组(结直肠内注射0.2 mL 0.5%的乙酸溶液)，以及芳樟醇20、50、100 mg/kg组(NCI造模成功后，在5周龄时分别予以芳樟醇20、50、100 mg/kg灌胃)；在6周龄时，通过结肠扩张试验评估各组大鼠的腹部撤回反射(AWR)评分和痛阈压力值(AWR评分为3分时的充气压力值)；在行为学观察结束后1 h，采用蛋白质免疫印迹法和免疫组织化学法检测各组大鼠结直肠黏膜和脊髓中的TRPV1蛋白质表达水平。电生理实验：采用6~7周龄雌性SD大鼠制作离体脊髓横切片，每只大鼠随机选取5~8个神经元进行全细胞膜片钳记录，分别记录芳樟醇、河豚毒素和抗辣椒素对胶状质区神经元自发性兴奋性突触后电流(sEPSC)的作用。统计学方法采用独立样本 t检验和配对 t检验。 结果:NCI组大鼠在40 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)压力下的AWR评分高于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组[(2.5±0.2)分比(1.0±0.3)、(1.5±0.3)、(1.5±0.2)、(1.5±0.2)分]，在60 mmHg压力下的AWR评分高于正常对照组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组[(3.8±0.2)分比(2.3±0.4)、(2.3±0.5)、(2.0±0.3)分]，差异均有统计学意义( t＝4.39、2.45、3.16、3.16、3.31、2.88、5.97； P＝0.001、0.034、0.010、0.010、0.008、0.028，<0.001)。NCI组大鼠的痛阈低于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组[(35.8±2.0) mmHg比(55.8±1.5)、(49.2±2.4)、(53.3±2.1)、(55.0±1.8) mmHg，差异均有统计学意义( t＝－7.91、－4.28、－6.01、－7.06， P<0.001、＝0.002、<0.001、<0.001)。蛋白质印迹法检测结果显示，NCI组大鼠结直肠中的TRPV1蛋白质相对表达水平高于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组(0.86±0.03比0.32±0.03、0.68±0.01、0.45±0.03、0.56±0.02)，脊髓中的TRPV1蛋白质相对表达水平高于正常对照组、芳樟醇20 mg/kg组、芳樟醇50 mg/kg组、芳樟醇100 mg/kg组(0.91±0.02比0.34±0.03、0.72±0.03、0.51±0.06、0.63±0.05)，差异均有统计学意义( t＝12.44、5.14、9.68、7.69、19.14、5.13、6.72、5.60， P<0.001、<0.001、<0.001、<0.001、<0.001、<0.001、＝0.001、<0.001)。给予2 mmol/L芳樟醇灌注给药4 min时sEPSC的频率和外向电流与同一胶状质区神经元给予0.5 μmol/L河豚毒素和2 mmol/L芳樟醇联合灌注给药4 min时比较[ n＝5，(23.84±4.81) Hz比(20.54±5.71) Hz、(7.60±0.35) pA比(7.62±0.75)pA]，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。给予2 mmol/L芳樟醇灌注给药4 min时sEPSC的频率高于同一胶状质区神经元给予10 μmol/L抗辣椒素和2 mmol/L芳樟醇联合灌注给药4 min时[ n＝5，(20.17±2.55) Hz比(14.09±2.98) Hz]，差异有统计学意义( t＝3.58、 P＝0.021)；外向电流比较[(7.42±0.78) pA比(7.03±1.32)pA]，差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:芳樟醇部分通过TRPV1通道缓解IBS内脏高敏感，这些效应可能与其引起胶状质区神经元细胞膜电位超极化有关。

目的:旨在深入探索慢性鼻窦炎（CRS）的分子机制，识别关键细胞亚群和基因，构建有效的诊断模型，并筛选潜在的治疗药物。方法:通过单细胞转录组测序数据鉴定CRS中的关键细胞亚群。通过高维加权基因共表达网络分析（high dimensional weighted gene co-expression network analysis，hdWGCNA）和多种机器学习算法的联合应用，筛选CRS的关键基因并构建CRS的诊断模型。通过孟德尔随机化和共定位分析进行因果推断分析。使用分子对接技术进行靶点药物的鉴定，并通过免疫荧光染色对生信分析的结果进行验证。采用Graphpad Prism、R、python和Adobe Illustrator软件进行数据及图像处理。结果:CRS尤其是嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉（ECRSwNP）中基底细胞和基上皮细胞占比增加（ P=0.001）。hdWGCNA显示“黄色模块”与CRS中基底细胞和基上皮细胞密切相关。采用单因素逻辑回归和最小绝对值收敛和选择算法（least absolute shrinkage and selection operator，LASSO）筛选出13个关键基因（ CTSC、 LAMB3、 CYP2S1、 TRPV4、 ARHGAP21、 PTHLH、 CDH26、 MRPS6、 TENM4、 FAM110C、 NCKAP5、 SAMD3和 PTCHD4）。基于这13个基因，使用多种机器学习算法构建出有效的CRS诊断模型（AUC=0.958）。孟德尔随机化分析显示组织蛋白酶C（cathepsin C， CTSC）与CRS具有因果关系（逆方差加权： OR=1.06， P=0.006），共定位分析证实 CTSC与CRS具有共享的遗传变异（PPH4/PPH3>2）。分子对接结果显示，对乙酰氨基酚与CTSC具有较好的结合能力（结合能：-5.638 kcal/mol）。免疫荧光染色实验表明CRS中CTSC +细胞增多。 结论:本研究综合运用多种生物信息学方法，识别了CRS中的关键细胞类型和基因，构建了有效的诊断模型，强调了 CTSC在CRS中的关键作用，为CRS的治疗提供了新的靶点。

耳石是附着于内耳椭圆囊、球囊囊斑上的钙盐结晶（主要成分为碳酸钙，还有少部分磷酸钙等），是囊斑的重要组成部分，在维持前庭器官正常功能方面不可或缺。耳石调节蛋白，如质膜钙ATP酶异构体2（plasma membrane Ca 2+-ATPase isoform 2，PMCA2）、Pendrin蛋白、碳酸酐酶（carbonic anhydrase，CA）、瞬时感受器电位V家族5/6（transient receptor potential vanilloid 5/6，TRPV5/6）等，在耳石的形成和维持过程中发挥重要作用。这些调节蛋白的表达异常、功能缺陷可导致耳石微环境Ca 2+、HCO 3-分泌障碍、内淋巴pH值下降及Ca 2+-HCO 3-比例失调，引起耳石形态结构、功能发生变化，从而导致前庭疾病（如良性阵发性位置性眩晕）。本文对耳石调节蛋白相关研究进行了总结，为相关基础及临床研究提供思路。

目的:探讨生姜有效成分6-姜酚抗运动病作用的内耳相关机制。方法:SD大鼠30只，按照实验设计分为对照组、旋转组、6-姜酚（50 mg/kg）组、6-姜酚+钌红（5 mg/kg）组、单独钌红（5 mg/kg）组，每组6只。按照实验设计旋转刺激SD大鼠，诱导其产生对0.15%糖精溶液的条件性厌饮行为，模拟运动病。利用qRT-PCR、Western blotting、ELISA等生物技术检测大鼠内耳水通道蛋白2（AQP2）、血浆精氨酸加压素（AVP）的V2受体（V2R）和瞬时感受器电位离子通道4（TRPV4）mRNA和蛋白的表达水平，并观察TRPV4拮抗剂钌红对6-姜酚抗运动病效果的影响。结果:6-姜酚抑制旋转刺激后，大鼠内耳AQP2 mRNA和蛋白的表达水平明显升高（ P<0.05），TRPV4 mRNA和蛋白表达水平明显降低（ P<0.05或 P<0.01），并降低V2R mRNA和蛋白的表达水平（ P<0.05）。单独使用钌红（5 mg/kg）诱导，大鼠对糖精溶液的饮用量明显减少（ P<0.01）；在给予6-姜酚的同时使用钌红（5 mg/kg），则消除了6-姜酚预处理对旋转刺激后大鼠糖精溶液饮用量减少的抑制作用（ P<0.01）。 结论:6-姜酚的抗运动病机制可能与其影响内耳V2R、TRPV4的转录和表达，进而影响AQP2的表达有关。

目的 构建特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)寒湿证病证结合小鼠模型,并对模型进行宏观表征及微观指标评价.方法 将Balb/c小鼠随机分为正常对照组、疾病模型组、寒湿证组、病证结合组,每组 6 只.其中正常对照组小鼠外涂基质液;疾病模型组小鼠外涂二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene,DNCB),模拟特应性皮炎疾病模型;寒湿证组小鼠在外涂基质液基础上,采用人工气候箱模拟寒湿环境[温度(4±2)℃、相对湿度(90±5)%],并结合高脂饲料喂养模拟寒湿证;病证结合组小鼠在DNCB造模基础上,结合寒湿证证候模拟方法进行复合造模.采用经皮水分流失测量仪对动物经皮水分流失(transepidermal water loss,TEWL)进行测量和评估;对小鼠皮炎和寒湿证证候情况进行观察评价;对搔抓行为进行记录分析;HE染色观察小鼠背部皮肤组织病理改变,并对其表皮厚度和炎症细胞浸润情况进行分析;Western blot法检测皮肤中紧密连接蛋白 1(Claudin-1)、瞬时受体电位香草酸 3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)和TRPV4 蛋白的表达水平;利用流式细胞术分析淋巴结辅助性T细胞17(helper T cells 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比值.结果 与疾病模型组比较,病证结合组小鼠的证候评分明显升高(P<0.001),TEWL值明显升高、背部皮肤表皮厚度明显增加(P<0.05),背部皮肤的Claudin-1、TRPV3 蛋白表达量显著降低(P<0.01),而TRPV4 蛋白表达显著升高(P<0.05).结论 采用DNCB进行特应性皮炎疾病造模,并结合寒湿环境及高脂饮食的寒湿证造模方式,能够成功构建特应性皮炎寒湿证病证结合小鼠模型.该研究为后续深入探索特应性皮炎寒湿证病证结合动物模型构建及中药复方对AD的药效学研究提供了较理想的动物模型.

目的 基于"血水同源"理论探讨清通化瘀汤对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑水肿的影响及相关机制.方法 本实验时间为2021年5月.选取180只成年健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法将其分为空白组、假手术组、CIRI组、清通化瘀汤组、通心络组,每组36只.空白组大鼠正常饲养,不做任何处理.造模前7 d,假手术组、CIRI组大鼠给予等体积蒸馏水预灌胃,清通化瘀汤组大鼠给予清通化瘀汤2.01 g/kg预灌胃,通心络组大鼠给予通心络0.12 g/kg预灌胃;之后,假手术组、CIRI组、清通化瘀汤组、通心络组大鼠制备高脂血症模型;高脂血症模型制备成功后,CIRI组、清通化瘀汤组、通心络组大鼠制备CIRI模型.造模后次日至取材当天,各组大鼠灌胃方法同前.检测五组大鼠造模后7 d血脂指标(血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平)、神经功能缺损程度(Zea-longa评分),造模后3 h、1 d、3 d、7 d脑含水量,造模后1、3、7 d脑梗死面积,造模后3 h、1 d、3 d、7 d脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、水通道蛋白4(AQP4)、瞬时受体电位香草素受体4型通道(TRPV4)蛋白表达水平.结果 造模后7 d,假手术组、CIRI组、清通化瘀汤组、通心络组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平高于空白组,血清HDL-C水平低于空白组(P＜0.05).造模后7 d,清通化瘀汤组、通心络组血清TC、TG、LDL-C水平及Zea-longa评分低于CIRI组,血清HDL-C水平高于CIRI组(P＜0.05).造模后3 h、1 d,CIRI组大鼠脑含水量高于空白组(P＜0.05);造模后1 d,清通化瘀汤组大鼠脑含水量低于CIRI组(P＜0.05).造模后1、3、7 d,清通化瘀汤组和通心络组大鼠脑梗死面积小于CIRI组(P＜0.05).造模后3 h、1 d、3 d、7 d,CIRI组、清通化瘀汤组、通心络组大鼠脑组织GFAP、AQP4、TRPV4蛋白表达水平高于空白组、假手术组,清通化瘀汤组、通心络组大鼠脑组织GFAP、AQP4、TRPV4蛋白表达水平低于CIRI组,清通化瘀汤组大鼠脑组织GFAP、AQP4、TRPV4蛋白表达水平低于通心络组(P＜0.05).结论 清通化瘀汤能有效改善CIRI模型大鼠血脂水平,减轻神经功能缺损及急性期脑水肿程度,缩小脑梗死面积;其减轻脑水肿的机制可能与抑制GFAP、AQP4、TRPV4蛋白表达有关.