目的:探讨经典型蛋白激酶C（PKC）对低氧诱导的小鼠远端肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖及细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（Akt）表达的影响。方法:利用Dynal MPC-1磁分离器分离含铁粉的远端肺小动脉，原代培养并鉴定肺动脉平滑肌细胞。应用PKC激动剂（PMA）、PKCα抑制剂（safingol）、PKCβⅠ抑制剂（Go6976）、PKCβⅡ抑制剂（LY333531）分别干预细胞。在常氧和低氧条件下，采用免疫印迹法观察cPKC亚型蛋白表达变化以及ERK1/2、Akt磷酸化水平变化。应用PKCα、PKCβ的慢病毒载体，通过病毒转染技术特异性敲减目标基因活性，采用免疫印迹法观察低氧诱导小鼠PASMC中cPKC亚型蛋白表达变化，以及ERK1/2、Akt磷酸化水平变化。结果:采用Brdu法，检测到用safingol、Go6976、LY333531分别抑制cPKCα、βⅠ和βⅡ时，低氧诱导的PASMC增殖能力受到明显抑制，与低氧对照组相比，Brdu阳性细胞率分别为（7.35±0.26）% vs（11.28±0.43）%，（3.76±0.25）% vs（7.98±0.28）%和（4.12±0.46）% vs（7.78±0.53）%；且PMA在常氧条件下可显著促进PASMC的增殖能力，与常氧对照组相比，Brdu阳性细胞率分别为（9.65±0.47）% vs（6.34±0.52）%，（9.34±0.38）% vs（5.42±0.21）%和（7.78±0.53）% vs（4.12±0.46）%；此外经过PKCα、PKCβ的慢病毒载体转染细胞后，也发现低氧转染组的PASMC增殖能力较空载对照组显著下降，Brdu阳性细胞率分别为（3.58±0.54）% vs（5.97±0.63）%。用safingol、Go6976、LY333531分别抑制cPKCα、βⅠ和βⅡ表达后，低氧诱导的PASMC中ERK1/2、Akt的磷酸化水平较对照组显著降低，使用safingol之后，ERK1/2、Akt的磷酸化水平分别为：0.56±0.07 vs 1.08±0.13和0.49±0.04 vs 0.97±0.08，使用Go6976之后，ERK1/2、Akt的磷酸化水平分别为：0.41±0.09 vs 0.79±0.10和0.48±0.09 vs 0.82±0.16，使用LY333531之后，ERK1/2、Akt的磷酸化水平分别为：0.42±0.03 vs 0.87±0.06和0.34±0.07 vs 0.78±0.05；PMA可使常氧条件下PASMC中ERK1/2、Akt的磷酸化水平增高，分别为1.25±0.12 vs 0.41±0.07和0.98±0.06 vs 0.37±0.08；利用病毒转染技术对cPKCα、β的表达进行特异性敲底，发现在低氧条件下，转染细胞后均可使细胞中ERK1/2磷酸化水平显著降低，其磷酸化水平为0.29±0.06 vs 0.76±0.05，而Akt磷酸化水平较对照组无明显变化。 结论:激动剂及抑制剂干预或病毒转染可使PASMC中cPKCα、βⅠ和βⅡ表达下降，可显著抑制低氧诱导的小鼠远端PASMC异常增殖，其作用机制可能与cPKCα、βⅠ和βⅡ蛋白表达上调有关。低氧可能通过上调cPKCα、βⅠ和βⅡ的蛋白表达，使得ERK1/2磷酸化水平增高，最终引起小鼠远端PASMC的异常增殖，参与低氧性肺动脉高压的形成过程。

目的:全面阐明矿物藏药铁粉的基原和炮制方法.证实铁粉可经过合理的炮制后消除其毒性,具有一定的药效.方法:通过筛选公元8～20世纪的22部藏医药古籍文献,对矿物藏药铁粉的记载内容进行对比分析,考证铁粉的名称、品质、性味、功效及炮制方法.结果:经考证铁粉的藏文名称为"()",音译为"吉合屑",意译为"铁粉"和"铁屑",味酸,性凉,具有解毒、干黄水、消炎作用,主治肝脏中毒症、肝病、眼疾、浮肿、疮疡等病症.品质主要以产源、性质、品质分类,藏医药常用产于铁矿石的品质细腻而偏白的"雌铁"粉末为原料经炮制入药.其炮制方法主要有煮制法和煅烧法.含铁粉或铁灰的方剂主要以药味和药效相似进行配伍,对肝病和眼疾具有一定的治疗作用.结论:矿物藏药铁粉在藏医药应用历史中已具有明确的基原记载、系统的炮制方法、全面的组方配伍,值得进一步挖掘与研究药用价值.

目的 研究纳米铁去除水体中大肠杆菌的影响因素及特性.方法 将纳米铁(40～200 mg/L)投加到不同pH值(5.0～9.0)、温度(20～40℃)和大肠杆菌初始浓度(104～106 CFU/ml)的细菌悬液中,振荡培养(120 r/min),在预设时间点(10、30min和1、2、4、6、8h)取样培养后用平板计数法进行大肠杆菌计数.同时将纳米铁与普通铁对大肠杆菌的去除能力进行比较,并且将纳米铁(120 mg/L)残渣进行重复利用,考察纳米铁残渣对大肠杆菌的去除效果.结果 随着纳米铁投加量的增加、大肠杆菌初始浓度的降低、pH值的降低和温度的降低,纳米铁对大肠杆菌的去除量增加.纳米铁(120mg/L)对大肠杆菌的去除能力(2.72 log)比普通铁粉(2.21 log)高,并且在剩余纳米铁的连续反应中,3次反应后的剩余纳米铁对大肠杆菌仍然有较强的去除能力.结论 纳米铁对大肠杆菌具有优异的去除效果,明显优于普通铁,且纳米铁去除效果受纳米铁投加量、大肠杆菌初始浓度、温度和pH值的影响.

目的 探讨甲基丙烯酸羟乙酯共聚物液体栓塞剂(HEMA-MMA)栓塞兔VX2肝肿瘤的可行性及有效性.方法 采用CT引导下“体外预装示踪一步植入技术”制作兔肝VX2肿瘤模型,21天后行肿瘤栓塞治疗.将少量羰基铁粉与栓塞剂混合,栓塞1只模型,测量其进入血管的内径,对其余肿瘤模型应用HEMA-MMA进行栓塞.A组栓塞终点为肝亚段栓塞(门静脉分支显影),B组栓塞终点为肿瘤染色消失,保留肝左动脉主干,各5只.术后即刻及第1、3天行CT平扫,术后第7、14、28、42天行增强CT扫描,明确有无残余瘤及转移.发现残余瘤或转移时,再随访1周,处死实验兔取材.若术后观察42天无残余瘤及转移,则视为肿瘤完全栓塞坏死,处死实验兔取材,行病理学检查.于术前1天和术后第1、3、7、10、14天抽取耳缘静脉血,检测转氨酶及胆红素.结果 11只实验兔造模成功.栓塞剂可进入内径30～300 μm的肿瘤动脉内.术后即刻CT显示肿瘤周边高密度,术后第1天肿瘤周边密度减低,中心区密度升高,术后第3天肿瘤肿胀,密度均匀,低于正常肝组织.增强CT示A组肝内病变均完全坏死,无强化,术后观察42天无残余瘤及转移,肿瘤与肝组织分界清,肿瘤完全坏死机化,周边可见纤维组织包裹;B组术后第14天4只存在肝内残余瘤,位于肿瘤周边,坏死区为凝固性坏死,1只肝内病变坏死无强化,但肺及肝内均见多发转移.术后兔转氨酶逐渐升高,第3天达到高峰,7天后逐渐好转.结论 HEMA-MMA可用于栓塞治疗兔VX2肝肿瘤,可进入内径为30～300 μm的肿瘤血管;采用该栓塞剂进行肝亚段栓塞,可使肿瘤完全坏死.

李师傅是杨医生多年的老病人,但他一开始是不信任社区医生的.他有超过10年的高血压、糖尿病病史,但是因为一直不把自己的病当回事,不规律服药、不控制饮食,且吸烟,血糖一直控制不佳.一次意外李师傅小腿受伤,他自己在家涂抹"消毒药水"始终不见好.无奈之下只好来医院就诊,杨医生看了李师傅的伤口,详细询问了病史后告诉他:"你的伤口之所以迟迟不好,和伤口的位置有关,但更重要的是血糖没有控制好"李师傅听了非常意外,他万万没想到平时不痛不痒的糖尿病竟然会让他这个看起来只有指甲盖大小的伤口长了2个月都没长好.杨医生针对李师傅的情况对他进行了认真细致的健康宣教,包括规范用药、饮食控制、如何锻炼身体等.针对李师傅的伤口情况建议他先到上级医院的专科处理,然后回到中心继续换药治疗.通过一段时间的规范治疗和血糖控制,李师傅的伤口很快就愈合了.经过这次事情,加上杨医生苦口婆心的宣教,定期电话跟踪随访,李师傅对高血压、糖尿病有了新的认识,逐渐正视起自己的疾病,知道要控制饮食、锻炼身体,也明白了规律服药、定期复查的重要性.

以平邑甜茶(Malus hupehensis var. pinyiensis Jiang)幼苗为试材,用过氧化钙和还原性铁粉控制根系分布区(根区)O2浓度,分析根系特征和干物质积累.结果表明,当根区O2浓度由17.47％～19.35％ (对照水平)降至14.03％～15.37％时,根系长度、根系表面积、根系分叉数、根系分形维数、根系活力、植株干物质积累量及根/冠比显著下降,降至10.51％～11.95％使幼苗在7 d内几乎全部死亡;根区增氧(增至21.24％～22.47％)显著促进幼苗生长发育和干物质积累,并显著增大根/冠比;根系对根区O2浓度的变化比地上部更敏感.

目的 探讨阿加曲班起始原料3-甲基-8-喹啉磺酰氯中的异构体杂质来源与合成方法,为阿加曲班的质量控制提供依据和杂质对照品.方法 杂质A以5-溴-3-甲基喹啉为起始物,依次进行Buchwald、脱保护基、与亚硝酸盐重氮化及Sandermeyer等反应制得;杂质B以5-溴-2-硝基苯甲醛为起始物,经铁粉还原、关环,再经Buchwald、脱保护基、重氮化及Sandermeyer等反应制得.结果 该试验所合成的2个异构体杂质经液相色谱-质谱联用(LC-MS)及氢谱核磁共振(1H-NMR)进行结构确证,与目标化合物结构相符.结论 该合成方法简单易行,合成的2个异构体杂质可作为杂质对照品,用于阿加曲班原料药的质量控制.

在实验条件下诱导四膜虫种群交配进行有性生殖时,交配后的种群中除有性后代外,还会混杂一定比例的亲本细胞,而高纯度的有性后代是研究四膜虫一些基本生物学问题的重要基础.本研究利用四膜虫交配时不能摄食并且新产生的有性后代几小时后才恢复摄食能力的特性,以嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)交配种群为对象,在其有性生殖阶段后期向交配体系中加入Fe3O4磁性纳米颗粒,未交配的亲本细胞由于能够摄入磁性颗粒而具有磁性;再利用有性后代和未交配细胞的磁性差异,在磁场作用下将有性后代分离纯化出来.通过优化过柱分离的时间点、分离柱的口径、分离柱中铁粉/石英粉的质量等分离条件,有性后代的分离纯度及收率均能达到98％以上.该分离方法亦可为其他种四膜虫或纤毛虫有性后代的分离纯化提供借鉴.

目的 探讨α-突触核蛋白(α-syn)基因敲除(α-syn-/-)小鼠是否能够抵抗高铁饮食造成的黑质(SN)酪氨酸羟化酶(TH)表达降低.方法 实验分为野生型正常饮食组、野生型高铁饮食组、α-syn-/-正常饮食组和α-syn-/-高铁饮食组.其中高铁饮食组用含质量分数0.03羰基铁粉的鼠粮喂养小鼠3个月.采用蛋白质免疫印迹实验检测各组小鼠TH的表达.结果 与野生型正常饮食组相比,野生型高铁饮食组小鼠TH蛋白表达水平降低(F=3.761,P＜0.05);α-syn-/-高铁饮食组和α-syn-正常饮食组小鼠TH蛋白表达水平比较差异无显著性(P＞0.05).结论 α-syn-/-小鼠能够抵抗高铁负载造成的SN区TH表达下降,减轻铁对SN神经元的损伤.

患者 男性,53岁.从事钢铁及铁粉加工工作10余年,主因近1年来双下肢进行性行走不稳并逐渐加重,于2017年11月20日入院.患者1年前无明显诱因出现双足麻木、乏力,但行走如常,未予重视,之后麻木症状自双足逐渐上升至膝关节并伴行走不稳如踩棉花感,偶伴有双下肢闪电样疼痛但尚能耐受,发病期间无饮水呛咳、视物模糊,无头晕头痛、恶心呕吐等症状与体征,遂以“双下肢行走不稳待查”收入院.患者自发病以来神志清楚,精神尚可,食欲一般,大小便正常,体重未见明显增减.承认冶游史,否认吸毒史,否认梅毒诊断与治疗史,长期饮酒10年(约250 g/d),其余个人史与家族史均无特殊.