目的:探讨微小RNA(miR)-4317通过锌指蛋白322(ZNF322)调控结肠癌细胞增殖和转移的分子机制。方法:选取2019年6月至2022年6月河南省人民医院收集的68例结肠癌组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析分析肿瘤组织和癌旁组织中miR-4317表达水平。人结肠癌细胞系SW1116分为miR对照组和miR-4317组，分别采用miRNA对照慢病毒和miR-4317过表达慢病毒感染建立稳转细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验、划痕实验和Transwell分析两组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-4317的靶蛋白；蛋白质免疫印迹分析肿瘤组织和细胞靶蛋白表达水平。组间比较采用 t检验。 结果:癌旁组织中miR-4317表达水平(1.13±0.14)明显高于结肠癌组织(0.67±0.11)，差异有统计学意义( t＝21.120， P<0.05)。miR对照组细胞吸光度( A)值(2.00±0.08)明显高于miR-4317组(1.13±0.14)，差异有统计学意义( t＝15.780， P<0.05)。miR对照组细胞EdU阳性率[(89.38±3.64)%]明显高于miR-4317组[(73.03±4.24)%]，差异有统计学意义( t＝7.165， P<0.05)。miR对照组细胞划痕愈合率[(86.25±4.37)%]明显高于miR-4317组[(64.72±6.68)%]，差异有统计学意义( t＝6.606， P<0.05)。miR对照组细胞侵袭数量[(133.83±8.11)个]明显高于miR-4317组[(103.50±5.28)个]，差异有统计学意义( t＝7.877， P<0.05)。ZNF322是miR-4317的靶基因。癌旁组织中ZNF322表达水平(1.11±0.14)明显低于结肠癌组织(1.59±0.24)，差异有统计学意义( t＝14.320， P<0.05)。miR对照组细胞ZNF322表达水平(1.30±0.08)明显高于miR-4317组(0.74±0.12)，差异有统计学意义( t＝9.434， P<0.05)。 结论:miR-4317在结肠癌组织中呈低表达，通过调控下游蛋白ZNF322参与结肠癌细胞的增殖和转移过程。

该研究选取了湖北五峰地区红花玉兰新品种'娇红1号'为研究材料,基于实验室前期对红花玉兰转录组测序差异显著表达基因中筛选到的645 bp花发育相关的核心片段,采用RACE技术克隆得到1个SUPERMA N类基因MwZFP10(GenBank登录号为MH037314).生物信息学分析显示,MwZFP10基因全长为1117 bp,开放阅读框726 bp,编码241个氨基酸,蛋白分子式为C1128 H1760 N322 O383 S14,分子量26.4 kD,理论等电点4.42,含有一个C2H2型锌指结构域.对比分析发现MwZFP10属于SUPERMAN类锌指蛋白,具有N端的QALGGH和C端富含亮氨酸的L(I)DLXLR(K)L保守结构域.α螺旋(Hh)、延伸链(Ee)和β转角(Bt)构成红花玉兰MwZFP10蛋白的基本结构,蛋白的三级结构具有典型的锌指空间构型.MwZFP10蛋白为亲水性蛋白,可能定位于细胞核中.半定量和实时荧光定量结果显示,MwZFP10在花器官、叶片和苞片中均有表达,且花器官的雌蕊中表达量较高.过表达MwZFP10转基因拟南芥表现为植株矮小且不育,叶片卷缩,花器官发育畸形等特征.研究认为,MwZFP10基因在植物花器官的生长和发育中起重要作用.

锌指蛋白(Zinc-finger proteins,ZNFs)可能通过调控基因转录、翻译过程,参与肿瘤的发生发展.ZNFs可通过不同的功能性结构域、反式调控原件参与下游靶基因的转录调控,ZNFs可通过招募不同的染色体修饰因子、与不同伙伴蛋白相互作用抑制或促进基因的转录.乙酰化、磷酸化等ZNFs的翻译后修饰可通过影响ZNFs与染色体的结合,参与调控基因的翻译.ZNFs可通过多种途径,促进/抑制肿瘤的发生发展.ZKSCAN3、ZNF322A及ZNF304等ZNFs可通过促进周期蛋白D2、周期蛋白D1、整合素β1的表达等途径,促进结直肠癌、肺癌及卵巢癌、胃癌等肿瘤细胞的增殖;ZNF139、ZFX、ZEB1、ZNF395等ZNFs的过表达可促进胃癌、肝癌、Ewing瘤等肿瘤的转移和侵袭.ZNF545、ZNF24、ZNF668、ZHX1、ZNF395、Kaiso等ZNFs能够作为肿瘤抑制因子抑制肿瘤的增殖、转移.