[目的]旨在从绵羊瘤胃中分离粪臭素降解菌,并评估其粪臭素降解能力和生长性能,以期开发适用于反刍动物降臭的直接饲喂微生物.[方法]以绵羊瘤胃液为分离来源,使用含有粪臭素的MSM培养基进行富集和分离,通过细菌菌落形态观察进行初步分类;应用 16S rRNA基因扩增、测序及系统发育分析进行物种鉴定;绘制菌株生长曲线,通过HPLC技术测定粪臭素降解曲线.[结果]从绵羊瘤胃液中分离出 25 株粪臭素降解菌,经菌落形态鉴定选出 11 株代表菌株进行后续研究.物种鉴定结果显示,MSML2 和MSML6 属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),MSML4、MSML5、MSML7 和MSML10 属于阿氏普里斯特氏菌(Priestia aryabhattai),MSML3 和MSML11 属于污染伯克霍尔德氏菌(Burkholderia contaminans),MSML1、MSML8 和MSML9 属于成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis).其中,MSML5 生长速度最快,在约 12 h后进入稳定期,稳定期菌体浓度最高;MSML3 和MSML8 在前 16 h生长缓慢,32 h后进入稳定期.在粪臭素降解方面,MSML2 粪臭素降解效率最高,48 h内的降解率达到 23.03%,其次是MSML7、MSML8 和MSML10,降解率均超过 20%.[结论]成功从绵羊瘤胃中分离获得 25 株粪臭素降解菌,涉及 4 个物种,首次报道了具备粪臭素降解能力的枯草芽孢杆菌、阿氏普里斯特氏菌和成都假单胞菌,为直接饲喂反刍动物的菌剂开发提供了宝贵的菌株资源.

目的:筛选防治连翘茎腐病的有效药剂及生防菌株.方法:研究不同培养基、温度、pH等因素对连翘茎腐病病原菌菌株FSJF11 和FSJF13 菌丝生长的影响;测定 8 种杀菌剂对病原菌的控制效果;采用平板对峙法,筛选连翘根际土壤的生防细菌,进行离体枝条的防效测定.结果:菌株FSJF11 菌丝生长最适条件:PDA培养基、25℃、pH为 9、致死温度为 58℃.菌株FSJF13 菌丝生长最适条件:PDA培养基、25℃、pH为 10,致死温度为 52℃.筛选获得两株生防菌株(BS301 和BA109),经形态和分子生物学鉴定,菌株BS301 和BA109 分别为枯草芽孢杆菌Ba-cillus subtilis、阿氏芽孢杆菌Bacillus aryabhattai.10%苯醚甲环唑、70%甲基硫菌灵、40%嘧菌环胺、25%吡唑醚菌酯和 75%百菌清对两株病原菌菌丝生长抑制率均达到 80%以上;离体枝条防效试验表明,75%百菌清和 25%吡唑醚菌酯及生防菌BS301 和BA109 对由菌株FSJF13 引起的连翘茎腐病离体枝条的防治效果均达 50%以上.结论:75%百菌清、25%吡唑醚菌酯及生防菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(菌株BS301)、阿氏芽孢杆菌Bacillus aryabhat-tai(菌株BA109)可用于连翘茎腐病的防治,考虑生态安全,生防菌株BS301 和BA109 可推广用于连翘茎腐病的防治.

水产养殖过程中氮元素超标易造成水质恶化,威胁水产动物的生长繁殖,亟需安全、高效的脱氮方法.从福建某水产养殖池底的污泥中筛选出一株氨氮降解菌,菌种鉴定后进行适应性驯化,并研究不同条件对菌株生长和氨氮降解的影响,随后又以亚硝态氮为唯一氮源检测菌株的好氧反硝化特性.菌株经 16S rRNA鉴定为阿氏芽孢杆菌Bacillus aryabhattai,命名为JN01;驯化后,菌株的生长、氨氮去除率均有不同程度提高,初始NH4+-N浓度为 200 mg/L的氮去除率最高达 87.29%;影响菌株脱氮的单因素实验结果表明,当NH4+-N浓度为 200 mg/L、丁二酸钠为碳源、碳氮比为 15∶1、pH 7.5、培养温度为 30℃时,菌株的氨氮降解率可以达到 92.78%.在亚硝态氮为唯一氮源的条件下,菌株JN01 也能进行好氧反硝化转化,NO2--N降解率为 82.30%.B.aryabhattai JN01 具有良好的异养硝化和好氧反硝化特性,具备同时解决养殖废水中氨氮和亚硝酸盐超标的应用潜力.

目的 对化风丹药母发酵过程中优势菌种进行分离鉴定,考察不同温度和 pH 值对优势菌株生长的影响.方法 用选择性培养基对化风丹药母发酵过程中 0 周至 6 周样品中的细菌、霉菌、酵母菌分别进行培养、菌落计数、分离纯化优势菌种;采用 16S rDNA,26S rDNA序列对优势细菌和真菌进行鉴定;分别考察阿氏芽孢杆菌、汉逊德巴利酵母菌、米曲霉的最适宜生长温度、pH值.结果 化风丹药母发酵过程中细菌 0 周至 4 周数量增加,4 周至 6 周数量趋于稳定;酵母菌在发酵0 周至3 周时数量增加,4 周至6 周数量不断减少;霉菌在0 周时没有生长,1 周至4 周数量平稳增加,5 周至 6 周霉菌数量呈现下降趋势.通过构建系统发育树,鉴定筛选出化风丹药母发酵过程中的优势菌种,以阿氏芽孢杆菌、汉逊德巴利酵母菌、米曲霉为研究对象,其生长的最适温度分别为 35、25～30、35℃;最适pH值分别为 8、6、7.结论 化风丹药母发酵过程中优势微生物分别为阿氏芽孢杆菌、汉逊德巴利酵母菌、米曲霉.

从沈阳农业大学棕壤长期定位试验站的栽培玉米土壤样品中分离筛选到高产多糖固氮菌株WN-F,从菌株鉴定、培养条件优化和固氮与产糖关系进行初步研究.对其进行形态学观察和分子生物学鉴定,酶标仪分析菌体生物量法确定菌株的生长培养条件,并分析其固氮与产糖之间的关系.结果表明,该菌株为阿氏芽孢杆菌,并命名为Bacillus aryabhattai WN-F.WN-F菌株在37℃,180 r/min情况下12h时生长量达最高值.其培养基优化配方为(L-1):蔗糖20.0 g,牛肉膏2.0 g,KH2PO40.4 g、MgSO4·7H2O 0.4 g、NaCl0.4 g、CaSO4·2H2O 0.4 g和CaCO3 2.0 g.菌株WN-F的产糖情况随着初始氮浓度的增加,呈现出抛物线关系,适宜碳氮比促进菌体合成胞外多糖.Bacillus aryabhattai WN-F是长期定位试验玉米土壤中的优势菌株,高产胞外多糖且有固氮作用,是发挥玉米联合固氮作用,减少化肥施用的候选菌株.

近年来,阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)在不同行业应用研究广泛,该文综述了阿氏芽孢杆菌发现和分布、研究方向、功能应用,展望了阿氏芽孢杆菌研究前景.

目的 分离白斑蛾蚋幼虫肠道可培养细菌,并测定其产消化酶活性和耐药性,探讨肠道细菌对白斑蛾蚋幼虫消化食物及其环境适应的影响.方法 采用传统分离培养的方法,分离纯化白斑蛾蚋幼虫肠道可培养细菌,通过16S rRNA序列分析进行分子鉴定,利用平板透明圈法筛选产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的细菌,通过水解圈(D)与菌落直径(d)的比值,比较不同细菌的产消化酶活性.利用SPSS 20.0软件进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析,当方差齐时用SNK多重比较方法;方差不齐时用Dunnett's T3进行显著性分析.针对不同肠道可培养细菌采用纸片扩散法进行药敏试验分析.结果 在白斑蛾蚋幼虫肠道中分离到可培养细菌有5属12种细菌,其中芽孢杆菌属7种,分别为越南芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌枯草亚种、苏云金芽孢杆菌、阿氏芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌和巴基斯坦短小芽孢杆菌;肠球菌属2种,分别为铅黄肠球菌、鹑鸡肠球菌;微小杆菌属、白色杆菌属和葡萄球菌属各1种,分别为深海微小杆菌,Leucobacter celer subsp.和松鼠葡萄球菌.在分离到的白斑蛾蚋肠道可培养细菌中,可产淀粉酶活性的细菌有8种,产蛋白酶活性的细菌有6种,未筛选到产纤维素酶和脂肪酶活性的细菌.8种细菌的产淀粉酶活性差异有统计学意义(F=8.779,P＜0.001).其中越南芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌枯草亚种和深海微小杆菌的产淀粉酶活性较强;6种细菌的产蛋白酶活性差异有统计学意义(F=23.980,P＜0.001),其中越南芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌枯草亚种产蛋白酶活性较强.药敏实验表明,松鼠葡萄球菌对6种抗生素耐药,鹑鸡肠球菌对5种抗生素耐药,阿氏芽孢杆菌和铅黄肠球菌对4种抗生素耐药.结论 白斑蛾蚋幼虫肠道可培养细菌具有产淀粉酶和蛋白酶能力,可能协助消化和分解食物.肠道细菌普遍具有一定的耐药性,有助于白斑蛾蚋幼虫在污浊的环境中更好的生存.

该研究以何首乌根际细菌和放线菌为实验对象,采用Salkowski法筛选具有产吲哚乙酸(IAA)能力的菌株,铬天青S(CAS)平板法筛选具有产铁载体能力的菌株,PKO无机磷培养基筛选具有溶解无机磷能力的菌株,从形态学、生理生化以及16S rDNA序列分析等方法来确定菌株的分类学地位,并研究促生菌株对何首乌种子发芽和生长的影响.结果 从196株菌株中得到2株同时具有产IAA、产铁载体和溶解无机磷的菌株F17、F42.菌株F17、F42产IAA的能力分别为38.65、33.64 mg·L-1;产铁载体的能力(As/Ar)分别为0.85、0.49;溶解无机磷的能力(D/d)分别为1.35、1.70.综合分析结果显示,菌株F17、F42分别鉴定为不解糖假苍白杆菌Pseudochrobactrum asaccharolyticum和阿氏芽孢杆菌Bacillus aryabhattai,并且发现2种菌株均对何首乌种子的萌发具有显著的促进作用.