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慢性氟中毒大鼠骨组织Gli1、β-catenin表达变化及其与骨形成增强间的相关性分析
编辑人员丨6天前
目的:观察使用刺猬蛋白(Hedgehog)信号阻断剂环巴胺(cyclopamine,Cycl)对慢性氟中毒大鼠骨组织中神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(glioma-associated oncogene homolog 1, Gli1)及β链蛋白(β-catenin)表达的影响,探讨两者表达变化在氟致骨形成增强中的意义。方法:SD大鼠48只分为4组,每组12只。对照组饮用自来水(含氟量<1 ppm),氟中毒组(F组)、氟+环巴胺组(F+Cycl组)和氟+二甲基亚砜组(F+DMSO组)分别饮用含50 ppm氟化钠(NaF)的自来水。饲养6个月后分别给F+Cycl组和F+DMSO组大鼠腹腔注射环巴胺和DMSO。检测各组大鼠尿氟含量;酶联免疫吸附试验测定血清骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)含量;HE染色观察骨组织形态计量学变化;实时荧光定量PCR法、免疫组织化学和蛋白印迹法检测骨组织中Gli1和β-catenin的mRNA和蛋白表达情况。结果:染氟后F组、F+Cycl组和F+DMSO组大鼠尿氟含量、骨小梁密度、骨小梁宽度较对照组明显增加,但3组间未见明显差异( P>0.05)。F组较对照组血清BALP含量增加,Cycl阻断后血清BALP含量明显降低( P<0.05)。与对照组比较,F组Gli1和β-catenin mRNA和蛋白均有表达增强。使用Cycl后,两者表达均较F组降低( P<0.05),而F+DMSO组则无明显变化。Gli1与β-catenin的表达呈正相关关系( r=0.476, P<0.05);Gli1、β-catenin蛋白表达与血清BALP、骨小梁密度分别呈正相关关系( r 1=0.457, r 2=0.466, r 3=0.581, r 4=0.554, P<0.05)。 结论:Cycl可阻断慢性氟中毒大鼠骨组织Gli1表达,并且其影响成骨相关因子β-catenin的表达,这可能参与到氟致骨形成增强的过程中。
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编辑人员丨6天前
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长链非编码RNA胰岛素样生长因子2-AS对大鼠骨质疏松性骨折的影响及其机制
编辑人员丨6天前
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)胰岛素样生长因子2(IGF2)-AS对骨质疏松性大鼠骨折愈合的影响及其分子机制。方法:30只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、骨折组和lncRNA IGF2-AS组,骨折组和lncRNA IGF2-AS组大鼠采用去卵巢手术建立骨质疏松大鼠模型,并在去卵巢后3个月后建立胫骨骨折模型,对照组大鼠仅去卵巢,而胫骨未骨折。lncRNA IGF2-AS组大鼠在去卵巢后2个月在胫骨注射过表达lncRNA IGF2-AS的腺相关病毒,对照组和骨折组注射空载体腺相关病毒。在建模4周后,观察3组大鼠骨折愈合情况和骨密度变化;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析骨痂组织骨形成蛋白-2、成骨细胞特异蛋白(Osterix)和成骨细胞分化因子(ODF)表达水平;生物力学分析3组大鼠胫骨生物力学变化;采用骨组织形态计量学分析矿化宽度、矿化体积、类骨质宽度和体积变化。组间计量数据采用单因素方差分析。结果:对照组大鼠胫骨完整,无骨折;骨折组大鼠骨折线明显,骨折端少量稀疏骨痂;lncRNA IGF2-AS组大鼠骨折端外骨痂致密,骨折线模糊。lncRNA IGF2-AS组大鼠胫骨骨密度[(0.087±0.003) g/cm 2]明显高于骨折组大鼠[(0.072±0.008) g/cm 2],差异有统计学意义( t=5.486, P<0.05)。lncRNA IGF2-AS组大鼠胫骨骨密度[(0.087±0.003) g/cm 2]明显高于骨折组大鼠[(0.072±0.008) g/cm 2],差异有统计学意义( t=5.486, P<0.05)。骨形成蛋白-2、Osterix和ODF表达水平(1.50±0.14、1.47±0.20、1.61±0.11)明显高于骨折组大鼠(0.64±0.11、0.53±0.09、0.73±0.10),差异有统计学意义( t=15.310、13.610、19.480, P<0.05)。lncRNA IGF2-AS组大鼠最大载荷、剪切强度和弹性模量[(32.53±2.65) N、(60.37±2.97) Kn/mm 2、(182.89±15.06) GPa]明显高于骨折组大鼠[(27.32±3.35) N、(48.06±4.97) Kn/mm 2、(148.97±14.75) GPa],差异有统计学意义( t=3.886、6.727、5.088, P<0.05)。lncRNA IGF2-AS组大鼠骨小梁相对体积、骨小梁平均骨壁厚度和矿化延迟时间[(26.10±2.44)%、(84.61±6.08) μm、(2.64±0.11) d]明显高于骨折组大鼠[(22.07±2.26)%、(76.63±3.66) μm、(2.21±0.15) d],差异有统计学意义( t=3.858、3.673、7.349, P<0.05)。 结论:lncRNA IGF2-AS可显著促进骨质疏松骨折大鼠骨形成相关蛋白表达,促进骨骼愈合,提高骨密度,增加骨折部位生物力学。
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编辑人员丨6天前
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基于超高效液相色谱-质谱联用技术的慢性肾脏病骨代谢异常大鼠血清代谢组学研究
编辑人员丨2024/4/27
目的 通过超高效液相色谱-质谱(UHPLC-MS)联用技术探索慢性肾脏病骨代谢异常(CKD-BD)大鼠血清代谢组学变化.方法 该研究于2021年1月至2022年4月进行,选择16只8周龄SPF级SD雄性大鼠经过1周适应性喂养后,采用随机数字表法分为两组,每组8只.健康对照(NC)组:使用普通大鼠饲料喂养90 d;CKD-BD组:采用高磷高腺嘌呤饲料喂养60 d之后更换高磷饲料喂养30 d后处死,并通过生化检测及骨形态计量学方法对模型进行验证.造模成功后通过UHPLC-MS比较CKD-BD组大鼠与NC组大鼠血清代谢产物变化,通过多元统计分析等方法鉴定两组间差异代谢物,并通过生物信息学方法对差异代谢产物进行功能注释.结果 与NC组大鼠相比,CKD-BD组大鼠血肌酐、血磷显著升高,血钙显著降低(P<0.01).骨形态计量学检测NC组大鼠骨矿化沉积率(MAR)为(1.90±0.61)μm/d,CKD-BD组大鼠MAR为(2.80±0.73)μm/d,差异有统计学意义(P<0.05).NC组大鼠骨形成率/骨体积(BFR/BV)为(0.41±0.20)%/d,CKD-BD组大鼠BFR/BV为(1.25±0.41)%/d,差异有统计学意义(P<0.05).代谢组学检测结果提示,与NC组相比,CKD-BD组糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白合成等通路上调.自噬、胆汁酸合成分泌、胆固醇代谢、牛磺酸和次级牛磺酸代谢、甘油磷脂代谢等通路下调(P<0.05).结论 通过UHPLC-MS技术比较CKD-BD大鼠与正常大鼠血清代谢产物,发现CKD疾病状态下血清代谢产物发生变化,CKD-BD组糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白合成通路上调,与自噬相关的代谢通路下调,这些可能参与了CKD-BD发生.
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编辑人员丨2024/4/27
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下颈椎椎弓根的显微形态学特征
编辑人员丨2024/1/6
背景:下颈椎椎弓根是脊柱后柱的主要应力部位,对人体重心稳定的维持及减轻振荡有重要意义,目前对其内部骨小梁特征、椎弓根与关节突及椎体的连接部位的特征研究鲜有报道,迫切需要了解椎弓根的精细解剖结构及其各部分关系和功能.目的:通过Micro-CT扫描下颈椎椎骨标本以观测椎弓根显微解剖学形态,测量和分析正常下颈椎椎弓根内骨小梁的微结构和形态计量学参数以评估颈椎的安全性能.方法:选取31套干燥成人下颈椎骨骼标本C3-C7进行Micro-CT扫描,通过对椎弓根内骨小梁感兴趣区的勾选与重建,观察下颈椎椎弓根内骨小梁的形态特征及走形方向,检测骨微细结构参数,并分析比较C3-C7椎弓根骨微细结构的差异性.结果与结论:①Micro-CT图像显示下颈椎椎弓根的蜂窝样骨小梁呈复杂的网状微结构,靠近皮质骨的骨小梁呈板层状,结构相对致密,并向前方椎体部和向后方关节突椎板部延伸;板状骨小梁向髓腔伸展转化为网状结构,再转化为杆状骨小梁,髓腔内杆状骨小梁分布稀疏;②骨小梁各形态参数统计结果显示,C4、C5椎弓根的骨小梁骨体积分数高于C7(P<0.05),C7椎弓根的骨表面积/骨体积高于C3、C4、C6(P<0.05),C7椎弓根的骨小梁骨表面密度高于C3、C4、C5、C6(P<0.05),C7椎弓根的骨小梁厚度高于C3、C4、C5(P<0.05),左侧椎弓根骨小梁的骨表面积/骨体积、骨表面密度比较大于右侧(P<0.05);③该文总结了C3-C7微结构变化规律,其中C7椎弓根的负荷能力及应力较差,该区发生损伤的风险较高.
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编辑人员丨2024/1/6
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木香烃内酯对生长期大鼠骨强度的影响
编辑人员丨2023/11/25
目的 研究木香烃内酯(CT)对生长期大鼠骨质量的影响.方法 1 月龄雌性 SD 大鼠 30 只,体质量(99±3)g,随机分为 3 组:对照组(Control),9 mg/(kg·d)的 CT处理组(CT-9)和 18 mg/(kg·d)的 CT处理组(CT-18),每组 10 只.适应性饲养 3 d后,灌胃给药,Control组每天灌服等体积蒸馏水,每周称一次体质量,每 4 周检测一次全身骨密度(BMD).8 周后安乐死所有大鼠,检测股骨和椎骨离体 BMD、进行 micro CT 扫描和骨生物力学实验.结果 各组大鼠实验过程中体质量未出现统计学意义,8 周时 CT-9 组和 CT-18 组的全身 BMD 及离体股骨、椎骨BMD均显著高于 Control组,CT-18 组的股骨弹性模量和最大载荷显著高于 Control组,CT-9 组和 CT-18 组的相对骨体积、骨小梁数和体积骨密度均显著高于 Control组,骨小梁分离度显著低于 Control 组.结论 CT 能提高生长期大鼠的骨质量,具有开发预防和治疗骨质疏松药物的潜力.
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编辑人员丨2023/11/25
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上牙槽前神经管及其副管形态特征的锥形束CT研究
编辑人员丨2023/11/11
目的 上牙槽前神经管(canalis sinuosus,CS)是从眶下神经管延伸至上颌骨前部的骨管,内含有上牙槽前神经血管束,CS在上颌骨前部出现的解剖变异分支称为副管(accessory canals,ACs).准确识别CS及其ACs可以降低上颌前部手术时神经血管并发症发生的可能性,改善预后.本研究的目的是评估CS及其ACs的主要形态学和形态计量学特征,以便为种植手术提供解剖学指导.方法 收集 2021 年 6 月—2022 年 6 月至山西医科大学第一医院口腔科就诊的 336 例患者的锥形束CT(cone beam computed tomography,CBCT)数据,利用NNT viewer软件测量CS及其ACs的形态计量学特征,根据性别、年龄和鼻腭管(nasopalatine canal,NPC)类型分组进行统计学分析.结果 CBCT测量分析显示ACs发生率为46.73%(157/336),ACs多呈双侧分布,垂直走行,侧切牙(51.77%)和中切牙(22.70%)的腭侧是ACs分布的主要区域.CS距中切牙根尖距离与年龄之间存在显著的线性相关性(R2=0.353,P<0.001).圆柱型NPC患者的CS直径明显大于香蕉型(P<0.05)、沙漏型(P<0.01)和漏斗型(P<0.01)NPC的患者.沙漏型NPC患者与香蕉型NPC患者对比,CS距中切牙根尖距离的差异有统计学意义(P<0.05).结论 本研究结果表明,ACs在山西人群上颌骨前部有很高的发生率,NPC类型对CS及其ACs的形态计量学特征有显著影响.根据这项研究的结果,同时评估CS及其ACs和NPC是合理的,并有助于预防种植手术过程中的并发症,临床医师在术前应更加仔细评估风险并采取合适的预防措施.
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编辑人员丨2023/11/11
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葛根素对去卵巢大鼠骨代谢平衡的影响
编辑人员丨2023/8/19
目的:探讨葛根素对去卵巢大鼠骨代谢平衡的影响.方法:将SPF级雌性Wistar大鼠60只按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组及葛根素组各15只.除空白组外,其余大鼠采用去卵巢法建立骨质疏松模型.造模成功后,空白组和模型组均皮下注射生理盐水,雌二醇组皮下注射雌二醇,葛根素组皮下注射葛根素,各组均每天注射1次,连续4周.4周后采用酶联免疫法检测各组大鼠血清骨代谢标志物骨特异性碱性磷酸酶(bone specific alkaline phosphatase,BALP)、核结合因子α1(core binding factor α1,CBF-α1)、Ⅰ型胶原羧基末端肽(Cterminal type Ⅰ collagen telopeptide,CTX-I)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(procollagen type Ⅰ amino-terminal peptide,PINP)、骨钙素(osteocalcin,OC)含量;采用显微CT影像观察各组大鼠股骨远端骨密度水平及骨小梁微结构,并进行计量学分析;采用WB法检测各组大鼠股骨及下丘脑组织骨形态发生蛋白2(bone morphogenet protein-2,BMP-2)和血管内皮生长因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)蛋白表达.结果:与空白组相比,模型组大鼠骨密度降低,骨代谢标志物BALP、CBF-α1、CTX-I、PINP、OC含量均减少(P<0.05);股骨远端相对骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、连接密度(Conn.D)、骨小梁分离度(Tb.Sp)均减少(P<0.05),结构模型指数(SMI)均增加(P<0.05);股骨及下丘脑组织BMP-2均减少(P<0.05),VEGF蛋白均增加(P<0.05).干预4周后,与模型组比较,雌二醇组与葛根素组大鼠骨密度、骨小梁微结构及骨代谢标志物均改善(P<0.05),骨强度及弹性均增加(P<0.05);骨组织BMP-2蛋白表达升高(P<0.05),VEGF蛋白表达降低(P<0.05).雌二醇组和葛根素组大鼠骨密度、骨代谢标志物含量、骨小梁结构参数、股骨及下丘脑组织中BMP-2和VEGF各指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:葛根素能够改善去卵巢大鼠骨代谢水平,增加骨量,改善骨小梁微结构,效果与雌二醇相当.
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编辑人员丨2023/8/19
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鲑鱼降钙素及甲状旁腺素(1-34)对卵巢切除大鼠椎体骨密度及骨组织形态计量学影响的比较
编辑人员丨2023/8/6
目的 比较鲑鱼降钙素(salmon calcitonin,CT)及甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)(1-34)对卵巢切除大鼠腰椎骨密度(bone mineral density,BMD)及骨组织形态计量学的影响.方法 40只3月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为4组,每组10只:假手术(Sham)组;双侧卵巢切除(OVX)组;双侧卵巢切除+甲状旁腺素(1-34)(OVX+ PTH)组;双侧7卵巢切除+鲑鱼降钙素(OVX+CT)组.OVX+CT组及OVX+ PTH组于卵巢切除术后3个月分别给予皮下注射CT或PTH(1-34).连续给药3个月后处死所有大鼠并收集标本.取L4椎体进行BMD检测.L5椎体进行Gemisa染色及骨组织形态计量学检测.结果 卵巢切除术后6个月,OVX组BMD显著低于Sham组(P<0.05),而OVX+ CT组及OVX+ PTH组椎体BMD显著高于OVX组(P<0.05),且OVX+PTH组BMD显著高于OVX+ CT组(P<0.05).OVX组BV/TV低于Sham组,OVX+ CT组高于OVX组,OVX+ PTH组BV/TV高于Sham组、OVX组、OVX+ CT组,差异均有统计学意义(P<0.05).OVX组、OVX+ CT组Tb.Th低于Sham组,OVX+ PTH组高于Sham组、OVX组、OVX+CT组,差异均有统计学意义(P<0.05).OVX组Tb.Sp高于Sham组,OVX+ CT组和OVX+PTH组低于OVX组,差异均有统计学意义(P<0.05).各组大鼠Tb.N差异无统计学意义(P>0.05).结论 CT及PTH(1-34)可显著增加卵巢切除大鼠腰椎BMD并抑制骨重建的高转换状态,且PTH(1-34)作用要优于CT.
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编辑人员丨2023/8/6
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胎肾细胞悬液对去卵巢大鼠骨组织形态计量学参数的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的:观察胎肾细胞悬液对去卵巢大鼠骨组织形态计量学参数的影响,探讨胎肾对大鼠去卵巢所致骨质疏松症的作用.方法:48只SD雌性大鼠,随机分为5组,即假手术组、模型组、雌激素组、胎肾活细胞组和胎肾死细胞组.假手术组仅手术切除腹腔少量脂肪,其余各组行去卵巢手术造模.术后12周,假手术组及模型组使用生理盐水干预,雌激素组使用尼尔雌醇混悬液干预,胎肾活细胞组使用胎肾活细胞悬液干预,胎肾死细胞组使用胎肾死细胞悬液干预.各组连续用药干预4周后,取血清行血清雌激素水平检测,取股骨远端1/3做骨病理切片,行骨组织形态计量学观测.结果:与假手术组比较,模型组雌激素水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).骨小梁排列稀疏、无序,骨小梁间隙显著增大,差异有统计学意义(P<0.01).骨小梁密度、骨小梁厚度、骨小梁面积百分比均显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).与模型组比较,雌激素组、胎肾细胞各组的雌激素水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).骨小梁排列较紧密、排列较整齐、交织成网,骨小梁间隙显著缩小,差异有统计学意义(P<0.01).骨小梁密度、骨小梁厚度、骨小梁面积百分比均显著增加,差异有统计学意义(P<0.01).与雌激素组比较,胎肾细胞各组雌激素水平差异无统计学意义(P>0.05),但胎肾死细胞组骨小梁间隙显著缩小且骨小梁密度显著增加,差异有统计学意义(P<0.01).与胎肾活细胞组比较,胎肾死细胞组骨小梁间隙显著缩小、骨小梁密度显著增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论:胎肾细胞各组对去卵巢大鼠骨量的增加、骨小梁结构及其连接性的改善、血清雌二醇水平的提高有明显作用,说明胎肾有治疗大鼠去卵巢所致骨质疏松症的作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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风湿祛痛汤对实验性关节炎大鼠的治疗作用及机制研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究风湿祛痛汤对实验性关节炎大鼠的治疗作用并初步探讨其作用机制.方法:采用完全弗氏佐剂和鸡胶原Ⅱ型制备实验性关节炎(CIA)大鼠模型,灌胃给予风湿祛痛汤(10、20、40 g/kg)共4 w,测定各组大鼠治疗前后足关节炎指数(AI)和右后足肿胀度,辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg),血清IL-1β、IL-6、IL-17α、IL-23、TNF-α及TGF-β含量,以及胫骨上段次松质骨区骨组织形态计量学参数.结果:(1)治疗2、4 w时风湿祛痛汤可剂量依赖性降低CIA大鼠的AI评分以及右后足肿胀度(p<0.01);(2)治疗4 w时风湿祛痛汤可剂量依赖性降低CIA大鼠Th17、Th17/Treg,升高Treg,降低血清IL-1β、IL-6、IL-17α、IL-23和TNF-c含量,升高TGF-β3含量,升高CIA大鼠胫骨上段次松质骨区的骨小梁面积、骨小梁宽度和骨小梁数量,降低骨小梁分离度(P<0.05或P<0.01).结论:风湿祛痛汤对实验性关节炎大鼠具有良好的治疗作用,可降低其四趾AI评分和右后足肿胀度,纠正Th17和Treg紊乱,并通过抑制骨小梁数量减少及骨小梁分离度的增大而减少骨破坏作用.
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编辑人员丨2023/8/6
