光周期可影响鹿角脱落和新茸再生,麋(Elaphurus davidianus)冬至解角,冬季持续的光照时长改变对鹿茸生长速度、角形态发育及夏季的繁殖溢出效应尚未见相关报道.依托北京麋鹿苑2018年出生的同父异母雄性麋鹿12头,于2021年11月—2023年3月进行光照时长处理实验,依次分组为:自然光照(对照组)、缩短光照2h、延长光照3h和6h;记录实验麋鹿解角日期,红外测量新茸再生速度,测定脱落的麋角形态参数,并持续追踪记录翌年发情期等级序位、打斗、交配、繁殖绩效等参数.结果显示:持续缩短2h光照(6L∶18D)使麋鹿解角日期、角主干总长度、单角重量分别较对照组(8L∶16D),提前(8.5±0.4)d、缩短2.93cm(P＜0.01,n=3)、减轻9.81g(P＜0.01,n=3);延长3h光照(10L∶14D)使麋鹿解角日期、角主干总长度、单角重量分别较对照组(8L∶16D),推迟(10.5±0.3)d、增长 5.47cm(P＜0.01,n=6)、增加 18.64g(P＜0.01,n=6);延长 6h 光照(12L∶12D)使麋鹿解角日期、角主干总长度、单角重量较对照组(8L∶16D),分别推迟(13.5±0.6)d、增长10.43cm(P＜0.01,n=6)、增加44.31g(P＜0.01,n=6).光照时长对麋角切片重量的影响差异极显著(P＜0.01,n=6),缩短2h光照(6L∶18D)使麋角切片重量较对照组(8L∶16D)减轻(0.1230±0.0561)g/片;延长光照3h(10L∶14D)、6h(12L∶12D)使麋角切片重量较对照组(8L∶16D)分别增加(0.1200±0.0318)g/片、(0.3133±0.0618)g/片;冬季延长光照可明显增加夏季雄性麋鹿的交配机会和爬跨时长,增加发情持续天数、累积持续时间,增加查验母鹿发情、维护领地和圈群次数,提高交配成功率.综上所述,麋角脱落与光照时长之间密切相关,冬季持续光照时长变化对麋角脱落日期及繁殖产生了溢出效应,其机理仍需进一步研究,结果可为今后开展不同光照对麋角脱落及新茸再生多样化的分子调控机制研究提供理论支撑,可指导鹿科动物鹿茸产量提高、育种、保护与可持续发展.

为了探讨休情期麋鹿Elaphurus davidianus冲突行为与等级序位的关系以及冲突行为的促发因素,于2015年4月、11月和2016年12月采用扫描取样法对江苏大丰麋鹿国家级自然保护区的圈养麋鹿昼间冲突行为进行了观察,共记录到1 452次冲突行为.结果显示:同年龄阶段雄鹿的等级序位高于雌鹿;同性别的成年体壮个体的等级序位高于未成年个体;麋鹿昼间冲突行为的表达方式与麋鹿自身体表特征有关,冲突行为的表达方式在硬角期、脱角生茸期和茸角硬化期3个阶段之间的差异有高度统计学意义(P＜0.01);休情期因争夺食物资源发生冲突行为的比例最高(61.55％),从动者的行为以采食行为比例最高(36.61％),3个阶段之间和上、下午的差异均无统计学意义(P＞0.05);休情期内冲突的激烈程度偏低,从动者反抗次数少(20.25％).本文为大丰麋鹿种群的饲养、管理与驯化,以及麋鹿迁地保护提供参考依据.

采用荧光衍生法测定不同品种、不同产地角类中药中游离巯基(-SH)的含量.以三(2-羧乙基)膦为二硫键的还原剂,7-氟苯唑-2-氧-1,3二唑-4-磺酸铵为-SH衍生化试剂,在最大激发波长为375 nm,发射波长为510 nm的条件下,采用荧光法测定角类药材水提液中游离-SH含量.结果表明,在最优的衍生化条件下,不同角类中药提取物中均测定出游离-SH,其中山羊角提取液中游离-SH的含量最高,其次是牦牛角与水牛角,麋鹿角中含量最低.该文提出一种关于角类中药物质基础的观点:即提取物中含-SH类成分可能为角质类动物药的重要物质基础,围绕此观点,建立了准确、灵敏、快速的测定游离-SH的方法,可为角类中药的质量评价以及功效物质基础研究提供一定的借鉴与方法依据.

目的:建立一种快速、高效、简便的鹿茸、鹿角位点特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法.方法:通过比较梅花鹿、马鹿及其混伪品的COI,Cytb基因序列差异,根据Cytb片段上的3个SNP (single nucleotide polymorphism)变异位点设计出一对鹿茸的特异性鉴别引物LR-238上游和LR-238下游,并对影响PCR结果的主要因素退火温度,PCR循环次数,模板DNA浓度,Taq酶用量和及影响重复性的Taq酶种类和PCR仪型号等进行方法学考察和优化.结果:进行方法学考察确定最优鉴别条件的基础上,当PCR退火温度为56℃,循环次数为35次的条件下,鹿茸、鹿角正品均能扩增出约250 bp片段,其他9种混伪品麋鹿、白唇鹿、水鹿、坡鹿、黇鹿、骡鹿、驯鹿、驼鹿、狍及阴性对照无条带.不同来源的药用的马鹿亚种东北马鹿、塔河马鹿、天山马鹿、阿拉善马鹿、阿勒泰马鹿、新西兰马鹿,梅花鹿亚种东北梅花鹿、华南梅花鹿样品使用建立的位点特异性PCR鉴别方法均产生约250 bp特异性鉴别条带.结论:该文设计的鉴别引物具有高度的专属性,所建立的位点特异性PCR鉴别方法可用于鹿茸、鹿角的准确鉴别.

麋鹿为中国特产珍贵药用动物,药用历史已逾千年.近代,麋鹿在我国灭绝,从而无药可用.今天,麋鹿重新引入我国,种群扩大,恢复药用地位成为可能.本研究系统分析了麋鹿古代药用状况与现代研究进展,以期推动麋鹿由保护物种向经济型驯养动物转型,逐步将麋鹿角等组织器官开发成为新资源药材及系列深加工产品,促进麋鹿资源的开发利用与麋鹿产业健康发展,造福人类健康.

目的 考察麋鹿角提取物调控神经营养因子和压力因子抗抑郁的作用机制.方法 制备麋鹿角提取物,采用小鼠慢性应激压力(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型,通过糖水偏嗜实验、悬尾实验和强迫游泳实验评价麋鹿角提取物的抗抑郁功效.采用ELISA法测定受试动物海马区中神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的含量.采用ELISA测定受试动物血清中相应压力因子:促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropinreleasing factor,CRF)、促肾上腺皮质激素(adreno-cortico-tropic-hormone,ACTH)、皮质醇的含量.采用大鼠星形胶质瘤细胞(C6)评价麋鹿角提取物调控神经营养因子系统的作用,并采用小鼠海马永生化细胞系(HT22)评价其对抗压力因子损伤的作用.结果 麋鹿角提取物能显著上调模型小鼠糖水偏嗜率,缩短小鼠悬尾和强迫游泳不动时间,以麋鹿角水提物的效用最强,该提取物能通过Erk信号通路,显著上调C6细胞中的NGF和BDNF的表达.此外,在皮质醇(Cortisol)损伤HT22的体外模型中,麋鹿角水提物具有显著的细胞保护作用,效果优于醇提物.结论 麋鹿角对神经营养因子的调控和压力因子的调控是其抗抑郁的重要机制.

于2014-2016年三个冬季(12月—翌年2月)收集了北京南海子麋鹿苑半散放麋鹿自然脱落的角,并观察和记录了2015-2017年发情期(5-9月)群主更替和2016-2018年产仔期(3-7月)麋鹿幼仔出生情况,结合2014-2018年年平均气温、季平均气温、月平均气温、年降雨量、雨季开始时间、种群密度等环境因子,对鹿角脱落、群主更替、产仔等繁殖特征的年节律及其环境影响因子进行了研究.结果 表明:(1)麋鹿鹿角脱落、群主更替、产仔的年节律均存在年际差异.(2)鹿角脱落时间从12月开始,1月下旬或2月上旬结束.(3)发情期为5月下旬或6月上旬开始,9月上旬结束;2015-2017年发情期时间有延长的趋势.(4)产仔期为3月中旬或4月中旬开始,5月下旬或7月下旬结束.(5)麋鹿鹿角脱落、群主更替、产仔的年节律存在明显的同步关系,其中鹿角脱落开始时间、鹿角脱落高峰期、鹿角脱落结束时间、第一次发情期开始时间、群主更替高峰期、产仔期开始时间、产仔高峰期、产仔期结束时间与前一年度比较均出现同步提前的现象.(6)鹿角脱落年节律存在随着12月平均气温升高而提前的现象;产仔期开始时间和产仔高峰期存在随着前一年9月平均气温的升高而提前的现象.(7)鹿角脱落年节律表现出随着年降雨量的增多而提前的现象;第一次发情期开始时间、群主更替高峰期的年节律表现出随着前一年度年降雨量的增多而提前的现象.(8)麋鹿鹿角脱落、群主更替、产仔的年节律均不存在随着种群密度升高或降低而提前或延迟的现象.麋鹿繁殖特征的年节律是一个复杂的过程,受气候、营养、种群密度、纬度等环境因子的影响.

麋鹿是我国特有的珍稀动物,人药历史已逾千年,但由于近代麋鹿的灭绝而导致无药可用.如今麇鹿种群随着重新引进,种群扩大使其药用地位的恢复成为可能.麇鹿角是麇鹿自然脱落产物,其资源蕴藏量随着种群扩大而日渐增大,其珍贵药用价值也亟待利用.首载于唐代孙思邈的《备急千金要方》的麋角丸,是中医药典籍中首张以麇鹿角作为君药的方剂,具有显著的补益功效.原书详细介绍了丸剂的组成、制法、功效主治与服用方法.但是由于该方已逾千年,处方关键信息与现代已有较大变化,严重影响了该经典名方的临床应用与产品开发,亟待系统梳理总结.该文依据国家相关部门颁布的古代经典名方关键信息考证原则,查阅历代本草及医书典籍,结合现代文献资料,并对比2020年版《中国药典》,系统考证总结了麋角丸的处方来源、历史沿革、药物基原与炮制、处方剂量、制法用法等方剂关键信息,以期为该方的临床应用与后续的产品开发提供依据,推动麋鹿角这一珍贵药用动物资源的开发利用.

为了揭示麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分的区域特征,采用UPLC-QTRAP(R)/MS2方法对4个地区39批次麋鹿角中37种核苷类和氨基酸类成分进行含量测定,并利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及聚类分析法(CA)进行综合质量评价.结果 显示,不同地区麋鹿角中均含有丰富的核苷类和氨基酸类成分,总质量分数分别可达45.09、634.80 μg·g-1,所含成分种类及总量差异较小,但各地区之间各成分含量存在显著差异,主要差异成分为Ura、Hpro、Thr、Glu、G5P、2'-dG、Adeno、Met、Ade、Gln、Orni、Phe、2'-dA、Hit、Lys和Ile.其中,Ura、Met、Glu和Ile分别在江苏大丰、江苏溱湖、北京和湖北石首这些区域的麋鹿角药材中含量最高.OPLS-DA及CA分析结果均显示基于核苷类、游离氨基酸类成分的数据信息可将所有麋鹿角样品分为3类,反映出麋鹿角样品的区域特征性.研究结果提示麇鹿角中核苷类、游离氨基酸类成分的积累与其生境密切相关,为麋鹿角药材的品质形成研究、内在质量评价及控制以及麋鹿角的综合利用提供了有益参考.鉴于研究发现,建议可将Ura、Met、Glu和Ile的含量因素作为不同地区药材特征纳入麇鹿角质量标准体系.

目的 评价麋角丸对Aβ1-42海马区注射小鼠学习与记忆能力的改善作用与作用机制研究.方法 采用海马区注射β淀粉样多肽1-42(Aβ1-42)构建拟阿尔茨海默症(AD)小鼠模型,给以麋角丸提取物.通过Morris水迷宫实验检测小鼠的学习与记忆能力,尼氏染色法检测海马DG区神经元损伤程度,酶联免疫吸附法检测小鼠海马组织中炎症因子表达,试剂盒检测氧化应激因子表达,蛋白质印迹法检测小鼠海马区中氧化应激与凋亡相关蛋白表达.结果 麋角丸显著缩短模型小鼠上台潜伏期和上台前路程,增加穿越站台次数.同时,麋角丸给药显著增加海马DG区尼氏体数量,并下调模型小鼠海马组织中炎症因子的表达,提升SOD活力,降低LDH活力和MDA表达,提高Nrf2、HO-1蛋白表达与Bcl-2/Bax比值,下调Caspase-3、Caspase-9凋亡通路蛋白表达.结论 麋角丸具有改善Aβ1-42海马区注射小鼠学习与记忆能力的效用,其作用途径与抑制中枢氧化应激与炎性损伤导致的神经元损伤有关.Nrf2/HO-1通路是其抗海马组织氧化损伤调控信号通路.