目的:探究与自身抗体抗线粒体抗体Ⅱ型（AMA-M2）发生反应的侧链二氧酸脱氢酶复合体E2蛋白（BCOADC-E2）关键性氨基酸在原发性胆汁性胆管炎（PBC）诊断中的价值。方法:克隆能够表达BCOADC-E2蛋白抗原表位同源目的基因序列BCKD，与工程质粒pGEX-4T1进行DNA重组，通过PCR获得15个点突变质粒，转入原核表达菌株中进行蛋白表达与纯化；ELISA法、蛋白质印迹法鉴定其与PBC患者血清AMA-M2特异性反应程度并进行分析比较，定位出对BCOADC-E2蛋白和AMA-M2特异性反应有关键影响的氨基酸，探讨其在PBC诊断中的价值。统计学处理采用单因素方差分析、两两比较采用LSD- t检验。 结果:共获得14个突变型蛋白、1个野生型蛋白。突变型蛋白pGEX-BCKD-S1A和pGEX-BCKD-C3A与PBC患者血清AMA-M2特异性反应程度均高于野生型蛋白pGEX-BCKD与AMA-M2特异性反应程度；突变型蛋白pGEX-BCKD-S1A（1.634±0.328）和pGEX-BCKD-C3A（1.744±0.345）与PBC患者血清AMA-M2特异性反应程度均高于野生型蛋白pGEX-BCKD（1.000±0.000）与AMA-M2特异性反应程度；突变型蛋白pGEX-BCKD-E4A（0.157±0.067）、pGEX-BCKD-V5A（0.057±0.029）、pGEX-BCKD-Q6A（0.580±0.166）、pGEX-BCKD-S7A（0.744±0.125）、pGEX-BCKD-D8A（0.351±0.135）、pGEX-BCKD-S10A（0.496±0.158）、pGEX-BCKD-V11A（0.149±0.089）、pGEX-BCKD-T12A（0.061±0.043）、pGEX-BCKD-I13A（0.007±0.017）、pGEX-BCKD-T14A（0.198±0.101）、pGEX-BCKD-S15A（0.156±0.087）、pGEX-BCKD-R16A（0.884±0.099）与AMA-M2特异性反应程度均低于野生型蛋白pGEX-BCKD（1.000±0.000）与AMA-M2特异性反应蛋白。结论:BCOADC-E2蛋白的1号和3号位半胱氨酸是提高蛋白BCOADC-E2与PBC患者血清AMA-M2特异性反应关键性氨基酸；4、5、6、7、8、10、11、12、13、14、15、16号位氨基酸被丙氨酸代替后形成突变型蛋白会降低其与AMA-M2特异性反应程度；5号位和13号位氨基酸是影响蛋白BCOADC-E2与AMA-M2特异性反应关键性氨基酸，对BCOADC-E2蛋白功能有着重要影响，对BCOADC-E2关键性氨基酸进行深入研究对PBC诊治有重要意义。

目的:制备新型 68Ga标记三七素类前列腺特异膜抗原(PSMA)靶向探针，并进行理化性质和体内外评估。 方法:采用固相合成法制备配体P151，测定其亲和性。将配体加入到 68GaCl 3与醋酸钠混合的溶液中，95 ℃反应10 min，使用放射性高效液相色谱(HPLC)测定其标记率及体外稳定性。评估 68Ga-P151的脂水分配系数(log P)，并进行细胞摄取实验。对正常昆明(KM)小鼠进行体内生物分布测定；对前列腺癌22Rv1荷瘤裸鼠注射 68Ga-P151后进行microPET显像，并与 68Ga-PSMA 617进行对比。2组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:成功合成目标配体P151，其抑制常数 Ki为0.58 nmol/L，标记率和放化纯均≥95%；37 ℃放置2 h后， 68Ga-P151在生理盐水和人血清白蛋白(HSA)溶液中的放化纯仍≥95%，表明其体外稳定性好； 68Ga-P151的脂水分配系数(log P)为-2.65±0.17，表明其亲水性较好。注射 68Ga-P151后60 min，前列腺癌LNCaP细胞的总摄取值为(0.83±0.04)百分注射活度(%IA)/10 5个细胞，并可被PSMA抑制剂(ZJ-43)所抑制。正常小鼠体内生物分布显示 68Ga-P151主要经肾脏排泄出体外，在其他组织中摄取较低；荷瘤裸鼠microPET显像显示， 68Ga-P151与 68Ga-PSMA 617的最大标准摄取值(SUV max：0.79±0.23和0.54±0.05； t＝2.12)、肿瘤/肾脏比值(2.04±0.65和1.88±0.33； t＝0.44)、肿瘤/肌肉比值(12.83±5.18和6.95±1.63； t＝2.17)差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:68Ga-P151制备简单、标记率高、生物分布理想，可对PSMA阳性肿瘤显像，其显像效果与 68Ga-PSMA 617相当，有望应用于前列腺癌的诊断。

目的:探讨不同病程老年帕金森病(PD)患者肠道菌群和血清氨基酸水平的变化，为临床诊断、预防和治疗PD提供依据。方法:选取2018年1月至2019年8月在我院诊治的老年PD患者140例，根据病程划分为<5年PD组(70例)和≥5年PD组(70例)，并选取我院体检非PD老年人(90例)作为对照组。采用16S rDNA基因实时荧光定量PCR法检测三组人群肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌、普拉梭菌、肠球菌、肠杆菌、 Prevotella copri菌和 Akkermansia muciniphila菌水平，应用高效液相色谱法检测三组人群血清氨基酸。 结果:与对照组相比，<5年PD组和≥5年PD组患者肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌、普拉梭菌和 Prevotella copri菌水平降低，肠杆菌水平升高( F值分别为20.863、32.251、23.166、24.683、10.136，均 P<0.001)。与对照组相比，<5年PD组和≥5年PD组患者血清甲硫氨酸、色氨酸、赖氨酸、谷氨酸水平降低( F值分别为5.858、5.877、4.183、25.462，均 P<0.05)。Spearman相关性分析显示，血清谷氨酸与肠道中普拉梭菌呈正相关( r＝0.647， P＝0.002)，与 Prevotella copri菌呈负相关( r＝-0.559， P＝0.010)。多因素Logistic回归方程分析显示，老年PD患者肠道中的保护因素为双歧杆菌( OR＝0.186，95% CI＝0.054~0.637， P＝0.007)、乳酸杆菌( OR＝0.283，95% CI＝0.098~0.816， P＝0.020)、普拉梭菌( OR＝0.232，95% CI＝0.063~0.851， P＝0.028)、 Prevotella copri菌( OR＝0.222，95% CI＝0.058~0.851， P＝0.028)，危险因素为肠杆菌( OR＝5.119，95% CI＝1.406~18.636， P＝0.013)。 结论:老年PD患者肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌、普拉梭菌、 Prevotella copri菌水平降低和肠杆菌水平升高，以及血清谷氨酸水平的降低，可能与老年PD病程发展有关。

目的:探讨口服支链氨基酸（BCAA）对肝细胞癌（HCC）治疗后患者死亡率的影响。方法:计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网（CNKI）、万方及中国生物医学文献数据库，搜索关于口服BCAA对HCC患者死亡率影响的临床对照研究和随机对照试验，检索时限均自建库至2019年12月30日。由两名研究者独立筛选文献、提取资料，一名研究者评价纳入研究的偏倚风险后，应用RevMan 5.3软件进行荟萃分析。结果:共纳入14个研究，1 179例患者。总体结果显示，HCC治疗后口服BCAA对1年死亡率无明显影响（ RR=0.85，95% CI：0.68~1.06， P=0.16），3年死亡率明显低于对照组（ RR=0.73，95% CI：0.61~0.88， P=0.000 7），5年死亡率也明显降低（ RR=0.57，95% CI：0.34~0.96， P=0.03）。亚组分析结果显示，对于射频消融（RFA）术患者，BCAA组与对照组相比，1年死亡率差异无统计学意义（ RR=0.96，95% CI：0.14~6.5， P=0.97），而3年死亡率明显降低（ RR=0.59，95% CI：0.43~0.81， P=0.001）；对于肝切除术患者，两组在1、3年死亡率方面差异均无统计学意义（ RR=0.90，95% CI：0.44~1.88， P=0.79； RR=0.97，95% CI：0.71~1.33， P=0.85）。另外，对于白蛋白水平，在不考虑HCC治疗方式的情况下，补充BCAA可提高白蛋白水平（ SD=0.45，95 %CI：0.29~0.90； P=0.000 1），但对肝切除术患者无明显影响（ SD=0，95 %CI：-0.41~0.41， P=0.99）。 结论:补充BCAA可能改善HCC患者肝脏储备功能及远期预后，该作用与手术方式有关，BCAA可降低RFA术后患者远期死亡率，但对肝切除术患者无明显影响。

目的:建立黄芪药材三维荧光光谱质量评价方法。方法:利用荧光光谱分析技术测定黄芪提取物三维荧光光谱，通过对激发-发射矩阵荧光数据的平行因子分析，解析黄芪三维荧光光谱的荧光组分特征；测定23个产地黄芪样本的三维荧光光谱，并进行质量判别分析。结果:在优化条件下，黄芪80%乙醇提取液的三维荧光光谱图主要呈现出305 nm/420 nm（峰1）、280 nm/315 nm（峰2）和265 nm/475 nm（峰3）3组特征激发/发射峰。平行因子分析结果表明，荧光特征峰峰1和峰3各含有1种异黄酮类荧光组分，峰2含有2种氨基酸类荧光组分。不同产地黄芪样本三维荧光光谱的特征峰个数及荧光强度均存在差异。结论:三维荧光光谱可实现对不同产地黄芪药材质量一致性评价，该方法简便、快捷、准确，可为黄芪质量评价提供参考。

目的:探讨高氧环境对氧诱导视网膜病变(OIR)模型小鼠肾脏代谢物的影响，了解病理性视网膜血管新生和肾损伤之间的潜在机制。方法:采用随机数字表法将16只健康SPF级C57/B6J新生小鼠随机分为OIR组与正常对照组，每组8只。小鼠自出生后标准饲养至第7天(P7)，OIR组小鼠和母鼠置于(75±2)%的高氧箱中饲养至P12，然后正常饲养；正常对照组一直在正常环境下饲养。各组小鼠在饲养P17时采用二氧化碳安乐死，取视网膜组织铺片并行血管异凝集素(IB4)染色，观察视网膜血管形态、中央无灌注区及病理性新生血管情况；另取小鼠肾组织进行液相色谱－质谱分析，取其对应小鼠的全血进行抗凝处理，通过离心沉淀，获得不含细胞成分的血浆，对血浆进行靶向代谢组学分析。使用代谢组学数据处理软件Progenesis QI v2.3对质谱信息进行解析，用无监督的主成分分析及正交偏最小二乘法分析(OPLS-DA)来区分各组间代谢轮廓的总体差异，比较2个组间代谢物的倍数变化。以变量权重值>1且 P<0.05为条件筛选出差异代谢物。基于KEGG数据库对差异代谢物进行代谢通路富集分析。 结果:视网膜铺片IB4染色结果显示，P17时正常对照组小鼠视网膜血管分布均匀；OIR组小鼠视网膜周边血管迂曲、紊乱，中央可见大面积无灌注区域形成，在视网膜无灌注区和血管区交界处形成大量新生血管簇，呈强荧光染色。OIR组小鼠视网膜无灌注区相对面积为(25.16±3.50)%，明显大于正常对照组的(0.63±0.30)%，差异有统计学意义( t＝12.07， P<0.001)。OPLS-DA模型参数R2X cum、解释率R2Y cum、和预测率Q2 cum分别为0.578、0.978和0.857，表明OPLS-DA模型具有较好的预测能力。共筛选鉴定到26个主要的差异代谢物，其中上调表达17个，下调表达9个，包括甘油磷脂类化合物[PC 20∶4(5Z，8Z，11Z，14Z)/0∶0、PC 22∶6(4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z)/0∶0、PC 14∶1(9Z)/20∶2(11Z，14Z)、PE P-18∶0/20∶4(6E，8Z，11Z，14Z)(5OH[S])]、氨基酸类代谢物(精氨酸、鸟氨酸、哌可酸和羟基赖氨酸)、嘌呤类(鸟嘌呤、次黄嘌呤、羟嘌醇)和脂肪酸类(15-棕榈酸甲酯、2，6，8，12-Tetramethyl-2，4-tridecadien-1-ol)等。差异代谢物主要富集于ABC转运蛋白(L-精氨酸、牛磺酸、肌醇、腺苷、N-乙酰基-D-氨基葡萄糖、L-谷氨酰胺)、氨酰-tRNA生物合成(L-异亮氨酸、L-脯氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-谷氨酰胺)、精氨酸生物合成(L-精氨酸、L-鸟氨酸、L-谷氨酰胺)等代谢通路。血浆的靶向代谢组学结果显示，差异的氨基酸类代谢产物主要富集于氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢以及ABC转运蛋白等代谢通路。 结论:OIR小鼠的ABC转运蛋白、氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢通路可能参与了肾损伤及早产儿视网膜病变新生血管形成的病理变化过程。

作为功能影像，PET可从多角度挖掘肿瘤的生物特征，能够更加准确地检测前列腺癌。反式-1-氨基-3- 18F-氟环丁烷-1-甲酸( 18F-fluciclovine)是一种非天然氨基酸类PET显像剂，近期已被美国食品与药物管理局(FDA)批准用于检测可疑复发性前列腺癌。该显像剂可反映前列腺癌中因氨基酸代谢上升导致的跨膜氨基酸转运系统的高表达。该文对 18F-fluciclovine PET显像对原发及复发性前列腺癌的诊断效能进行概述，包括综述已发表的和常规影像学检查以及其他分子显像剂的对比研究。另外，也详细描述了该方法的显像程序、图像解读，包括生理性和病理性摄取类型及诊断"陷阱"或误区。

近年来非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发病率呈明显上升趋势，因其与糖尿病、肥胖、代谢综合征等密切相关，故近期学者建议将其命名为代谢相关脂肪性肝病，但其发病机制尚未完全阐明。既往研究显示，NAFLD是遗传、环境和饮食等多种因素综合作用的结果，与其发生发展相关的病理机制主要有胰岛素抵抗、脂代谢异常、氧化应激及炎症和肠道菌群失调等。此外，氨基酸组学技术的发展为多种代谢性疾病的机制研究提供了思路。因此，本文拟从氨基酸水平探讨NAFLD相关机制的研究进展，以期为NAFLD的临床干预提供精准指导。

目的:探讨孕母妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）对新生儿代谢物的影响。方法:采用回顾性队列研究设计，纳入2018年1月至12月在广东省佛山市妇幼保健院孕母诊断GDM并活产分娩的580例单胎新生儿（GDM组），按照孕妇年龄1∶1匹配的非GDM单胎孕妇的新生儿580例作为非GDM组。新生儿生后3～7 d内进行遗传代谢病筛查。比较组间代谢物的差异，分析GDM与新生儿代谢物水平间的关系。采用两独立样本 t检验及多重线性回归模型进行统计学分析。 结果:GDM组和非GDM组间新生儿代谢物中共有7种氨基酸及10种脂肪酸的差异有统计学意义，其中GDM组子代血清中6种氨基酸和8种脂肪酸水平升高，而胡椒酰胺［（140.79±32.60）与（150.26±35.46）μmol/L， t=－4.733， P<0.001］、棕榈酰肉碱［（2.59±0.81）与（2.73±0.82）μmol/L， t=－2.940， P=0.003］及二十四碳酰肉碱［（0.066±0.022）与（0.069±0.022）μmol/L， t=－1.937， P=0.042］水平下降。多重线性回归发现，校正母亲孕次、产次及新生儿出生体重和性别后，GDM与子代新生儿期3种氨基酸呈正相关，分别是半胱氨酸（ β=0.012）、同型半胱氨酸（ β=0.263）和亮氨酸（ β=4.225）；与2种氨基酸呈负相关，分别为甘氨酸（ β=－6.271）和胡椒酰胺（ β=－9.885）。GDM与子代新生儿期8种脂肪酸呈正相关，分别是丙酰肉碱（ β=0.214）、丁酰肉碱（ β=0.014）、3-羟基丁酰肉碱（ β=0.006）、异戊酰肉碱（ β=0.009）、3-羟基异戊酰肉碱（ β=0.024）、二十六碳酰肉碱（ β=0.001）、癸二烯酰肉碱（ β=0.045）、十八碳二烯酰肉碱（ β=0.128）；与2种脂肪酸呈负相关，分别为棕榈酰肉碱（ β=－0.119）和二十四碳酰肉碱（ β=－0.002），差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。 结论:GDM与多种新生儿氨基酸和脂肪酸代谢物水平存在相关关系，提示GDM可能影响子代生命早期的氨基酸和脂肪酸的代谢水平。

目的:制备靶向前列腺特异膜抗原(PSMA)分子探针Al 18F-PSMA-136，探究其联接链的改变对探针生物学行为及肿瘤靶向能力的影响。 方法:将Al 18F-PSMA-137中1，4，7-三氮杂环壬烷-1，4，7-三乙酸(NOTA)络合物的联接链苯基替换为环己基，获得分子探针Al 18F-PSMA-136，用 N-乙酰化的α-连接的酸性二肽酶(NAALADase)方法测定NOTA-PSMA-136和NOTA-PSMA-137的PSMA抑制能力；采用放射性高效液相色谱对标记产物进行放化纯鉴定及体外稳定性分析；在前列腺癌22Rv1(PSMA阳性)细胞及模型小鼠中探究2种探针的PSMA特异性和肿瘤靶向能力。采用两独立样本 t检验分析数据。 结果:NOTA-PSMA-136和NOTA-PSMA-137的酶抑制常数 Ki值分别为3.41和0.30 nmol/L。Al 18F-PSMA-136的标记率为(30.1±8.4)%，比活度为(18.7±5.3) GBq/μmol；2种探针放化纯均大于95%，体外稳定性好。2种探针在22Rv1细胞中均显示出PSMA特异性，但Al 18F-PSMA-137摄取明显高于Al 18F-PSMA-136[1 h：(1.67±0.24)和(1.00±0.01)每1×10 5个细胞注射活性百分比(%IA/1×10 5个细胞)； t＝4.78, P＝0.003；2 h：(2.11±0.06)和(1.03±0.06) %IA/1×10 5个细胞； t＝19.90， P<0.001]。MicroPET/CT显像示2种探针在22Rv1模型小鼠中具有相似的体内分布，主要浓聚在肾脏、肠道、胆囊、膀胱和肿瘤，但Al 18F-PSMA-137在肿瘤中的摄取显著高于Al 18F-PSMA-136(1 h：1.78±0.10和0.54±0.08； t＝13.29， P<0.001；2 h：1.95±0.01和0.52±0.11； t＝18.53， P<0.001)。 结论:NOTA络合物联接链的改变会显著影响探针的PSMA抑制能力和肿瘤靶向性，亲脂性较强的Al 18F-PSMA-137显像效果更优越。