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酶法制备野黄芩素的工艺研究
编辑人员丨2024/3/23
目的 应用黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶(Scutellaria baicalensis stems and leaves glucuronic hydrolase,sbsl GUS)酶解灯盏花中野黄芩苷制备野黄芩素,经分离纯化获得高纯度的野黄芩素提取物.方法 采用正交试验优选灯盏花提取工艺参数;以野黄芩苷酶解转化率为指标,对酶用量、酶解pH值、温度、时间、抗氧化剂等进行考察,优选野黄芩素制备工艺参数;采用乙醇提取、活性炭脱色和分步结晶精制纯化粗提物.结果 灯盏花提取工艺为灯盏花切段,加 10 倍水煎煮提取 2 次,每次 1h.野黄芩素制备工艺为sbsl GUS提取液和灯盏花水煎液加入量(以生药计)比为 1∶10,加 0.5%偏重亚硫酸钠,酶解pH值约 6.0,温度约 45℃,时间20 h,得到含量大于 60%的野黄芩素粗提物.经分步结晶对粗提物进行纯化,用 80%乙醇回流提取,活性炭脱色,浓缩、析晶,得到含量大于 85%的野黄芩素提取物.结论 该工艺应用sbsl GUS酶解技术制备野黄芩素,生产简便可行,为野黄芩素的生产制备提供了新的途径.
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编辑人员丨2024/3/23
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黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶提取工艺、酶学性质、实际应用研究
编辑人员丨2024/3/16
目的 研究黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶(sbsl GUS)提取工艺、酶学性质、实际应用.方法 在单因素试验基础上,以粒度、加水量、提取时间、提取次数为影响因素,酶活性为评价指标,正交试验优化提取工艺.分析底物(黄芩苷)浓度与酶解速度的关系,计算Vmax、Km,考察pH值、温度、金属离子对酶活性的影响,评价pH稳定性、热稳定性.sbsl GUS酶解黄芩苷以制备黄芩素,考察pH值、温度、反应时间、底物初始浓度、加酶量对转化率的影响.结果 最优提取工艺为粒度 40 目,加水量 10 倍,提取时间 15 min,提取次数 3 次.酶解符合酶促反应动力学,Km 为 0.006 3 mol/L,Vmax为 70.42 μmol/h,在 pH 值 6.0、温度 45℃、金属离子 100 mmol/L Cu2+下酶活性最强,sbsl GUS在pH值 4.0～7.0、温度 4～30℃范围内稳定性良好.最优制备工艺为pH值 6.0,温度 45℃,反应时间 12h以上,底物初始浓度 67.2 mmol/L,加酶量1 mL/0.269 mmol黄芩苷,转化率为97.83%.结论 sbsl GUS酶解效率高,条件温和,可为获取黄芩素提供简便的制备方法,并且拓展了黄芩茎叶应用途径.
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编辑人员丨2024/3/16
