目的:探讨野黄芩苷（Scu）对脓毒症相关性急性肾损伤（SA-AKI）的保护作用及其机制。方法:①体内实验：将36只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水（NS）对照组、脂多糖（LPS）致SA-AKI模型组（LPS组）、20 mg/kg Scu对照组（Scu 20对照组）及5、10、20 mg/kg Scu预处理组，每组6只。腹腔注射10 mg/kg LPS制备SA-AKI小鼠模型；NS对照组给予等量NS；Scu预处理组于注射LPS前腹腔注射不同剂量Scu，每日1次、持续1周；Scu 20对照组仅给予20 mg/kg Scu，持续1周。各组于LPS处理24 h后处死小鼠取肾脏，观察肾组织损伤情况；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测核转录因子-κB（NF-κB）信号通路相关分子、凋亡相关蛋白及富含半胱氨酸蛋白61-结缔组织生长因子-肾母细胞瘤过表达基因1（CCN1）的蛋白表达。②体外实验：体外培养人肾小管上皮细胞株HK-2，待细胞融合至80%时用于实验。在未经LPS处理和经过100 g/L的LPS处理后的细胞中，分别转染pcDNA3.1-CCN1过表达CCN1或小干扰RNA（siRNA）抑制CCN1表达，观察CCN1是否参与了NF-κB信号通路激活和细胞凋亡；同时在转染和未转染CCN1 siRNA的HK-2细胞中加入100 g/L的LPS及20 μmol/L的Scu，观察Scu对LPS诱导HK-2细胞损伤保护作用的机制。结果:①体内实验结果：LPS诱导SA-AKI小鼠肾功能显著下降，肾小管严重受损；Scu可呈剂量依赖性缓解肾功能及组织学损伤。Western blotting条带分析进一步证实，Scu预处理可呈剂量依赖性降低AKI小鼠肾组织中NF-κB信号通路相关分子及CCN1的蛋白表达，并对细胞凋亡具有显著的缓解作用，说明CCN1参与了NF-κB信号通路激活和细胞凋亡。②体外实验结果：在未经LPS处理的HK-2细胞中，过表达CCN1对凋亡相关蛋白及NF-κB信号通路促炎因子表达无显著影响。而在经过LPS处理的HK-2细胞中，过表达CCN1可显著抑制促炎因子白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的mRNA表达，与单纯LPS刺激细胞比较差异有统计学意义〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：3.20±0.57比4.88±0.69，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：2.99±0.44比5.00±0.81，MCP-1 mRNA（2 -ΔΔCT）：2.81±0.50比5.41±0.75，均 P<0.05〕，并使凋亡相关蛋白显著下调；当用siRNA抑制CCN1表达时，促炎因子的mRNA表达则较单纯LPS刺激细胞上调〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：6.01±1.13比4.88±0.69，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：5.15±0.86比5.00±0.81，均 P<0.05〕，同时凋亡相关蛋白显著上调。在LPS诱导的细胞模型中，经过Scu处理后HK-2细胞中促炎因子的mRNA表达显著下调，与单纯LPS刺激细胞比较差异有统计学意义〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：2.55±0.50比6.15±1.04，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：2.58±0.40比3.95±0.52，MCP-1 mRNA（2 -ΔΔCT）：2.64±0.44比6.21±0.96，均 P<0.05〕，而且凋亡相关蛋白显著下调；当用siRNA抑制CCN1表达时，则削弱了Scu对细胞的保护作用，表现为细胞中促炎因子的mRNA表达较未抑制CCN1表达的细胞显著上调〔IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：5.34±0.76比2.55±0.50，TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：3.66±0.54比2.58±0.40，MCP-1 mRNA（2 -ΔΔCT）：5.15±0.79比2.64±0.44，均 P<0.05〕，且凋亡相关蛋白表达亦显著上调。 结论:Scu能保护SA-AKI小鼠的肾功能，该保护作用与NF-κB信号通路和CCN1有关；Scu可能通过CCN1调节NF-κB信号通路以减轻LPS诱导的肾损伤。

目的 采用高效液相色谱法对灯芪通脉颗粒中的有效成分进行含量测定,并分析其主要化学成分.方法 使用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为水(含0.1％磷酸)-乙腈,梯度洗脱,检测波长为283 nm.对3批灯芪通脉颗粒中的有效成分进行含量测定,并对样品进行主要化学成分分析.结果 采用该方法可以测定灯芪通脉颗粒中野黄芩苷、柚皮苷、新橙皮苷等7种有效成分.主要化学成分分析结果表明,野黄芩苷、新橙皮苷和柚皮苷含量最高,分别为1.52 mg/g、2.54 mg/g、2.46 mg/g.结论 此方法具有很好的实用性和可行性,为灯芪通脉颗粒的质量控制和临床应用提供了科学依据.

目的 建立一测多评法同时测定止得咳颗粒中黄芩苷、射干苷、野鸢尾苷、汉黄芩苷、黄芩素、次野鸢尾黄素及汉黄芩素的含量.方法 采用henomenex Kinetex XB-C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm),柱温25℃;流动相为甲醇(A)-0.2％磷酸(B),梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,检测波长为270 nm,以黄芩苷为内参物,建立射干苷、野鸢尾苷、汉黄芩苷、黄芩素、次野鸢尾黄素和汉黄芩素的相对校正因子,并考察相对校正因子的耐用性.比较外标法和一测多评法对止得咳颗粒中7种成分含量的测定结果.结果 7种成分分别在0.239 0～1.195 0 mg,0.006 0～0.030 2 mg,0.016 0～0.080 0 mg,0.032 6～0.163 0 mg,0.005 5～0.027 6 mg,0.002 9～0.014 3 mg 和 0.003 6～0.017 8 mg 范围内有良好线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率(RSD)分别为 97.11％(0.94％)、97.87％(1.33％)、97.44％(1.34％)、97.85％(0.89％)、97.24％(1.16％)、101.90％(2.24％)和 99.46％(0.71％),一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著性差异.结论 方法稳定可靠,可用于止得咳颗粒的质量控制.

目的 优化参莲草颗粒成型工艺,并建立其理化指纹图谱.方法 湿法制粒后单因素试验筛选辅料,PB试验筛选潜在关键工艺参数.以辅(糊精)药比、乙醇体积分数、润湿剂(乙醇)用量为影响因素,成型率、吸湿率、休止角、溶化率的综合评分为评价指标,Box-Behnken 试验结合AHP-CRITIC混合加权法优化成型工艺.采用物理指纹图谱、HPLC指纹图谱评价不同批次样品的质量一致性,并进行化学模式识别.结果 最佳条件辅药比 0.98∶1,乙醇体积分数 84%,润湿剂用量 28%,在 70℃下干燥 60 min,综合评分为95.18 分.10 批样品物理指纹图谱相似度均大于 0.95;HPLC指纹图谱中有 18 个共有峰,相似度均大于 0.95.各批样品聚为 3 类,野黄芩苷、去乙酰基车叶草苷酸甲酯、木犀草素、芦丁、去乙酰基车叶草苷酸为关键质量差异物.结论 该方法稳定可行,可用于评价参莲草颗粒的质量一致性,为该制剂质量标准研究奠定基础,也为同类中药制剂相关研究提供思路.

目的 基于血清药理学和网络药理学探究清感童饮的体外抗炎作用.方法 采用血清药理学评价方法,验证清感童饮含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)释放一氧化氮(NO)、细胞坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素 6(IL-6)的影响.利用液质联用(UHPLC-MS/MS)技术对清感童饮指标性成分进行含量测定,并根据这些成分进行网络药理学分析,对清感童饮有效成分发挥抗炎作用的潜在靶点及作用通路进行预测.结果 细胞实验证明清感童饮可明显降低NO、TNF-α、IL-6 水平(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).清感童饮中含量较高的成分为连翘酯苷A、牛蒡苷、绿原酸、野黄芩苷、没食子酸、迷迭香酸、芍药内酯苷、连翘苷.清感童饮中 17 个活性成分与炎症的交集靶点共 215 个,主要涉及ALB、VEGFA、IL-6、TNF-α等 31 个核心靶点,调节AGE-RAGE、PI3K-Akt、MAPK信号通路等多种通路发挥抗炎作用.结论 清感童饮具有多成分-多靶点发挥抗炎作用的特点.

黄芩提取物是舒肝宁注射液中重要的组分之一.该研究建立了一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定舒肝宁注射液及方中黄芩提取物的5种成分在大鼠胆汁、尿液和粪便中含量的方法,揭示舒肝宁注射液与单味黄芩提取物在大鼠体内的排泄过程差异,探讨黄苓配伍前后5种成分的体内排泄过程规律.大鼠分别尾静脉注射4.2 mL·kg-1的舒肝宁注射液和黄芩提取物,观察48 h内大鼠胆汁、尿液和粪便中黄芩苷、黄芩素、千层纸素A、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和野黄芩苷的动态排泄情况.结果显示,大鼠静脉注射舒肝宁注射液和黄芩提取物后,除黄芩苷外,其余4种指标成分均以较高的比例以原型成分排泄.各成分在尿液中排泄量较大,在粪便和胆汁中的排泄量较少.黄芩提取物经配伍后,5种指标成分在大鼠体内的累积排泄量均降低.其中,黄苓素在胆汁、尿液和粪便的累积排泄量显著降低了26.67％、48.11％、31.01％;黄芩苷在胆汁、尿液和粪便的累积排泄量显著降低了70.69％、19.43％、31.22％.研究表明,黄芩提取物中的5种指标成分主要经肾脏排泄,且注射液中其他组分可能会延缓其排泄过程,延长在体内的滞留时间.该研究对阐明舒肝宁注射液配伍合理性具有重要的意义.

目的:基于"优形优质"探究不同栽培方式对党参品质的影响,为优质党参生态种植模式研究提供参考.方法:测量党参外观性状指标,测定水分、醇溶性浸出物含量,HPLC测定党参样品紫丁香苷、党参苷Ⅰ、党参炔苷及苍术内酯Ⅲ的含量,HPGPC测定党参果聚糖含量.结果:普通、搭架、套种和仿野生 4 种不同栽培方式中,套种与仿野生栽培有利于党参芦下直径粗、皮部宽度、芦头直径和干重的形成.搭架、仿野生栽培的党参木部色泽偏黄色、皮部色泽偏黄棕色.搭架和套种栽培的药材紫丁香苷和党参苷Ⅰ含量显著高于普通和仿野生栽培.套种栽培的药材党参炔苷含量最高(0.5459 mg/g),显著高于其他栽培方式,搭架栽培的药材党参炔苷含量最低(0.2940 mg/g).苍术内酯Ⅲ含量在仿野生栽培药材中最高(0.1526 mg/g),显著高于其他栽培方式.4 种栽培方式下党参的水分(≤16%)、浸出物(≥55%)均符合药典标准,仿野生栽培党参含水量为 7.80%,显著低于其他栽培方式.普通栽培的党参果聚糖含量最高(38.66%),搭架栽培党参含量最低(16.66%).党参色泽越深,含水量越高,党参果聚糖含量与色泽的明亮度L?呈正相关(P<0.01).结论:综合考虑党参性状和指标成分、管理成本和土地资源等多种因素,党参-黄芩套种和仿野生栽培为较高效的党参种植模式,具有推广种植前景,为党参药材合理栽培和资源开发利用提供参考依据.

目的:分析不同类型的黄芩药材性状特征与其水溶性成分的相关性,寻找评价黄芩药材品质优劣的科学依据.方法:收集各地黄芩药材共 131 批次,采用性状观察、显微检测荧光强度以及紫外-可见分光光度法、HPLC法测定黄芩的浸出物、淀粉及核苷类水溶性成分的含量,分析各项检测指标之间的相关性.结果:黄芩药材可分为四种类型,各类型黄芩的性状差异明显.黄芩的荧光灰度值与淀粉、水溶性浸出物含量呈显著正相关;淀粉含量与水溶性浸出物呈强正相关;鸟苷含量与腺苷含量存在相关性.四种黄芩类型中,以子芩为主的山西型栽培黄芩核苷类成分含量最高;以枯芩为主的野生型黄芩的淀粉及水溶性浸出物含量最低,且枯芩从根头部到尾部淀粉含量逐渐降低.结论:红色荧光显微技术可以定性表征黄芩的淀粉含量;黄芩生长时间越久,环境越恶劣,枯芩越多,淀粉及水溶性浸出物含量越少;子芩型黄芩与枯芩型黄芩水溶性成分差异显著.该研究结果可为黄芩药材品质评价以及临床使用提供参考.

目的 应用黄芩茎叶葡萄糖醛酸水解酶(Scutellaria baicalensis stems and leaves glucuronic hydrolase,sbsl GUS)酶解灯盏花中野黄芩苷制备野黄芩素,经分离纯化获得高纯度的野黄芩素提取物.方法 采用正交试验优选灯盏花提取工艺参数;以野黄芩苷酶解转化率为指标,对酶用量、酶解pH值、温度、时间、抗氧化剂等进行考察,优选野黄芩素制备工艺参数;采用乙醇提取、活性炭脱色和分步结晶精制纯化粗提物.结果 灯盏花提取工艺为灯盏花切段,加 10 倍水煎煮提取 2 次,每次 1h.野黄芩素制备工艺为sbsl GUS提取液和灯盏花水煎液加入量(以生药计)比为 1∶10,加 0.5%偏重亚硫酸钠,酶解pH值约 6.0,温度约 45℃,时间20 h,得到含量大于 60%的野黄芩素粗提物.经分步结晶对粗提物进行纯化,用 80%乙醇回流提取,活性炭脱色,浓缩、析晶,得到含量大于 85%的野黄芩素提取物.结论 该工艺应用sbsl GUS酶解技术制备野黄芩素,生产简便可行,为野黄芩素的生产制备提供了新的途径.

目的:利用网络药理学分析野黄芩苷抑制口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)癌变的分子机制,采用细胞学进一步验证.方法:通过网络药理学挖掘野黄芩苷作用于OLK的分子靶点,构建蛋白互作网络,通过GO、KEGG富集分析预测野黄芩苷可能的作用靶点及相关通路.利用CCK-8实验、Transwell实验验证野黄芩苷对口腔白斑细胞(Leuk-1)、舌癌细胞(Cal-27)增殖、迁移、侵袭的作用;Western印迹法检测相关分子的表达.采用GraphPad Prism 9软件包进行统计学分析.结果:野黄芩苷作用于OLK的潜在作用靶点共29个,HIF-1α为其中关键靶点.GO、KEGG分析结果显示,野黄芩苷高度参与细胞及组织对缺氧的反应并作用于组织缺氧相关的HIF-1信号通路.细胞学结果表明,野黄芩苷能显著抑制Leuk-1、Cal-27增殖(IC50:2 mmol/L)、迁移和侵袭(P＜0.05).Western印迹法进一步验证了关键分子靶点,1 mmol/L野黄芩苷能明显抑制Leuk-1和Cal-27细胞内HIF-1α蛋白的表达.结论:野黄芩苷可能通过抑制HIF-1信号通路表达,对OLK癌变起到抑制作用.