目的:通过体外实验探讨生长抑素5（SSTR5）激活对垂体催乳素腺瘤激素分泌的抑制作用及其机制。方法:使用前期研究中构建好的SSTR5过表达的GH3细胞系作为垂体催乳素腺瘤的体外细胞模型，使用SSTR5激动剂BIM23052联合其他G蛋白下游通路的抑制剂进行细胞刺激，荧光素酶报告基因检测Prl-luc启动子活性，酶联免疫吸附实验（ELISA）试剂盒检测细胞上清催乳素（PRL）的浓度。Student’s t检验和单向方差分析进行组间统计分析。 结果:预处理Gi蛋白抑制剂百日咳毒素后GH3 SSTR5细胞中Prl启动子活性从对照组[Ctrl （Control）组（100.00±6.82）%比BIM组（BIM23052）组（69.08±7.09）%， t＝5.43， P<0.01]到干预组[Ctrl组（107.86±12.40）%比BIM组（115.51±11.76）%， t＝0.76， P>0.05]，预处理百日咳毒素后细胞上清PRL的浓度变化从对照组[Ctrl组（100.00±12.38）%比BIM组（70.60±9.12）%， t＝3.31， P<0.05]到干预组[Ctrl组（91.31±9.81）%比BIM组（89.91±9.48）%， t＝0.18， P>0.05]，百日咳毒素可消除BIM23052对Prl启动子活性的影响；beta-ARK过表达激活G beta-gamma亚单位，Prl启动子活性从空白转染组[Ctrl组（100.00±3.27）%比BIM组（64.70±2.26）%， t＝15.38， P<0.01]到betaARK过表达组[Ctrl组（96.91±5.36）%比BIM组（70.12±6.82）%， t＝5.35， P<0.05]，beta-ARK过表达并不影响BIM23052对Prl启动子活性的抑制作用。使用cGMP类似物Rp8-pCPT-cGMPS、PKG抑制剂KT5823和PKG inhibitor、PKC广谱抑制剂Staurosporin和G?6983预处理GH3 SSTR5细胞，均不影响BIM23052对Prl启动子活性的抑制作用，其中cGMP类似物Rp8-pCPT-cGMPS为，Prl启动子活性从对照组[Ctrl组（100.00±3.97）%比BIM组（52.98±5.16）%， t＝12.5， P<0.01]到干预组[Ctrl组（95.99±5.38）%比BIM组（60.23±2.63）%， t＝10.35， P<0.01]；PKG抑制剂KT5823为，Prl启动子活性分别从对照组[Ctrl组（100.00±2.50）%比BIM组（72.64±0.45）%， t＝18.66， P<0.01]到干预组[Ctrl组（93.13±9.31）%比BIM组（53.54±11.50）%， t＝4.30， P<0.05]；PKG inhibitor为，对照组[Ctrl组（100.00±7.55）%比BIM组（64.07±3.49）%， t＝7.48， P<0.01]到干预组[Ctrl组（96.27±4.89）%比BIM组（74.17±1.16）%， t＝7.62， P<0.01]；Staurosporin为，不同浓度梯度0、5、50、100 nmol/L，Prl启动子活性分别从Ctrl组[（100.00±5.07）%、（102.03±1.08）%、（131.85±4.33）%、（109.62±7.98）%]到BIM组[（68.35±4.63）%、（74.24±9.64）%、（90.18±8.87）%、（85.24±6.63）%， P<0.01]；G?6983为，Prl启动子活性分别从对照组[Ctrl组（100.00±7.81）%比BIM组（66.09±7.66）%， t＝4.79， P<0.05]到干预组[Ctrl组（92.37±5.78）%比BIM组（77.31±1.54）%， t＝3.43， P<0.05]，提示PKG和PKC抑制剂均不影响BIM23052对Prl启动子活性的抑制作用。 结论:SSTR5激活对PRL合成的抑制作用是通过Gi alpha介导的，而不是通过涉及PKG或PKC的替代途径。

目的:检测胰腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)ARK5的表达，探讨其与胰腺癌患者吉西他滨化疗疗效及预后的相关性。方法:收集2016年1月至2021年6月嘉兴学院附属第二医院肝胆外科收治的175例胰腺癌患者外周血标本。运用纳米微流控芯片技术富集CTCs，采用免疫荧光法检测CTCs ARK5的表达。依据ARK5表达情况分为阳性组和阴性组，比较两组患者临床资料、吉西他滨化疗疗效、中位生存期和无进展生存期的差异。结果:175例患者中98例(55.6%)富集到CTCs，其中ARK5阳性组70例，阴性组28例，两组患者临床资料的差异均无统计学意义，具有可比性。70例ARK5阳性组患者中64例(91.4%)对吉西他滨产生了耐药性，28例ARK5阴性组患者中12例(42.8%)对吉西他滨产生耐药性，ARK5阳性组吉西他滨耐药发生率显著高于阴性组，差异有统计学意义( P<0.001)。ARK5阳性组患者中位生存期为11.5个月，阴性组为14个月；ARK5阳性组无进展生存期为6个月，阴性组为8个月，ARK5阳性组生存期显著短于阴性组，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:CTCs ARK5阳性表达的胰腺癌患者对吉西他滨化疗耐药发生率显著高于阴性患者，生存时间显著低于阴性患者，检测CTCs的ARK5表达有可能作为判断胰腺癌患者化疗疗效及预后的一种新方法。

目的:探索上皮性卵巢癌细胞卡铂耐药的机制,以提高卵巢癌患者化疗的疗效.方法:应用CCK8法检测卡铂处理后的上皮性卵巢癌细胞增殖,Western blot法检测上皮间质化转变相关蛋白E-Cadherin和Vi-mentin表达情况,流式细胞技术检测细胞表面CD133的变化情况,使用siRNA敲降AMP激活的蛋白激酶家族成员5(ARK5)后再观察卡铂的作用.结果:上皮性卵巢癌细胞系SKOV3与A2780的卡铂IC50分别为2.824μg/mL与1.760μg/mL,并且卡铂能诱导上皮性卵巢癌细胞发生上皮间质化转变;卡铂诱导ARK5显著上调,而不影响SNF1/AMP激活的蛋白激酶表达,敲降ARK5基因能显著减弱卡铂诱导卵巢癌细胞产生上皮间质化转变的效果.结论:ARK5在上皮性卵巢癌细胞卡铂耐药机制中具有重要作用,降低ARK5的表达可以减弱卡铂诱导卵巢癌细胞上皮间质化转变的作用.

目的 探讨含海洋中药的抗肿瘤方剂的组方用药规律.方法 在《海洋药物与效方》《中国海洋药物辞典》《中华海洋本草》等中医书籍及中国知网等数据库收集含海洋中药的抗肿瘤方剂,运用中医传承辅助平台软件V2.5建立数据库,进行数据挖掘.结果 筛选到含海洋中药的抗肿瘤方剂251首,涉及中药417味,其中海洋中药36味;药性以寒、平、温为主,药味以苦、辛、甘、咸居多,主要入肝、肺、胃、脾、心经.关联规则发现牡蛎-海藻-昆布为核心组合,临床主要与清热药、补虚药、化痰散结药、活血化瘀药配伍使用;熵聚类分析发现核心药物组合12个,分别为海藻-海蛤壳-昆布,皂角刺-穿山甲-僵蚕,木香-瓦楞子-蒲黄,蟾酥-雄黄-珍珠,黄柏-鱼脑石-冰片,海马-青皮-牵牛子,海藻-昆布-甘草,王不留行-穿山甲-牡蛎,蜂房-瓦楞子-全蝎,麝香-血竭-珍珠,黄柏-乳香-冰片,青皮-五灵脂-大腹皮.发现新处方6个:海藻-海蛤壳-昆布-甘草,皂角刺-穿山甲-僵蚕-王不留行-牡蛎,木香-瓦楞子-蒲黄-蜂房-全蝎,蟾酥-雄黄-珍珠-麝香-血竭,黄柏-鱼脑石-冰片-乳香,海马-青皮-牵牛子-五灵脂-大腹皮.含海洋中药的抗肿瘤方剂治疗肿瘤共47种,高频出现的依次为甲状腺肿瘤、肺癌、肝癌、子宫肌瘤、鼻咽癌、食管癌、胃癌、乳腺癌.结论 海洋中药在肿瘤治疗领域有规律可循,通过不同的配伍达到不同的治疗作用,其用药规律对于指导临床用药及新药开发具有重要的价值.

Objective:To study the correlation of serum HMGA1 levels in breast cancer lesion and serum with the pathological features of tumor.Methods:The patients with breast cancer and those with benign breast tumor who were treated in Mianyang Central Hospital between August 2014 and October 2017 were selected as the malignant group and the benign group of the study respectively; serum was collected to determine HMGA1 level, and breast cancer lesions and benign tumor breast tumor lesions were collected to determine the level of HMGA1 as well as the expression of proliferation genes and invasion genes.Results:HMGA1 level in breast cancer lesion and HMGA1 level in serum of malignant group were significantly higher than those of control group, and HMGA1 level in breast cancer lesion was positively correlated with HMGA1 level in serum; CCN5, MMRN2, TCEAL7 mRNA expression in breast cancer lesions of malignant group were significantly lower than those in breast tumor lesions of benign group, whereas HPK1 and Ki67, Sema4D, RhoA, Gab2, ARK5, SGK3 and MMP9 mRNA expression were significantly higher than those in breast tumor lesions of benign group; CCN5, MMRN2, TCEAL7 mRNA expression in breast cancer lesions of malignant group of patients with high HMGA1 level were significantly lower than those of malignant group of patients with low HMGA1 level, whereas HPK1 and Ki67, Sema4D, RhoA, Gab2, ARK5, SGK3 and MMP9 mRNA expression were significantly higher than those of malignant group of patients with low HMGA1 level.Conclusion:HMGA1 levels abnormally increase in breast cancer lesion and serum; the abnormally elevated HMGA1 can assess the pathological features of tumor proliferation and invasion.

目的 探讨供者来源CD19嵌合抗原受体T淋巴细胞( CD19 CLA-T)治疗对异基因造血干细胞移植后复发急性B淋巴细胞白血病的疗效及不良反应,分析影响治疗因素.方法 回顾性分析2015年7月至2017年10月5例在首都医科大学附属北京儿童医院接受供者CD19 CLA-T治疗患儿的治疗及随访资料.总结输注治疗疾病状态、预处理方案、回输细胞剂量及治疗后不良反应和相关免疫学指标变化,并追踪随访治疗结果.结果 1例患儿对治疗无反应.4例患儿在4周内获得形态学缓解或微小残留病变( MAD)转阴,中位作用时间为14 d.外周血CLA-T细胞高峰出现在回输后2周左右.截至最后随访日期,接受治疗的患儿中死亡2例,存活3例,死亡原因均为原发病进展,存活病例中2例为无病生存,1例为CD19阴性髓外复发后带瘤生存.治疗不良反应主要为细胞因子释放综合征( CAS)反应,通常出现在治疗后1~2周;此外,1例患儿出现中枢神经系统异常,2例患儿出现可疑移植物抗宿主病表现.结论 供者CD19 CLA-T对移植后复发急性B淋巴细胞白血病有良好的短期效果,长期疗效还需进一步观察;CAS为治疗最常见不良反应;治疗靶点脱失、CLA-T细胞耗竭是导致治疗失败的主要原因.

目的 探讨早产儿足月时脑内代谢物对其神经发育状况的预测价值,为临床早期干预治疗提供依据.方法 收集2015年5月至2016年3月在广州市妇女儿童医疗中心新生儿重症监护室、神经康复科门诊就诊的30例早产儿,在其纠正足月时行头颅磁共振成像检查和磁共振波谱成像扫描,纠正6月龄和纠正1岁时行Llbkrta婴儿运动量表(LIMS)评估和Gkskll发育量表评估.结果 30例早产儿中,男19例,女11例;出生胎龄27 +3 ~31周[(28. 8 ± 1. 0)周];出生体质量800~1 400 g[(1 176. 3 ± 145. 1)g].基底核肌醇( MI)、基底核MI╱肌酸(Cr)与早产儿纠正1岁发育商呈负相关(r﹦ -0. 465、-0. 532,均P＜0. 05);海马区乳酸( Fac)╱Cr与早产儿纠正6月龄发育商呈负相关(r﹦ -0. 420,P＜0. 05);脑室周围Fac、脑室周围Fac╱Cr与纠正1岁发育商均呈负相关( r﹦ -0. 405、-0. 386,均P＜0. 05),脑室周围Fac╱Cr与纠正1岁LIMS得分呈负相关( r﹦-0. 380,P＜0. 05);小脑Fac、小脑Fac╱Cr与纠正1岁发育商均呈负相关( r﹦ -0. 393、-0. 394,均P＜0. 05).额叶代谢物与神经发育水平不相关(P＞0. 05).结论 早产儿足月时脑内代谢物有助于预测神经发育状况,有预测价值的代谢物有MI、Fac、MI╱Cr、Fac╱Cr,其中MI╱Cr预测神经发育状况的能力最好.在额叶、基底核、海马、脑室周围、小脑5个感兴趣区中,脑室周围代谢物预测神经发育状况的能力最好.能够预测的最佳时间点可能为纠正1岁.

目的 探讨Akt1和ARK5在乳腺癌组织中表达与临床病理意义.方法 回顾性分析88例乳腺癌临床病理资料,将其肿瘤组织制成组织芯片,并用免疫组化EnVision两步法检测Akt1和ARK5在乳腺癌组织中的表达,取10例癌旁组织作对照.结果88例乳腺癌中Akt1阳性表达率是77.3％(68/88),乳腺癌中Akt1表达与淋巴结转移、TNM分期密切相关(P＜0.05).ARK5阳性表达率是48.9％(43/88),乳腺癌中ARK5表达与淋巴结转移、肿瘤直径密切相关(P＜0.05).此外,88例乳腺癌中Akt1和ARK5阳性表达呈现正相关(r=0.343,P＜0.05).结论乳腺癌中Akt1和ARK5的表达水平与临床病理特征密切相关,有望作为评估乳腺癌的临床病理分期的重要指标.

目的 探讨平消胶囊联合SOX方案治疗晚期胃癌的疗效.方法 选取2018年6月-2020年2月北京航天总医院收治的102例晚期胃癌患者作为研究对象,将所有患者按照治疗方法分为对照组与观察组,每组各51例.对照组患者给予SOX方案化疗,即口服替吉奥胶囊,初始剂量根据体表面积确定:体表面积＜ 1.25 m2者40 mg/次,1.25～1.5 m2者50 rmg/次,＞1.5 m2者60 mg/次,均为2次/d,分别于早晚饭后服用,连续服用2周后停药1周;第1天奥沙利铂注射液,130 mg/m2,静脉滴注3h.观察组在对照组治疗的基础上口服平消胶囊,5粒/次,3次/d,于化疗1周后开始服用.治疗4周后观察各指标变化情况.观察两组患者的临床疗效,同时比较两组的血清糖类抗原242 (CA242)、糖类抗原125 (CA125)、糖类抗原199 (CA199)和癌胚抗原(CEA)水平,外周血转化生长因子-α(TGF-α)和腺苷酸活化蛋白激酶5(ARK5)水平;CD4+T淋巴细胞亚型Th17细胞、CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)及Th 17/Treg比值;观察并记录两组无进展生存期(PFS)和总生存期(OS).结果 治疗后,观察组疾病控制率为73.47％,显著高于对照组的54.00％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,两组CA242、CA125、CA199、CEA水平显著低于治疗前(P＜0.05),观察组CA242、CA125、CA199、CEA水平显著低于对照组(P＜0.05).治疗后,两组Th17、Treg、Th 17/Treg均值低于治疗前(P＜0.05);治疗后,观察组Th17、Treg、 Th17/Treg值显著低于对照组(P＜0.05).治疗后,观察组患者PFS和OS为均长于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,两组外周血TGF-α、ARK5水平均显著低于治疗前(P＜0.05);且观察组治疗后外周血TGF-α、ARK5水平显著低于对照组(P＜0.05).结论 平消胶囊联合SOX方案治疗晚期胃癌疗效显著,可有效降低肿瘤标志物水平,抑制肿瘤生长,改善患者的免疫功能,延长生存期,改善预后,降低TGF-α、ARK5水平,抑制肿瘤转移,促进肿瘤细胞凋亡,同时还能降低毒副反应的发生率,安全性较高.

目的 探讨miR-145-5p对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及可能涉及的分子机制.方法 实时定量PCR检测miR-145-5p在正常卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞中的表达差异,CCK-8、流式细胞术检测过表达miR-145-5p对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响.靶基因预测软件预测miR-145-5p的靶基因,生物信息学、Western blot、双荧光素酶基因验证报告实验、挽救实验等方法预测并验证miR-145-5p在卵巢癌细胞中发挥作用涉及的分子机制.结果 卵巢癌细胞中miR-145-5p的表达水平明显低于正常卵巢上皮细胞(t=4.345,P=0.049).与对照组相比,过表达miR-145-5p的卵巢癌细胞增殖率明显降低(t=-15.790,P<0.001),凋亡率明显增加(t=5.433,P=0.032).TargetScan软件在线预测及双荧光素酶基因验证报告实验结果表明,ARK5是miR-145-5p的直接靶基因(t=4.583,P=0.010).ARK5过表达细胞的增殖率明显升高(t=27.290,P<0.001),凋亡率明显下降(t=-8.241,P=0.001).过表达miR-145-5p可在mRNA(t=-12.824,P<0.001)及蛋白水平(t=-4.792,P=0.001)明显下调ARK5的表达.ARK5的挽救性表达显著抵消了miR-145-5p对细胞增殖的抑制(t=15.580,P=0.004)和促细胞凋亡(t=-12.470,P=0.006)的效果.结论 miR-145-5p可能是通过靶向抑制ARK5来抑制卵巢癌细胞增殖和促进细胞凋亡的.