目的:探讨1例重症联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency，SCID)患儿的遗传学病因。方法:应用全外显子测序(whole exome sequencing，WES)结合拷贝数变异分析对先证者进行筛查，用Sanger测序和荧光定量PCR对先证者及其家系成员进行验证。结果:WES发现先证者 DCLRE1C基因存在第1 ~ 3外显子缺失和第5外显子c.322G>A(p.Val108Met)杂合变异，其中第1 ~ 3外显子缺失遗传自父亲，为已知致病变异；c.322G>A遗传自母亲，既往未见报道。 结论:DCLRE1C基因第1 ~ 3外显子缺失和c.322G>A变异可能是该患儿的发病原因。

目的 研究青蒿素(Artemisinin)在β淀粉样蛋白1-42(amyloid-β1-42,Aβ1-42)诱导的SH-SY5Y细胞毒性作用中的保护性作用及其可能机制.方法 SH-SY5Y细胞分为control组、Aβ1-42组、control+Aβ1-42组和Arte-misinin+Aβ1-42组.利用细胞增殖实验检测细胞增殖情况,乳酸脱氢酶细胞毒性检测实验检测细胞的受损情况,免疫荧光检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的表达水平,Western blotting检测Nrf2和HO-1蛋白的表达.结果 与control组相比,Artemisinin能够改善Aβ1-42对SH-SY5Y细胞的损伤以及增殖活力的抑制.除此之外,Artemisinin还能够抑制Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞内ROS的表达,上调Nrf2和HO-1蛋白的表达.结论 Artemis-inin能够通过Nrf2/HO-1通路改善Aβ1-42诱导的氧化应激对SH-SY5Y细胞的毒性作用.

目的 探讨Artemis对人肝癌耐药细胞株BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的影响及其可能机制.方法 将pS-GU6/ GFP/Neo/ shArtemis干扰质粒转染人肝癌耐药细胞BEL-7402/5-FU(shArtemis组),通过Real-time PCR法检测P-gp基因表达水平变化;MTr法检测shArtemis组细胞对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素及索拉菲尼的IC50值和RI值;利用Western-blot法检测p-Artemis和ATM蛋白水平表达变化;使用ATM抑制剂KU55933联合丝裂霉素作用细胞48 h,Western-blot法观察ATM、γ-H2AX和Artemis蛋白水平表达变化.结果 与对照组比较,shArtemis组的P-gp mRNA表达水平下降(P＜0.05),且对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和索拉菲尼的敏感性增加,IC50值和RI值均降低(P＜0.05).shArtemis组的p-Artemis与ATM蛋白表达水平降低(P＜0.05);KU55933联合丝裂霉素作用细胞后,有效减少ATM蛋白的表达(P＜0.05),同时γ-H2AX蛋白表达量增加(P＜0.05),但Artemis蛋白表达无明显变化(P＞0.05).结论 靶向干扰Artemis的表达能够增强细胞BEL-7402/5-FU对化疗药物的敏感性.此效应可能与Artemis作为BEL-7402/5-FU DNA损伤修复的分子开关,进而通过影响ATM参与DNA损伤修复有关.

目的 检测苦艾(Artemisia absinthium L.)提取物对树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟和功能的影响.方法 制备苦艾水提物(Artemisia absinthium water extract,AAW)和醇提物(Artemis-ia absinthium ethanol extract,AAE),用含不同多糖浓度AAW(5μg/ml、50μg/ml、150μg/ml)和含不同黄酮浓度AAE(0.6μg/ml、3μg/ml、6μg/ml)处理DCs,通过流式细胞术检测AAW及AAE对DC活性、抗原吞噬能力和DC成熟的影响.酶联免疫吸附法检测DC分泌的细胞因子水平,Western blot检测核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3(janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK2/STAT3)信号通路关键分子的活化水平.结果 AAW促进DC的成熟,显著降低DC的抗原吞噬能力,提高白细胞介素-12p40(interleukin-12p40,IL-12p40)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌水平.AAE显著增强DC表面共刺激分子的表达,降低DC的抗原吞噬能力,对DC的细胞因子水平没有影响,但是显著降低了细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的TNF-α、IL-12p40和IL-6水平.进一步研究表明,AAW和AAE能激活p38、细胞外信号调节蛋白激酶(extra-cellular signal regulated kinase,ERK)、IKKα/β、NF-κBp65及JAK2的磷酸化水平,AAE还能激活c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的磷酸化水平,但是AAE与LPS联用抑制了LPS激活的NF-κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IκB-α)、IKKα/β、NF-κBp65、p38、ERK及JAK2的磷酸化.结论 AAW具有免疫增强作用,AAE具有抗炎作用.

目的:分析分离自男性不育症患者精液的精子制动阳性金黄色葡萄球菌的全基因组信息,发掘可能编码导致精子制动的蛋白和基因. 方法:收集分离男性不育症患者精液中的金黄色葡萄球菌(共22株),并根据其对精子的制动能力分为精子制动阳性组与制动阴性组,随后选出各组最具有代表性的菌株M J015(制动阳性株)与M J163(制动阴性株),分别提取其DNA进行全基因组测序,对获得的测序结果进行全基因组序列拼接并提交NCBI进行注释,MJ015的NCBI登录号为CP038183,MJ163的NCBI登录号为CP038229,同时使用BRIG软件进行BLAST比对并制作圈图,使用Artemis软件套装对MJ015与MJ163进行详细比对以寻找目标基因. 结果:M J015的染色体全基因组序列总长为2 784 836 bp,含有2个质粒,MJ163的染色体全基因组序列总长为2 746 673 bp,包括1个质粒,MJ015和MJ163的GC含量分别为32.13％、32.08％,MJ015和MJ163分别注释有2 921个和2 844个基因,且经过比对发现M J015与MJ163的全基因组序列有约130 kb的序列未能比对上,在这些差异序列中所包含的SAK基因,其表达产物经实验证实为这两株菌表达的差异蛋白. 结论:经序列分析与实验验证,金黄色葡萄球菌M J015基因组上的SAK基因可能是使精子制动的关键基因,其表达的产物葡激酶对精子制动的能力强弱的影响有待进一步研究证实.