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地衣型真菌皮革肾岛衣中1个Ⅲ型 聚酮合酶基因的克隆与鉴定
编辑人员丨2023/8/6
该研究通过对皮革肾岛衣地衣型真菌转录组数据的分析,利用RT-PCR技术,首次克隆得到1个Ⅲ型聚酮合酶基因(N p PK S3),并分析该基因在不同培养基上的表达,以选择皮革肾岛衣地衣型真菌的最佳培养基,为研究NpPKS3基因功能奠定基础,并为异源表达皮革肾岛衣地衣型真菌的聚酮类化合物提供研究材料.结果表明:(1)NpPKS3基因(GenBank登录号MF351559)全长1335 bp,编码444个氨基酸,其产物为NpPKS3蛋白,在细胞质基质中发挥功能.(2)系统进化分析显示,N p PK S3基因编码的氨基酸序列与Ⅲ型聚酮合酶的csyB亚组聚为一支,推测该基因编码csyB类酶蛋白.(3)采用"一菌多产物"策略研究发现,N p PK S3基因在BMG培养基中表达能力最强,在BD培养基上表达能力最弱.
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编辑人员丨2023/8/6
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利用Ⅲ型聚酮合酶CsyB起始单元的底物多样性体内合成csypyrone类化合物
编辑人员丨2023/8/6
作为新型Ⅲ型聚酮合酶,米曲霉来源的CsyB能够依次接受一个起始单元为短链脂肪酰辅酶A、一个延伸单元为丙二酰辅酶A和另一个延伸单元为乙酰乙酰辅酶A的3个底物形成短链的csypyrone B1-3.基于CsyB的晶体结构分析,显示它的活性中心存在一个长约16(A)的能够接受脂肪酰辅酶A结合通道,这个通道很可能能够接受多种底物.为了检测该酶的底物多样性,将CsyB基因导入到存在长链脂肪酰辅酶A前体的大肠杆菌中表达.高效液相结果显示,相比对照菌株,重组菌株产生了一系列长链的csypyrone衍生物.利用紫外可见光特征吸收值和高分辨液相色谱-质谱联用仪对这些新产物作了初步分析.对3个具有羟基的csypyrone产物的结构进行了核磁共振一维谱和二维谱的详细鉴定,确定了其羟基的位置.上述结果显示,CsyB具有广泛的底物特异性,不但可以接受多种长链饱和或不饱和脂肪酰辅酶A,还可以接受具有羟基修饰的长链脂肪酰辅酶A作为底物.
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编辑人员丨2023/8/6
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壳聚糖絮凝蛹虫草菌丝体多糖工艺优化及其失活动力学分析
编辑人员丨2023/8/5
利用响应面法对蛹虫草诱变菌株CSYB-2菌丝体多糖的制备工艺进行优化,结果显示在壳聚糖用量1.4mL/g、絮凝温度55℃、絮凝时间70min条件下,多糖保留率为(82.05±0.21)％.在壳聚糖絮凝诱变菌株CSYB-2菌丝体多糖浸提液的絮凝工艺基础上,通过构建壳聚糖失活动力学模型,探究絮凝剂(壳聚糖)在絮凝过程中的动力学规律和失活机理.结果表明壳聚糖的失活动力学符合一级反应的失活动力学方程,在考察溶液澄清率(絮凝率)在不同时间、温度下变化规律的基础上推算出失活速率常数、活化能等动力学函数值,为研究絮凝作用中絮凝剂失活的机理提供理论支持.
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编辑人员丨2023/8/5
