肠道菌群是由许多细菌及其代谢产物组成的复杂生态系统,对人体消化、营养吸收、能量供应、脂肪代谢、免疫调节等诸多方面发挥着不可替代的作用.探索肠道菌群的结构与功能、关键基因与代谢产物,将有助于实现疾病的早期诊断与辅助诊断,发现新的治疗靶点与药物治疗效果评价,更好地指导抗生素的使用.肠道菌群的鉴定在临床诊疗及药物研发等领域都具有重要作用,因此,有必要对这一迅速发展的领域进行全面回顾.传统的鉴定方法无法全面捕捉肠道微生物多样性.随着分子生物学的快速发展,肠道菌群的分类鉴定也从最初的表型鉴定和化学鉴定演变到了分子水平鉴定.本综述整合了肠道菌群的主要鉴定方法及其应用评价,特别关注于分子生物学方法的研究进展,并重点介绍了高通量测序技术在肠道菌群鉴定中的应用,这种革命性的肠道菌群鉴定方法预示着人类对微生物世界认识的全新篇章.

失眠症是一种睡眠时间或睡眠质量不能满足机体需求,影响日常生活的主观感觉,主要表现为入睡困难,睡眠维持困难、易醒甚或彻夜难眠,日间可伴有疲乏、注意力不集中、焦虑、抑郁等症状.近年来,社会竞争等压力越来越大,失眠症的发病率也越来越高,随着分子生物学的不断发展,肠道菌群及其代谢产物成为研究热点.越来越多的研究表明,肠道菌群与失眠症关系密切,二者通过神经递质、下丘脑-垂体-肾上腺轴、免疫系统、迷走神经等途径相互影响.肠道菌群指肠道中各种微生物菌群的总称,一方面,失眠会导致肠道菌群失衡,有害菌大量繁殖,出现相应的肠道症状,另一方面,肠道菌群紊乱也会影响睡眠质量.中医药治疗失眠症具有独特的优势且疗效显著,大量研究表明,中医药可以通过调节神经递质、下丘脑-垂体-肾上腺轴、免疫系统、迷走神经等多种途径以调节肠道菌群的数量和种类,维持肠道菌群稳态,从而改善失眠症.该文围绕肠道菌群与失眠症的相关发病机制及中医药通过调节肠道菌群治疗失眠症的研究进行综述,为失眠症的防治提供新的思路和方法.

儿童变应性疾病的发病率日益升高，已成为严重的公共卫生负担。研究证明人体与微生物的相互作用，有助于建立免疫耐受。这些证据支持利用微生物制剂来预防和治疗变应性疾病。细菌溶解产物(BLs)是一种免疫调节剂，由多种与呼吸道感染有关的细菌灭活提取物组成。BLs作用于黏膜免疫系统，通过激活树突状细胞引发下游的免疫反应，从而恢复辅助T淋巴细胞1/辅助T淋巴细胞2平衡。相关研究证实，BLs可以缓解变应性疾病的临床症状，并且有可能起到一级预防作用。BLs的免疫调节作用受到产品类型、给药方式、给药方案等多种因素影响，临床应用时应评估患者的免疫状态，避免免疫耗竭。现总结BLs的作用机制、临床研究进展及给药方案等，以期为临床应用提供依据。

孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder，ASD）是一种严重的神经发育障碍性疾病，具有多种病因、不同亚型和各种发展轨迹。现有研究表明ASD可能与遗传、环境等因素有关，针对肠道微生物群及其代谢产物与ASD之间关系的研究尚未构成体系，肠道微生物群及其代谢产物可能是ASD发病的一个潜在的影响因素。对甲酚是一种有毒性的小分子代谢物，可通过人体内肠道菌群降解酪氨酸而产生，过量的对甲酚对易感儿童中枢神经系统特定区域的有害影响可能与ASD的病因有关。人体中对甲酚水平的升高可能会重塑肠道菌群，影响多巴胺神经元的功能，诱导ASD样行为。本文就对甲酚在ASD发病机制中的潜在作用及其最新研究进展进行综述。

感染是导致外科重症监护病房中危重患者死亡的主要病因之一。越来越多的证据表明，外科重症患者的感染多来源于肠道中机会致病菌易位。肠道菌群作为人体共生的部分，其代谢产物被人体摄取利用后会影响患者机体的生理病理代谢改变。危重症患者在入住外科重症监护病房期间往往由于外科手术、原发疾病、继发感染以及临床治疗措施的使用，很大程度上引起肠道微生态失调。本文以外科重症患者为焦点，深入回顾外科重症监护病房中患者临床治疗期间肠道微生态的变化特点与肠道微生物影响外科重症感染性疾病发生发展及其预后转归关系的相关研究，作一综述。

本研究旨在构建基于核酸滚环扩增（RCA）的简便快速、超灵敏的光学生物传感技术，并将其运用于结核杆菌耐药相关基因的多重检测。本研究在2020年2月至2021年5月期间，于陆军军医大学第一附属医院检验科，针对异烟肼、利福平和链霉素耐药的高频基因突变位点katG315（AGC?ACC）、rpoB531（CAC?TAC）和rpsL43（AAG?AGG），分别设计锁式探针（padlock probe，PLP）、引物和捕获探针，构建了基于磁珠的固相RCA恒温扩增反应体系，并进行了实验参数的优化。通过多色荧光探针（Cy3/Cy5/ROX）对RCA产物精准捕获与信号放大，实现了对3种突变基因的单管多重检测。进一步对该方法的灵敏度、特异性与线性范围等分析性能进行验证，结果显示同一反应体系中katG315的响应范围为1.0 pmol/L至0.1 nmol/L，rpoB531和rpsL43的响应范围为1.0 pmol/L至50.0 pmol/L和1.0 pmol/L至20.0 pmol/L，且该方法具有较好的特异度与灵敏度，在混合靶标中可精确识别单碱基突变，最低检出限低至1.0 pmol/L；在模拟血清样本的回收实验中，回收率可达95.0%~105.2%。综上，本研究构建的恒温扩增型多重检测方法可快速实现3种耐药突变位点的单管多重检测，该技术成本低廉、简便快速、不依赖大型设备，为病原体耐药基因检测提供了一种新的分析方法。

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)是导致人类疱疹性疾病的主要病原体，具有广泛宿主细胞类型、庞大外源基因容量等特点，因此也是一种颇具吸引力的病毒载体。HSV基因组较为庞大，对于病毒基因组的操作技术便成为关键环节。对该病毒基因组的操作先后经历了同源重组(homologous recombination),细菌人工染色体技术(bacterial artificial chromosome, BAC)和CRISPR/Cas9 (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeat/CRISPR-associated nuclease 9 )技术。同源重组具有重组效率低、产物不易纯化等缺点，而且将大型病毒基因组克隆到BAC上是一个耗时耗力的过程。近年来，CRISPR/Cas9技术因其操作简便、重复性好、成本低廉等优势而被越来越多的研究者应用于各种物种的基因工程研究工作中，对于病毒基因组的操作也随之更加精确高效。本文对CRISPR/Cas9技术在HSV基因功能、治疗HSV感染性疾病及HSV载体研究中的应用进行综述，以期对相关的研究工作提供一定参考。

目前处理伤口的方式主要包括减低局部压力、抑制伤口细菌感染、彻底清创换药、加强局部血液循环、负压封闭吸引术和湿性敷料等，多数可获得较好的预后，但仍有部分患者出现创面不愈合、组织缺血性坏死甚至坏疽，严重者甚至需要截肢。近年来，随着干细胞研究的迅速深入，利用其旁分泌功能治疗慢性创面受到普遍关注，干细胞源性外泌体的应用已成为治疗创面不愈合的一种新策略。外泌体是细胞分泌的脂质双重膜囊，直径30~100 nm，是干细胞旁分泌的产物。干细胞外泌体通过多种途径参与创面修复，包括控制炎症反应、调节细胞外基质的生长和扩张、促进血管生成和抑制瘢痕形成等。不同干细胞来源的外泌体对修复伤面的调节作用机制不同。通过对干细胞来源的外泌体在创面治疗中的作用和相关机制进行综述，为外泌体治疗创面不愈合提供理论基础。

脓毒症是一种危及生命的器官功能障碍综合征，由宿主对感染的反应失调引起 [1]。全球每年有3 000多万脓毒症患者，每年造成的死亡人数在500万左右，是ICU患者死亡的最常见原因之一 [2]。器官功能障碍是脓毒症的主要并发症，其中脓毒症相关性脑病(SAE)发生率较高，约为70%，主要表现为从意识混乱到谵妄甚至昏迷等不同程度的脑功能障碍 [3]。SAE的发生显著延长了脓毒症患者ICU住院时间，并增加其死亡率和长期后遗症的发生率 [4]。肠道菌群与人体疾病的关系是近十年来研究的热点。研究表明，肠道菌群通过调节免疫系统、影响宿主易感性和炎症反应在脓毒症的发生和发展中起重要作用 [5]。研究显示，肠道菌群可能通过代谢产物改变血脑屏障、调节神经炎症反应、影响神经递质释放等参与肠-脑循环，从而影响认知功能 [6]。基于此，本文就肠道菌群在SAE中的作用以及基于肠道菌群治疗SAE的策略进行综述。

食欲是一种支配摄食和选择食物的生理心理因素，受中枢神经核团、递质和外周感受器和食欲相关因子共同调控。食物成瘾（FA）、糖尿病在生理病理上相互关联，又互为独立风险因素。据研究，FA是肥胖、糖尿病等代谢性疾病亚组，受大脑中多巴胺奖励系统调控，驱使主体走向极端享乐过度饮食的行为。FA与遗传、环境等因素息息相关，肠道菌群代谢的多种产物同样参与FA发生、发展的多个环节，FA亦引起肠道菌群代谢产物的改变。该文主要对肠道菌群代谢产物与糖尿病患者FA之间的联系进行综述。