特异性促炎症消退介质(specialized proresolving mediators，SPMs)是一类由必需脂肪酸衍生而来的脂质介质，具有抗炎/促消退作用。SPMs主要包括脂氧素(lipoxin)、消退素(resolvin)、保护素(protectin)和胞壁质(maresin)。不同种类的SPMs可结合不同受体，如甲酰肽受体2(ALX/FPR2)、G蛋白耦联受体32(DRV1/GPR32)、G蛋白耦联受体18(DRV2/GPR18)或趋化因子样受体1(ERV1/CMKLR1)，经核因子-κB、信号传导和转录激活因子、丝裂原活化蛋白激酶信号通路，通过限制中性粒细胞迁移浸润，调节炎性细胞因子表达，增强巨噬细胞吞噬作用发挥促炎症消退作用。SPMs分子在危重疾病严重程度、预后预测和临床干预效能方面具有潜在临床价值。本文就SPMs在重症感染免疫炎症反应中的作用及潜在临床价值作一综述。

目的:探讨G蛋白耦联受体55（G protein-coupled receptor 55，GPR55）拮抗剂CID16020046在小鼠肾脏纤维化中的作用，为肾脏纤维化治疗提供新的方法和思路。方法:（1）在体外大鼠肾脏成纤维细胞（NRK-49F）中分别过表达GPR55和使用GPR55拮抗剂CID16020046，同时使用转化生长因子β1（TGF-β1）刺激，观察纤维化相关因子和炎性因子的表达。（2）体内构建单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）小鼠肾脏纤维化模型，将8周龄雄性C57BL/6J小鼠（20～25 g）按照随机数字表法随机分为3组：假手术组（Sham组， n=6）、造模组（UUO组， n=7）、造模+CID16020046药物组（UUO+CID组， n=8），UUO+CID组在造模前1 d、造模当日和术后每日均腹腔注射药物CID16020046（10 mg/kg），每日1次，Sham组和UUO组均腹腔注射对应剂量的0.9%生理盐水。UUO术后7 d处死小鼠取材，检测其肾功能指标、肝脏转氨酶、心肌标志物，Western印迹和实时荧光定量PCR检测肾脏纤维化相关因子和炎性因子的表达，免疫组化、天狼猩红染色、Masson三色染色检测肾组织的病理改变。 结果:（1）使用TGF-β1刺激NRK-49F细胞后，GPR55 mRNA和蛋白表达量均明显增加（均 P<0.05）；TGF-β1组和TGF-β1+GPR55过表达质粒组纤维化相关因子纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白（Collagen Ⅰ）和炎性因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α mRNA表达的差异均无统计学意义（均 P>0.05）；与TGF-β1组比较，TGF-β1+CID组纤维化相关因子α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）蛋白及Collagen Ⅰ、α-SMA mRNA表达均较低（均 P<0.05）。（2）与Sham组比较，UUO组GPR55 mRNA和蛋白表达均较高（均 P<0.05）。与UUO组比较，UUO+CID组血清肌酐较低（ P<0.05），两组血尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶的差异均无统计学意义（均 P>0.05）。与UUO组比较，UUO+CID组肾组织纤维化相关因子纤连蛋白、Collagen Ⅰ、Vimentin蛋白及纤连蛋白、Collagen Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、α-SMA mRNA表达均较低，肾小管扩张和间质胶原纤维沉积程度显著较轻（均 P<0.05）。 结论:CID16020046可降低UUO小鼠血清肌酐，保护肾功能，同时可降低肾脏成纤维细胞和小鼠肾组织纤维化相关因子表达，减轻肾脏纤维化。

G蛋白耦联胆汁酸受体5(TGR5)是胆汁酸受体之一，在人体和动物体内广泛表达，通过诱导环磷酸腺苷、信号转导和转录激活因子、核因子κB、细胞外调节蛋白激酶和蛋白激酶B信号通路，调节细胞增殖、炎症、黏附、迁移、胰岛素释放，参与免疫调节、能量代谢调节及癌症等发展过程。TGR5在多种疾病尤其肺部疾病中异常表达，本文旨在总结TGR5介导的信号通路及其在肺部疾病发病机制中的作用，有望成为新兴的治疗靶点。

目的 探究G蛋白耦联受体激酶(GRK)2 在帕金森病(PD)小鼠纹状体中的作用机制.方法 选用C57BL/J雄性8 周龄小鼠,随机分为对照组和模型组;对照组腹腔注射0.2 ml生理盐水,模型组腹腔注射30 mg/kg的1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP),2 次/w,共5w.35d后对两组进行爬杆实验和旷场实验检测.行为学检测后,小鼠麻醉后眼球取血、取脑,运用酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫组化检测血清和中脑酪氨酸羟化酶(TH)表达,Western印迹和免疫组化检测纹状体GRK2 和多巴胺2 受体(D2R)表达.结果 在旷场实验中,MPTP干预后模型组自发活动总距离、穿越中心格次数和距离比对照组明显减少(均P＜0.001).在爬杆实验中,模型组爬杆时间比对照组明显延长(P＜0.001).ELISA及免疫组化显示,模型组血清和中脑TH值较对照组明显减少(P＜0.001).Western印迹和免疫组化提示,与对照组相比,纹状体D2R表达显著减少,而CRK2 表达显著升高(P＜0.05).结论 GRK2 可能通过D2R参与调控PD的症状,针对GRK2 是潜在的PD治疗靶点.

目的 观察亚低温对心搏骤停(CA)猪心肺复苏(CPR)后心肌β-肾上腺素能受体(β-AR)信号通路的影响,探讨其心肌保护作用的机制.方法 选择健康雄性长白猪复制CA-CPR模型(右心室致颤, 8 min后进行CPR),并按随机数字表法分为两组(n=8):亚低温组于自主循环恢复(ROSC)后20 min内使用亚低温治疗仪将动物血温诱导为33 ℃并维持6 h;对照组则用冷热毯将动物体温维持在(38.0±0.5)℃.实验过程中持续监测动物心率(HR)、平均动脉压(MAP)、左室内压上升或下降最大速率(±dp/dt max);分别在CA前及ROSC后0.5、1、3、6 h用热稀释法测量心排血量(CO),并收集静脉血检测心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;于CA前及ROSC后6 h用心脏超声测量左室射血分数(LVEF).ROSC后6 h处死动物并留取心肌组织标本,用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测β1-AR mRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)含量,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测G蛋白耦联受体激酶2(GRK2)蛋白表达.结果 两组动物复苏后HR较基础值明显升高,CO、±dp/dt max明显下降,MAP无明显变化,血清cTnI水平明显升高.与对照组比较,亚低温组动物ROSC后0.5、1、3 h HR明显降低(次/min:142.80±12.83比176.88±15.14,115.80±11.48比147.88±18.53,112.60±7.40比138.50±12.02,均1<0.01), ROSC后1 h和3 h CO明显升高(L/min:3.97±0.40比3.02±0.32,4.00±0.11比3.11±0.59,均1<0.01),ROSC后3 h和6 h ±dp/dt max明显升高〔+dp/dt max(mmHg/s):3402.5±612.7比2130.0±450.6,3857.5±510.4比2562.5±633.9;-dp/dt max(mmHg/s):2935.0±753.2比1732.5±513.6,3520.0±563.6比2510.0±554.3,均1<0.05〕,ROSC后3 h和6 h血清cTnI水平明显下降(μg/L:1.39±0.40比3.24±0.78,1.46±0.35比3.78±0.93,均1<0.01).心脏超声显示,两组ROSC后6 h LVEF均较CA前明显降低,但亚低温组LVEF明显高于对照组(0.52±0.04比0.40±0.05,1<0.05).ROSC后6 h,亚低温组心肌组织β1-AR mRNA表达和AC、cAMP含量明显高于对照组〔β1-AR mRNA(2-ΔΔCT):1.18±0.39比 0.55±0.17,AC(ng/L):197.0±10.5 比162.0±6.3,cAMP (nmol/L):1310.58±48.82比891.25±64.95,均1<0.05〕,GRK2蛋白表达明显低于对照组(GRK2/GAPDH:0.45±0.05比0.80±0.08,1<0.05).结论 亚低温可以减轻CA-CPR猪复苏后心肌的损伤程度,其作用机制可能与减轻β-AR信号通路受损有关.

目的 研究脊髓G蛋白耦联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)在大鼠持续性术后痛中的作用. 方法 鞘内置管成功的雄性SD大鼠60只,采用随机数字表法分为6组(每组10只):假手术组(Ⅰ组)、假手术+溶媒二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组(Ⅱ组)、假手术+GRK2降解抑制剂MDL28170组(Ⅲ组)、皮肤/肌肉切口和牵拉(skin/muscle incision and retraction,SMIR)组(Ⅳ组)、SMIR+DMSO组(Ⅴ组)、SMIR+MDL28170组(Ⅵ组).应用Yaksh法鞘内置管;采用Flatters法制备大鼠SMIR模型;各组大鼠分别于术前1 d(T0)、术后3 d(T1)、术后7 d(T2)、术后14 d(T3)、术后21 d(T4)用von Frey细丝法测定机械刺激缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);于T3时刻行为学测定后各组随机抽取4只大鼠处死,取L4～L6节段脊髓组织,采用Western blot法检测脊髓GRK2的表达. 结果 与Ⅰ组比较,Ⅳ组和Ⅴ组T1～T4时PWMT明显降低(P＜0.05),Ⅵ组T1～T3时PWMT明显降低(P＜0.05);T1～T4时,与Ⅳ组比较,Ⅵ组PWMT明显升高(P＜0.05).与Ⅰ组比较,Ⅳ组和Ⅴ组大鼠脊髓GRK2表达明显下调(P＜0.05);与Ⅳ组比较,Ⅵ组大鼠脊髓GRK2表达明显上调(P＜0.05). 结论 脊髓GRK2表达水平下调与大鼠SMIR持续性术后痛的发生、发展有关.

目的 观察脊髓G蛋白耦联受体激酶2(GRK2)在大鼠持续性术后痛中的表达变化.方法 雄性SD大鼠40只,按随机数字表法将大鼠分为2组(n=20):假手术组和皮肤/肌肉切口和牵拉模型组(SMIR组);采用Flatters法制备大鼠SMIR模型;分别于术前1 d(To),术后3 d(T1)、7d(T2)、14 d(T3)、21 d(T4)用yon Frey细丝法测定机械缩足反应阈值(MWT);在相应时间点行为学测定后随机抽取4只大鼠处死,取L4～L6节段脊髓组织,Western blot法检测脊髓GRK2表达.结果 T1-4时,SMIR组MWT较To时明显下降,脊髓GRK2蛋白表达较To时明显下调(P均＜0.05);与假手术组比较,SMIR组在T1～4时MWT和脊髓GRK2蛋白表达较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 脊髓GRK2表达水平下调与大鼠SMIR持续性术后痛的发生、发展有关.

目的 探讨Rho鸟苷酸解离抑制因子2(RhoGDI2)对气道平滑肌细胞β2肾上腺素能受体(β2 AR)减敏的关系.方法 培养人气道平滑肌细胞,以RhoGDI2高表达质粒转染后,用Western blot法检测RhoGDI2的蛋白表达量,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞内腺苷-3',5'-环化一磷酸(cAMP)的含量,并探究两者关系.检测转染后细胞膜表面β2AR蛋白表达量随时间的变化,及转染后G蛋白耦联受体激酶2 (GRK2)、蛋白激酶A(PKA)磷酸化位点蛋白表达情况,再加入GRK2及PKA抑制剂后,用ELISA检测细胞内cAMP的变化.结果 RhoGDI2高表达组与阴性对照组及空白组相比,高表达组平滑肌细胞内cAMP含量降低,差异有统计学意义,转染后24 h、36h、48 h、60 h、72 h气道平滑肌细胞膜表面β2AR蛋白表达量随转染时间的延长呈下降趋势;RhoGDI2高表达组的β2 AR的355,356丝氨酸位点磷酸化水平高于345,346位丝氨酸位点磷酸化水平.RhoGDI2转染后加GRK2抑制剂组、RhoGDI2转染后加PKA抑制剂组与空白对照组相比,气道平滑肌细胞内cAMP含量降低,其中,RhoGDI2转染后加PKA抑制剂组与空白对照组相比差异有统计学意义,RhoGDI2转染后加GRK2抑制剂组与空白对照组相比差异无统计学意义.结论 ①RhoGDI2高表达可引起人气道平滑肌细胞β2AR的减敏.②RhoGDI2引起人气道平滑肌细胞膜表面β2AR的减敏是通过GRK2磷酸化β2AR起作用.

目的 探讨妊娠期糖尿病对子代大鼠肾脏多巴胺D1受体介导的尿钠排泄功能的影响.方法 将Sprague-Dawley(SD)孕鼠随机分为妊娠期对照组(10只)和妊娠期糖尿病组(10只),妊娠期糖尿病组大鼠在孕期第0天腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35 mg/kg),而妊娠期对照组大鼠给予注射等体积的0.9％生理盐水.子代大鼠出生后,分别从2组中按随机数字表法选取20只雄性大鼠进行实验.采用无创鼠尾测压仪从4周龄连续检测子代大鼠血压至16周;代谢笼收集16周龄子代大鼠24 h尿液;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测16周龄子代大鼠肾脏丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)活性;肾上腺动脉灌注多巴胺D1受体激动剂(Fenoldopam)测定其介导的尿钠排泄功能;进一步检测肾脏G蛋白耦联受体激酶4(GRK4)、多巴胺D1受体的表达及磷酸化水平.结果 12、14、16周龄妊娠期糖尿病子代大鼠血压明显高于妊娠期对照组子代大鼠[(134±4)比(123±4),(138±6)比(126±3),(141±5)比(124±5)mm Hg,均P＜0.05];糖尿病母鼠的子代24 h尿量及尿钠排泄率明显低于妊娠期对照组子代大鼠(P＜0.05);通过肾上腺动脉灌注Fenoldopam,其介导的排钠利尿作用(尿流速和尿钠排泄率)明显低于妊娠期对照组子代大鼠(P＜0.05).与妊娠期对照组子代大鼠比较,糖尿病母鼠的子代丙二醛水平明显升高,而SOD活性明显降低(P＜0.05).糖尿病母鼠的子代肾脏GRK4表达及多巴胺D1受体磷酸化水平显著高于妊娠期对照组子代大鼠(P＜0.05).结论 妊娠期糖尿病引起子代大鼠肾脏多巴胺D1受体功能受损,其机制可能与氧化应激水平升高,引起肾脏GRK4表达增加,导致肾脏多巴胺D1受体过度磷酸化有关,其可能是引起子代大鼠高血压发生的重要机制之一.

目的 前列腺癌(PCa)在我国的发病率逐年上升.G蛋白耦联受体C家族6组A亚型(GPRC6A)是近年来发现的PCa易感基因.文章探讨GPRC6A及其介导的细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在前列腺癌LncapC4-2细胞增殖与凋亡中的作用.方法 实验分为LncapC4-2 PCDH组(仅转染空载体pCDH)、LncapC4-2 GPRC6A组(仅转染pCDH-GPRC6A)和LncapC4-2 GPRC6A+U0126组(转染pCDH-GPRC6A并加入U0126处理),通过CCK8检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡改变以及Western blot方法检测细胞周期与凋亡相关蛋白的变化.结果 Western blot法结果表明,与LncapC4-2 PCDH组比较,LncapC4-2 GPRC6A组的GPRC6A和P-ERK表达增加(P＜0.05);与LncapC4-2 GPRC6A组比较,LncapC4-2 GPRC6A+U0126组的P-ERK的表达明显降低(P＜0.05).CCK8检测表明LncapC4-2 GPRC6A组相较LncapC4-2 PCDH组增殖加快(P＜0.05),而LncapC4-2 GPRC6A+U0126组相较LncapC4-2 GPRC6A组增殖明显减慢(P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示LncapC4-2 GPRC6A组的G1/(S+G2)值较LncapC4-2 PCDH组明显降低(P＜0.05);LncapC4-2 GPRC6A+U0126组的G1/(S+G2)值较LncapC4-2 GPRC6A组明显升高(P＜0.05).Western blot结果中LncapC4-2 GPRC6A组的CyclinD1蛋白表达(0.88±0.04)较LncapC4-2 PCDH组(0.66±0.02)明显升高(P＜0.05),而LncapC4-2 GPRC6A+U0126组的CyclinD1蛋白表达(0.71±0.02)较LncapC4-2 GPRC6A组明显降低(P＜0.05).流式细胞仪检测凋亡结果表明,LncapC4-2 GPRC6A组的凋亡比例(3.64％)较LncapC4-2 PCDH组(9.00％)和LncapC4-2 GPRC6A+U0126组(19.57％)明显降低(P＜0.05).同时Western blot检测结果表明,LncapC4-2 GPRC6A组的Bcl2的表达比LncapC4-2 PCDH组高,活化Caspase3的表达则降低(P＜0.05);LncapC4-2 GPRC6A+U0126组相对于LncapC4-2 GPRC6A组Bcl2的表达降低,活化Caspase3的表达则增高(P＜0.05).结论 GPRC6A可能通过ERK信号通路促进PCa细胞增殖,抑制细胞凋亡,而参与PCa的发展过程.