目的:评价脑室内注射胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)改善新生大鼠术后远期认知功能与海马蛋白激酶Mζ(PKMζ)和Kalirin表达的关系。方法:取出生后第7天的SD大鼠60只，雄雌不拘，采用随机数字表法为4组( n＝15)：对照组(C组)、GDNF组(G组)、手术组(S组)、手术＋GDNF组(S＋G组)。C组未接受麻醉、手术或药物治疗；G组脑室内注射重组大鼠GDNF 0.3 μg；S组和S＋G组在3%七氟烷麻醉下行右颈动脉暴露手术，S＋G组术后脑室内注射重组大鼠GDNF 0.3 μg。于出生后第33天开始，进行Barnes迷宫测试及恐惧条件测试。行为学测试后处死大鼠，取大脑，左半脑用于高尔基染色，观察树突形态和测量树突棘密度；右半脑提取海马蛋白，采用Western blot法检测PKMζ和Kalirin的表达。 结果:与C组比较，S组Barnes迷宫中识别目标盒所需时间延长，恐惧条件测试中环境相关冻结时间缩短，海马树突分支总长度、分支数量及与同心圆交点数量和树突棘密度减少，PKMζ和Kalirin表达下调( P<0.05)，G组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)。与S组比较，S＋G组识别目标盒所需时间缩短，环境相关冻结时间延长，海马树突分支总长度、分支数量及与同心圆交叉点数量和树突棘密度增加，PKMζ和Kalirin表达上调( P<0.05)。 结论:脑室内注射GDNF改善新生大鼠术后远期认知功能的机制可能与上调海马PKMζ和Kalirin的表达，促进树突和树突棘的发育有关。

目的:探讨突触后致密物-95(postsynaptic density-95，PSD-95)在七氟烷麻醉致新生大鼠远期学习记忆功能损害机制中的作用。方法:选择SPF级鼠龄7 d的SD大鼠54只，按照随机数字法分为3组：对照组(暴露于空气)、模型组(暴露于2.1%的七氟烷，4 h/d，连续3 d)、PSD-95抑制剂组(吸入七氟烷+腹腔注射NA-1，连续5 d)，每组18只。Morris水迷宫实验和新异物体识别实验检测各组大鼠的视空间学习记忆和识别记忆能力；RT-qPCR检测大鼠海马组织kalirin、Rac1和PSD-95的mRNA水平；Western blot检测大鼠海马组织kalirin、Rac1、PSD-95及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达；免疫组化检测海马组织kalirin和Rac1的表达水平。采用SPSS 23 .0软件对数据进行统计分析，采用重复测量方差分析、单因素方差分析进行组间比较。结果:重复测量方差分析显示，在水迷宫实验中三组大鼠寻找平台潜伏期、游泳距离的组间和时间交互作用显著，均差异有统计学意义( F时间×组别＝36.539，41.548；均 P<0.01)。简单效应分析显示，模型组中第2~6天的平台潜伏期及游泳距离均长于对照组(第2~6天平台潜伏期： t＝14.039，17.147，13.155，13.831，27.247，均 P<0.01；第2~6天游泳距离： t＝10.122，20.987，7.267，10.011，8.121，均 P<0.01)。与模型组比较，PSD-95抑制剂组大鼠在2~6 d的平台潜伏期延长( t＝7.948，14.768，11.582，12.832，24.346；均 P<0.01)，游泳距离增加( t＝8.235，24.325，11.234，12.031，7.036；均 P<0.01)。新物体识别实验发现，模型组中的新物体探索时间显著长于对照组[(21.30±2.27)s，(19.21±1.42)s， t＝1.843， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的新物体探索时间[(26.83±2.13)s]明显长于模型组( t＝4.844， P<0.01)。模型组中的新异物体差异指数显著低于对照组[(0.41±0.12)，(0.59±0.10)， t＝3.416， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的新异物体差异指数[(0.37±0.08)]明显低于模型组( t＝0.696， P<0.05)。qRT-PCR结果发现，模型组中的Rac1、kalirin和PSD-95 mRNA表达均低于对照组( t＝9.969，3.954，6.561；均 P<0.05); PSD-95抑制剂组的Rac1、kalirin和PSD-95 mRNA表达均低于模型组( t＝2.132，2.251，3.502，均 P<0.05)。免疫组化结果显示，模型组大鼠海马CA1区的kalirin和Rac1均低于对照组[kalirin：(8.18±1.94)，(15.47±3.35)， t＝11.47， P<0.01；Rac1：(3.72±1.53)，( 8.17±2.91)， t＝6.76， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的kalirin(4.98±1.53)和Rac1(2.73±0.37)均低于模型组[kalirin： t＝10.28， P<0.01；Rac1： t＝4.72， P<0.05]。Western blot检测发现，模型组中的Caspase-3和Bax蛋白水平均明显高于对照组[Caspase-3：(1.37±0.16)，(0.54±0.01)， t＝5.71， P<0.01；Bax：(1.87±0.31)，(1.23±0.25)， t＝12.01， P<0.01]; PSD-95抑制剂组中的Caspase-3[(1.79±0.17)]和Bax[(2.19±0.21)]蛋白水平明显高于模型组( t＝9.87，16.19，均 P<0.01)；模型组中的Bcl-2蛋白水平明显低于对照组[(1.22±0.21)，(1.96±0.38)， t＝11.92， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的Bcl-2蛋白水平明显低于模型组[(1.01±0.19)， t＝10.73， P<0.01)]。 结论:七氟烷麻醉可致新生大鼠远期学习记忆功能损害和PSD95蛋白表达降低，抑制PSD95的表达可加重这种损害，这可能与PSD95参与的神经元突触可塑性和神经凋亡相关。

目的:评价七氟烷麻醉诱发新生大鼠远期学习记忆能力障碍与突触后致密蛋白95(PSD-95)/Kalirin-7/Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物1(Rac1)信号通路的关系。方法:SPF级雄性Wistar大鼠60只，7日龄，体重12~18 g，采用随机数字表法为分为5组( n＝12)：对照组(C组)、1%七氟烷麻醉2 h组(S 1组)、1%七氟烷麻醉4 h组(S 2组)、2%七氟烷麻醉2 h组(S 3组)和2%七氟烷麻醉4 h组(S 4组)。麻醉后第4、8和12周行Morris水迷宫实验。末次Morris水迷宫实验完成后，处死大鼠，取海马组织，HE染色观察病理学结果，TUNEL染色计算神经元凋亡率，分别采用Western blot法和qRT-PCR法检测PSD-95、Kalirin-7和Rac1及其mRNA的表达。 结果:与C组比较，麻醉后第4、8和12周S 1组、S 2组、S 3组、S 4组逃避潜伏期延长，穿越原平台次数减少，目标象限停留时间缩短，海马神经元凋亡率升高，磷酸化Rac1/Rac1比值降低，PSD-95、Kalirin-7及其mRNA表达下调( P<0.05)；与S 4组比较，S 1组、S 2组、S 3组逃避潜伏期缩短，穿越原平台次数增多，目标象限停留时间延长，海马神经元凋亡率降低，磷酸化Rac1/Rac1比值升高，PSD-95和Kalirin-7及其mRNA表达上调( P<0.05)，海马组织病理改变程度减轻。 结论:七氟烷麻醉诱导新生大鼠远期学习记忆能力障碍的机制可能与抑制海马PSD-95/Kalirin-7/Rac1信号通路活性有关。

·综 述·Kalirin 是 ALAM 等[1]最先于 1996 年发现的,是 Rho鸟嘌呤核苷酸交换因子(Guanine nucleotide exchange factor, GEF)的一个亚类,在中枢神经系统广泛表达[1],研究发现Kalirin 在调节神经元轴突生长、树突棘密度的维持、突触形态的稳定和可塑性等方面有重要的作用[2],但其调节机制尚不清楚,研究显示 Kalirin 可能通过调节小 G 蛋白Rho-GTP 酶的活性来调节细胞的自噬和凋亡活动[3-4].近年来由于Kalirin 在神经保护方面具有重要的功能而受到研究者们的广泛关注,研究发现Kalirin在缺血性脑卒中、亨廷顿病、阿尔茨海默病、癫痫和抑郁症等疾病中发挥一定的作用,可能是这些疾病的潜在治疗靶点,但其机制尚

癫痫在神经系统疾病中很常见,其发病机制与兴奋性和抑制性神经递质功能紊乱、异常突触发生密切相关.Kalirin-7是Dbl癌基因家族Kalirin的主要同种型,受多种因子调节,在多个促进树突棘形成和突触发生的分子通路中起重要的介导作用,与突触发生密切相关.本综述通过对癫痫发生机制的简要介绍,以及Kalirin-7促进树突棘形成和突触发生发展的分析,为迸一步研究癫痫的发生机制提供新的潜在依据和思路.

目的 探讨突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)/Kalirin-7/Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物1 (ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)信号通路对不同浓度七氟烷吸入麻醉大鼠胃癌根治术后神经功能的影响.方法 Wistar大鼠52只,随机选取9只为正常组,其余43只制备胃癌模型并将存活的40只随机分为模型组和七氟烷低、中、高浓度组各10只.七氟烷低、中、高浓度组分别吸入体积分数1％、3％、5％七氟烷麻醉后行胃癌根治术,正常组和模型组不行手术.比较5组术后谵妄情况、Bederson神经功能评分、海马组织病理变化情况、海马组织PSD-95、Kalirin-7蛋白相对表达量和磷酸化Rac1(phosphorylated-Rac1,p-Rac1)/Rac1.结果 大鼠周边运动格数和中央跨格次数随七氟烷浓度增高而增加(P＜0.05),中央停留时间随七氟烷浓度增加而延长(P＜0.05),且不同浓度七氟烷组均大于模型组和正常组(P＜0.05).术后1、3、5d,七氟烷高浓度组Bederson神经功能评分[(2.15±0.31)、(2.85±0.31)、(3.24±0.32)分]均高于七氟烷中浓度组[(1.64±0.17)、(2.26±0.23)、(2.70±0.28)分]和七氟烷低浓度组[(1.02±0.13)、(1.57±0.16)、(2.03±0.21)分](P＜0.05),七氟烷中浓度组高于七氟烷低浓度组(P＜0.05);随术后时间延长,七氟烷低、中、高浓度组Bederson神经功能评分均逐渐升高,不同时间点比较差异均有统计学意义(P＜0.05).HE染色结果显示,正常组与模型组神经元排列整齐,大部分神经元形态、结构正常;七氟烷低、中、高浓度组海马神经元排列紊乱,部分神经元胞体变小,有较多神经元发生不同程度固缩与深染,随七氟烷浓度增高改变更为明显.PSD-95蛋白、Ka[irin-7蛋白相对表达量,p-Rac1/Rac1随七氟烷浓度增加而降低(P＜0.05),均低于模型组和对照组(P＜0.05).结论 七氟烷可导致大鼠胃癌根治术后谵妄及神经功能障碍,且呈剂量依赖性,其作用机制可能与抑制PSD-95 /Kalirin-7 /Rac1信号通路有关.

目的:探究褪黑素通过改善神经元树突棘可塑性在瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏机制中的作用.方法:30只8～10周龄的SD大鼠(175～200g),根据研究目的随机分为三组:对照组((大鼠足底进行切口手术,生理盐水处理,n=10),模型组(大鼠足底进行切口手术,静脉滴注瑞芬太尼,n=10),治疗组(在模型组的基础上行褪黑素处理,n=10).通过机械诱发痛和热缩足检测不同组处理后2h、2d、3d和7d大鼠的爪缩回阈值,通过RT-qPCR分析大鼠中IL-1、TNF-α和IL-1β的mRNA表达,通过蛋白印迹检测大鼠体内AMPA和Kalirin-7的蛋白表达,通过观察组织切片比较不同组大鼠的脊柱密度和长度,通过低感光电荷耦合设备的摄像头监视器分析单个神经元的电生理.结果:在第2h、2d、3d和7d的测试中,相比于对照组,模型组痛缩足阈降低(P＜0.05),热缩足潜伏时间缩短(P＜0.05),IL-1、TNF-α、Ⅱ-13的mRNA表达、AMPA和Kalirin-7的蛋白表达均升高(P＜0.05),脊柱密度、脊柱长度升高(P＜0.05),电流幅度升高(P＜0.05),电流间隔降低(P＜0.05).治疗组较模型组的痛缩足阈升高(P＜0.05),热缩足潜伏时间延长(P＜0.05),IL-1、TNF-α和IL-1β的mRNA表达、AMPA和Kalirin-7的蛋白表达均降低(P＜0.05),脊柱密度、脊柱长度降低(P＜0.05),电流幅度降低(P＜0.05),电流间隔升高(P＜0.05).结论:褪黑素通过抑制AMPA和Kalirin-7的蛋白表达改善神经元树突棘可塑性,从而降低瑞芬太尼诱发的大鼠痛觉过敏.