目的:研究转录因子Krüpple样因子5(Krüpple-like factor 5,KLF5)在人牙髓-牙本质复合体中的表达,探讨其在成牙本质细胞分化及牙本质形成过程中的作用.方法:应用免疫组织化学方法检测KLF5在人牙髓-牙本质复合体中及牙髓细胞矿化诱导过程中的表达,Western印迹法检测KLF5在成牙本质细胞分化过程中的表达变化.采用SPSS17.0软件包对实验结果进行单因素方差分析和Tukey检验.结果:在正常及龋坏牙中,KLF5表达于人成牙本质细胞和成牙本质样细胞,而在牙本质及前期牙本质中无表达.细胞免疫组织化学结果显示,在矿化诱导0、7、14d的人牙髓细胞中,KLF5在细胞核中呈强阳性表达.Western印迹结果显示,随着矿化诱导时间的延长,KLF5蛋白表达量逐渐增加.诱导14～21 d时,KLF5表达量增加最显著.结论:KLF5可能参与成牙本质细胞分化及牙本质的形成过程.

目的 探讨转录因子Krüpple样因子7(KLF7)对新生大鼠海马神经元缺血再灌注损伤的影响.方法 取新生Sprauge-Dawley大鼠海马组织制备海马神经元单细胞悬液,按每孔1×106个细胞接种于聚赖氨酸包被6孔细胞培养板,细胞贴壁继续培养7d后分为正常组、氧糖剥夺/复氧(OGD/R)组和OGD/R+ KLF7组.正常组培养7d的原代大鼠海马神经元按每孔1×106个细胞于含胎牛血清的DMEM/F12培养基中进行培养,置于含体积分数5％CO2的培养箱中37℃下培养3d;OGD/R组培养7d的原代大鼠海马神经元用磷酸盐缓冲液洗3次,用移液器将原培养液置换为无糖平衡盐溶液,置于三气缺氧细胞培养箱(体积分数1％O2、94％ N2、5％ CO2)中37℃下培养4h,然后应用4.5 g·L-1葡萄糖培养基代替无糖平衡盐溶液,置于含体积分数5％ CO2的常温培养箱中培养24 h;OGD/R+KLF7组培养成功的OGD/R模型细胞加入Lenti-KLF7慢病毒进行转染,置于含体积分数5％ CO2的培养箱中37℃下孵育3d.应用倒置相差显微镜观察各组海马神经元的生长状态,实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中KLF7、NGF、Caspase-3、Bcl-2和Bax mRNA表达,细胞计数试剂盒检测各组细胞活性,Hoechst33342/磺化丙啶双染法检测各组细胞凋亡情况.结果 3组细胞中KLF7、NGF、Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA相对表达量比较差异均有统计学意义(F=237.702、24.031、476.505、112.900、89.467,P＜0.05);OGD/R组和OGD/R+KLF7组细胞中KLF7、NGF、Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA相对表达量显著高于正常组(P＜0.05);OGD/R+ KLF7组细胞中KLF7、NGF和Bcl-2mRNA相对表达量显著高于OGD/R组(P＜0.05),Caspase-3和Bax mRNA相对表达量显著低于OGD/R组(P＜0.05).正常组、OGD/R组和OGD/R+KLF7组细胞活性分别为1.080±0.090、0.499±0.049和0.727±0.115,3组细胞活性比较差异有统计学意义(F=42.710,P＜0.05);OGD/R组和OGD/R+KLF7组细胞活性显著低于正常组(P＜0.05),OGD/R+ KLF7组细胞活性显著高于OGD/R组(P＜0.05).正常组、OGD/R组、OGD/R+KLF7组细胞凋亡率分别为(40.6±6.3)％、(76.7±4.3)％和(58.5±4.4)％,3组细胞凋亡率比较差异有统计学意义(F=36.822,P＜O.05);OGD/R组和OGD/R+KLF7组细胞凋亡率显著高于正常组(P＜0.05),OGD/R+KLF7组细胞凋亡率显著低于OGD/R组(P＜0.05).结论 KLF7对OGD/R诱导的海马神经元缺血再灌注细胞损伤具有保护作用,其机制可能与介导NGF表达,进而调控Caspase-3、Bcl-2和Bax细胞凋亡信号通路有关.

目的 检测未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p、Krüpple样因子5(KLF5)表达并探讨其临床意义.方法 2017年9月～2020年5月本院收治的未破裂颅内动脉瘤病人(观察组)143例,同期体检健康者150例(对照组)作为对照.检测血清miR-448-3p、KLF5 mRNA表达水平及血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;比较两组血清miR-448-3p、KLF5 mRNA水平;Pearson法分析未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p、KLF5 mRNA水平与血清IL-6、TNF-α水平,及血清miR-448-3p与血清KLF5 mRNA水平的相关性;ROC曲线分析血清miR-448-3p、KLF5 mRNA表达水平对未破裂颅内动脉瘤的诊断价值.结果 与对照组相比,观察组未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平显著降低,KLF5 mRNA、IL-6、TNF-α水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与瘤数目=1个比较,瘤数目≥2个的未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平显著降低,KLF5 mRNA水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与瘤直径<7 mm相比,瘤直径≥7 mm的未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平显著降低,KLF5 mRNA水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平与血清KLF5 mRNA、IL-6、TNF-α水平均呈负相关(r=-0.429、-0.442、-0.471,P<0.05),血清KLF5 mRNA水平与血清IL-6、TNF-α水平均呈正相关(r=0.454、0.523,P<0.05);血清miR-448-3p、KLF5 mRNA表达水平诊断未破裂颅内动脉瘤的ROC曲线下面积分别为0.978、0.995,敏感度分别为93.7％、95.8％,特异性分别为90.7％、98.7％.结论 未破裂颅内动脉瘤病人血清miR-448-3p水平降低,KLF5水平升高,两者水平与病人瘤数目、瘤直径、炎症水平关系密切,可能共同参与动脉瘤进展.