目的:建立应用荧光原位杂交技术（FISH）筛查成人Ph样急性淋巴细胞白血病（ALL）的体系。方法:根据Ph样ALL的遗传学特征，设计了针对ABL1、ABL2、JAK2、EPOR、CRLF2、CSF1R、PDGFRB、P2RY8等基因断裂重排的FISH探针；对BCR-ABL1、ETV6-RUNX1、MLL基因断裂重排和E2A断裂重排均阴性的B-ALL，采用FISH进行Ph样ALL筛查，并结合流式免疫表型、靶向二代测序突变检测和RNA测序进行Ph样ALL诊断分析。结果:2016年1月至2019年4月，南方医院血液科收治189例成人B-ALL，经FISH和（或）PCR检测，BCR-ABL1、ETV6-RUNX1、MLL断裂重排或E2A断裂重排阳性者共83例；其余106例患者接受Ph样ALL FISH探针筛查，其中，12例（11.3％）检出典型的Ph样ALL特异基因断裂重排，2例检出基因缺失。经RNA测序进一步验证，FISH检测Ph样ALL基因断裂重排结果灵敏度为71.4％，特异度为95.8％。综合免疫表型、靶向二代测序突变检测和RNA测序，共诊断融合基因阳性Ph样ALL 14例（13.2％）。结论:FISH技术检测Ph样ALL具有较高的特异性，结合免疫表型和测序技术可完善诊断体系。

目的:分析初诊急性淋巴细胞白血病（ALL）患者融合基因的表达情况，进一步探讨融合基因阳性患者的实验室检查特点。方法:回顾性分析2016年9月至2020年12月天津见康华美医学诊断中心1 994例初诊ALL患者的融合基因筛查结果，同时对表达不同融合基因患者的基因突变筛查结果、免疫表型特点及染色体核型结果进行系统分析。结果:（1）1 994例ALL患者，中位年龄为12岁（15 d至89岁）。44.3%（884/1 994）的ALL患者检测到15种不同的融合基因，其表达呈现典型的“幂律分布”。（2）急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者融合基因的阳性率显著高于急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者（48.48%∶18.71%），B-ALL和T-ALL的融合基因分布具有重现性的特点，交叉少见。（3）融合基因的表达高峰分别出现在<1岁、3~5岁和35~44岁；儿童患者融合基因的种类明显多于成人；MLL-FG、TEL-AML1及BCR-ABL1分别是婴儿、儿童和成人患者最常见的融合基因。（4）融合基因阳性ALL患者以伴随信号通路相关基因突变为主，其中以NRAS和KRAS突变率最高；携带不同融合基因的B-ALL患者早期标记和B系标记表达有差异；BCR-ABL1阳性患者复杂核型检出率明显高于其他融合基因阳性患者。结论:不同年龄及类型的ALL患者，其融合基因的表达特点明显不同；携带不同融合基因的ALL患者，突变基因、免疫表型及染色体核型特点也存在差异。

目的:分析儿童混合表型急性白血病(MPAL)的临床特点、治疗及预后，为临床优化诊疗方案及提高缓解率提供参考。方法:基于2016年世界卫生组织(WHO)的诊断标准，回顾性分析2012年1月至2020年12月苏州大学附属儿童医院收治的15例MPAL患儿的骨髓细胞形态、免疫分型、细胞遗传学、分子生物学特征以及治疗方案、预后等病例资料。计数数据组间比较采用 χ2检验，符合正态分布的计量资料组间比较采用 t检验，非正态分布的计量资料组间比较采用秩和检验。采用 Kaplan- Meier( K- M)法估计生存率，比较应用 Log- rank法。 结果:苏州大学附属儿童医院8年共收治15例MPAL患儿，男8例，女7例，中位年龄为6.8岁；9例患儿表达B淋系+髓系表型，5例表达T淋系+髓系表型，1例表达B淋系+T淋系表型；11例患儿进行了染色体核型检查，2例为正常核型，2例为复杂核型，6例为假二倍体，1例为亚二倍体；5例患儿检测到融合基因，其中3例 AML- ETO阳性，1例 BCR- ABL阳性，1例 MLL阳性；13例患儿在化疗后完全缓解，总完全缓解率为86.6%，2年总生存率为(68.2±13.4)%。15例患儿中14例授受了诱导化疗，1例因个人原因放弃了治疗。首选急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗方案10例，第1个疗程完全缓解1例，总完全缓解率10%；首选急性髓系白血病(AML)化疗方案4例，第1个疗程完全缓解3例，总完全缓解率75%，未缓解的1例更换ALL方案后缓解；8例行造血干细胞移植(HSCT)和6例未行HSCT组2年总生存率分别为(70.0±18.2)%、(66.7±19.2)%，差异无统计学意义( χ2＝0.318， P＝0.573)。 结论:儿童MPAL是一种罕见的恶性肿瘤，以淋系和髓系抗原共表达为主，单纯化疗或HSCT在短期内均可获得较好的预后，但长期疗效还有待进一步观察。

目的:分析混合表型急性白血病（MPAL）的临床特征及疗效预后。方法:回顾性分析2005年1月1日至2019年12月1日就诊于中国医学科学院血液病医院儿童血液病诊疗中心的29例MPAL患儿，分析其形态学、免疫表型、细胞遗传学、分子生物学特点、诱导化疗以及预后情况。应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，单因素分析应用Log-Rank法。结果:（1）29例MPAL患儿中1例为MPAL伴KMT2A重排，1例为MPAL伴BCR-ABL1，13例为MPAL伴B-M，12例为MPAL伴T-M, 2例为急性未分化细胞白血病。（2）免疫表型阳性率较高的是CD33 23例（79%)，CD34 25例（86%)，HLA-DR 20例（69%)。表达CD19的共17例，阳性率59%。（3）8例患儿检测到异常融合基因，其中MLL-AF4基因1例，BCR-ABL1基因1例，TEL-AML1基因3例，WT1 2例，FLT3-ITD 阳性1例。（4）27例获得染色体核型，14例为异常核型，其中10例为复杂核型。（5）接受化疗的27例患儿中完全缓解（CR）率为85%（23/27），5年无病生存率（DFS)为（71±10）%，5年总生存率（OS)为（74±10）%。14例应用急性淋巴细胞白血病（ALL）方案者中13例CR；12例应用联合方案者中10例CR；二者5年OS分别为（77±15） %和（80±13）%，差异无统计学意义（χ2=0.027， P=0.870）。 结论:MPAL是一种罕见的儿童白血病，易见复杂染色体核型，ALL方案及混合方案诱导缓解化疗可获得较好的预后。

目的:分析嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗复发/难治急性B淋巴细胞白血病（R/R B-ALL）获完全缓解（CR）患者的长期生存及其影响因素。方法:收集2015年5月至2018年7月就诊于陕西省人民医院接受靶向CD19的CAR-T细胞治疗并获得CR的R/R B-ALL患者的临床信息。采用Kaplan-Meier法评估患者的总生存（OS）和无白血病生存（LFS），并通过Cox等比例风险回归分析CAR-T治疗后患者预后的影响因素。结果:纳入的38例R/R B-ALL患者中，男性患者21例，中位年龄25（6~59）岁，中位OS时间为18（95% CI 3~33）个月。多因素Cox回归分析显示：MLL-AF4融合基因阳性是OS及LFS的独立危险因素（OS： HR＝4.888，95% CI 1.375~17.374， P＝0.014；LFS： HR＝6.683，95% CI 1.815~24.608， P＝0.004）；接受维持治疗是OS及LFS的独立保护因素（OS： HR＝0.153，95% CI 0.054~0.432， P<0.001；LFS： HR＝0.138，95% CI 0.050~0.382， P<0.001）；MRD转阴患者LFS获益（ HR＝0.209，95% CI 0.055~0.797， P＝0.022），但OS差异无统计学意义（ P＝0.111）；具有高肿瘤负荷的患者在0.1的水平上是OS及LFS的危险因素（OS： HR＝2.662，95% CI 0.987~7.184， P＝0.053；LFS： HR＝2.452，95% CI 0.949~6.339， P＝0.064）。 结论:高肿瘤负荷和高危遗传学可能会影响R/R B-ALL患者接受CAR-T治疗后的长期生存，予以来那度胺为基础的维持治疗有可能改善患者的长期预后。

目的:分析初诊急性髓系白血病（AML）患者融合基因表达情况，进一步探讨不同融合基因家族患者的免疫表型及基因突变的特点。方法:回顾性分析2016至2020年4192例初诊AML患者的多重融合基因筛查结果，并结合免疫表型分析以及高通量测序所获得的基因突变筛查结果，系统地进行差异性分析。结果:①4192例AML患者中1948例(46.47%)检出融合基因，共检出29种不同的融合基因，其阳性率呈现为"幂律分布"。②随着AML患者年龄增长，融合基因的阳性率先上升而后逐步下降。儿童患者融合基因总阳性率及MLL相关融合基因（MLL-FG）阳性率均显著高于成人患者（69.18%对44.76%，15.35%对8.36%）。③MLL-FG及NUP98相关融合基因（NUP98-FG）阳性患者伴随的基因突变均以FLT3及RAS信号通路相关基因为主。④MLL-FG及NUP98-FG阳性患者未见特异性的免疫表型特点。结论:采用多重PCR方法分析，近半数的AML患者伴有特异的融合基因表达，儿童和成人患者融合基因阳性类型构成比例存在差异。不同融合基因阳性AML患者常见的分子突变、免疫表型有一定规律。

目的:探讨靶向捕获高深度测序（Panel-seq）及转录组测序（RNA-seq）与传统检测方法在儿童初发急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞及分子遗传学分型中的差异及意义。方法:回顾性分析2020年9月至2021年12月在广州市妇女儿童医疗中心新诊断为B-ALL的152例患儿临床资料。患儿除接受包括核型分析、荧光原位杂交以及43种融合基因定量筛查的传统细胞及分子遗传学方法检测外，还进行Panel-seq及RNA-seq检测。Panel-seq覆盖血液系统肿瘤常见变异的600多个基因，同时分析融合基因及基因突变；RNA-seq分析融合基因、基因突变及基因表达情况，推测染色体水平的拷贝数变异，并结合基因表达谱聚类和拷贝数变异预测高二倍体亚型。分析比较各检测方法遗传学分型结果。结果:152例患儿中，男性93例，女性59例，中位年龄4.0岁（0.8~13.0岁），中位原始细胞比例0.855（0.215~0.965）。152例患儿中，传统检测方法鉴定出4例（2.6%）BCR-ABL1、2例（1.3%）CRLF2基因相关融合、27例（17.8%）ETV6-RUNX1、1例（0.7%）iAMP21、5例（3.3%）MLL重排、8例（5.3%）TCF3-PBX1以及22例（14.5%）高二倍体核型；Panel-seq鉴定出4例（2.6%）BCR-ABL1、2例（1.3%）CRLF2基因相关融合、27例（17.8%）ETV6-RUNX1、3例（2.0%）MEF2D基因相关融合、1例（0.7%）MEIS1-FOXO1、5例（3.3%）MLL重排、5例（3.3%）PAX5基因相关融合、8例（5.3%）TCF3-PBX1、4例（2.6%）ZNF384基因相关融合和2例（1.3%）IKZF1 N159Y突变。1例MLL重排患儿因样本质量问题未进行RNA-seq检测，其余151例患儿中，共检出1例（0.7%）ACIN1-NUTM1、4例（2.6%）BCR-ABL1、3例（2.0%）CRLF2基因相关融合、8例（5.3%）DUX4基因相关融合、27例（17.9%）ETV6-RUNX1、3例（2.0%）MEF2D基因相关融合、1例（0.7%）MEIS1-FOXO1、4例（2.6%）MLL重排、5例（3.3%）PAX5基因相关融合、1例（0.7%）ZMIZ1-ABL1、8例（5.3%）TCF3-PBX1、4例（2.6%）ZNF384基因相关融合及61例（40.4%）高二倍体亚型和2例（1.3%）IKZF1 N159Y突变；RNA-seq对融合基因及高二倍体核型检出有明显优势。传统方法、Panel-seq和RNA-seq检测的细胞及分子遗传学分型率分别为45.4%（69/152）、40.1%（61/152）和87.4%（132/151），三者结合可对89.5%（136/152）患儿进行分型。结论:联合应用Panel-seq、RNA-seq技术可提高B-ALL患儿遗传学异常的检出率，从而进行更精确的细胞及分子遗传学分型，为指导治疗及判断预后提供依据。

目的:探讨先天性白血病的诊疗方法及影响其预后的主要因素。方法:回顾性收集整理郑州儿童医院2007年7月至2017年12月收治的先天性白血病患儿的临床资料，分析其临床特点、化疗方案及影响其长期生存的因素。结果:共收治先天性白血病患儿23例，多以"白细胞增高、皮肤结节、皮肤出血"就诊。其中放弃治疗10例，经随访无一例存活。治疗13例，男7例，女6例，其中有1例为双胎之一。急性髓细胞白血病8例，急性淋巴细胞白血病5例；融合基因检测，1例未做，2例 MLL基因阳性，10例 MLL基因阴性，未检测出其他融合基因；染色体核型分析1例为21-三体，12例染色体核型正常。13例患儿均接受了对症和/或减量化疗。中位随访时间4年11个月，其中痊愈6例，死亡7例。1例为出生6 d时外院确诊急性淋巴细胞白血病未予及时治疗，于32 d时全身多发包块就诊，检查后确诊并发中枢白血病及睾丸白血病，予较强化疗后合并肺部、脑内重症感染，经美国卢里芝加哥儿童医院远程会诊因感染较重未能挽回生命，余6例患儿均在治疗过程中出现重症感染并多脏器损伤死亡，无一例死于白血病复发。 结论:减量化疗可能是先天性白血病患儿获益的重要方法。

目的:提高对治疗相关急性髓系白血病（AML）的认识。方法:回顾性分析烟台毓璜顶医院收治的1例横纹肌肉瘤治疗后继发AML伴染色体核型rob（13；22）（q10；q10）患儿的临床资料，并进行文献复习。结果:该例女性患儿6岁5个月，在2018年1月诊断为横纹肌肉瘤，接受规范化疗30个月后确诊为治疗相关AML，染色体核型45，XX，t（11；19）（q23；q13），rob（13；22）（q10；q10），融合基因MLL-ELL阳性。接受DA（阿糖胞苷+柔红霉素）方案化疗后无明显改善，家属放弃治疗，患儿死亡。结论:治疗相关AML多与应用鬼臼毒素类（依托泊苷等）药物化疗、联合放疗等因素有关。具有高危细胞遗传学因素的治疗相关AML预后差。

目的:分析儿童初发急性淋巴细胞白血病(ALL)分子细胞遗传学异常及其与临床特征的关系。方法:以2009年1月至2018年12月上海市儿童医院血液科确诊的初发ALL患儿403例为研究对象，完善骨髓涂片细胞学、免疫分型、染色体核型分析、荧光原位杂交(FISH)等。结果:1．403例患儿中，男240例(59.6%)，女163例(40.4%)；年龄(5.31±3.46)岁；急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)374例(92.8%)，急性T淋巴细胞白血病(T-ALL) 29例(7.2%)。2.细胞遗传学：染色体核型分析有分裂相者311例(77.2%)，异常者126例，异常检出率40.5%，其中高超二倍体和超二倍体占15.4%(48/311例)。3.融合基因：融合基因阳性者110例(27.3%)，其中 TEL/ AML1 70例(17.4%)、 BCR/ ABL 13例(3.2%)、 MLL 19例(4.7%)，2015年至2018年检出 PBX1/TCF3 8例(4.0%)， EBF1-PDGFRB 1例(0.5%)， SIL/ TAL1 6例，占T-ALL的33.3%(6/18例)，提高了T-ALL分子异常检出率； BCR/ ABL阳性患儿年龄大于 MLL、 TEL/ AML1阳性患儿[(8.01±3.11)岁比(3.89±1.84)岁、(1.56±1.25)岁， P<0.001]； PBX1/TCF3阳性患儿年龄[(6.58±4.83)岁]大于 TEL/AML1、MLL阳性患儿(均 P<0.05)； MLL阳性患儿年龄小于 TEL/AML1阳性患儿[(1.56±1.25)岁比(3.89±1.84)岁， P＝0.001]； MLL阳性患儿初发时的白细胞数高于 TEL/AML1、BCR/ABL阳性患儿[(76.97±19.87)×10 9/L比(16.94±2.28)×10 9/L、(20.53±6.49)×10 9/L， P<0.05]； PBX1/TCF3阳性患儿初发时的白细胞数高于 TEL/AML1阳性患儿[(85.75±30.32)×10 9/L比(16.94±2.28)×10 9/L， P＝0.002]； MLL阳性患儿免疫分型以早前B-ALL为主(14/19例)， TEL/AML1阳性、 BCR/ ABL阳性患儿均以普通B-ALL为主(57/70例、11/15例)。4.染色体核型分析、FISH、PCR3种方法对初发ALL患儿分子遗传学异常检出率分别为40.5%(126/403例)、69.2%(279/403例)、29.7%(60/202例)，差异有统计学意义( P<0.001)；染色体核型分析与PCR异常检测率差异无统计学意义( P＝0.71)。5.不同性别及年龄组分子细胞遗传学异常检出率差异均无统计学意义( P＝0.651、0.721)，而初发时的白细胞数≥50×10 9/L组与<50×10 9/L组异常检出率比较差异有统计学意义(37/51例比107/352例， P<0.001)，B-ALL遗传学异常检出率高于T-ALL(275/374例比14/29例， P＝0.005)。 结论:儿童ALL染色体核型以超二倍体比例较高；融合基因分布与年龄、初发白细胞数和免疫分型有关；3种检测方法互相补充大大提高了遗传学异常检出率；T-ALL遗传学异常检出率低，可能需要新的检测方法。