目的:探究高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae, hvKP)通过激活NLRP3炎症小体引发肝脓肿。 方法:C57BL/6小鼠腹腔分别注射对数期的K1型hvKP(K1-hvKP)和K35型肺炎克雷伯菌(K35-非hvKP)悬液构建小鼠肝脓肿模型。流式细胞术检测CD45 +和Gr-1 +免疫磁珠分选的人外周血中性粒细胞纯度。总糖试剂盒检测K1-hvKP和K35-非hvKP荚膜多糖含量。实时荧光定量RT-PCR和ELISA分别检测K1-hvKP和K35-非hvKP对人血中性粒细胞IL-18与IL-33的mRNA和蛋白质表达水平的影响。Western blot检测K1-hvKP和K35-非hvKP对人血中性粒细胞NLRP3炎症小体活化的影响。激光共聚焦显微镜观察K1-hvKP和K35-非hvKP对人血中性粒细胞NETosis形成的影响。 结果:与K35-非hvKP比较，K1-hvKP感染C57BL/6小鼠后产生明显的肝脓肿。分离的人外周血中性粒细胞纯度>95%。K1-hvKP的荚膜多糖含量显著高于K35-非hvKP。与K35-非hvKP比较，K1-hvKP显著促进人血中性粒细胞IL-18和IL-33的表达、NLRP3炎症小体活化和NETosis的形成。结论:hvKP通过激活NLRP3炎症小体促进人血中性粒细胞NETosis形成而引发肝脓肿。

SLE是一种多系统自身免疫病，其患者的外周血单核细胞制备物中富集有低密度粒细胞（LDGs）。LDGs是一种特殊的中性粒细胞亚群，其表型与功能都与中性粒细胞存在差异，但二者均可形成中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）并发生自身死亡，即NETosis。LDGs和异常的NETosis通过增加Ⅰ型IFN合成、激活补体系统、产生炎性细胞因子等导致SLE患者多器官功能障碍。靶向LDGs与NETosis的药物有望为SLE的临床治疗提供新的前景。

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)是一种由中性粒细胞释放的网状纤维结构，是机体固有免疫的一部分，其形成过程称为NETosis。近年研究发现NETs是一把双刃剑。在正常条件下，NETs的产生可以发挥清除病原体等作用，维持机体内稳态，但是在过量产生或清除不及时的情况下，NETs可以参与多种疾病的发病过程。本文针对NETs的生成和NETosis的发生机制，以及其在不同疾病中参与多种细胞因子分泌的作用进行综述。

急性肺损伤（acute lung injury, ALI）/急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome, ARDS）是一种危及生命的肺部疾病，其临床特征为严重的低氧血症和呼吸困难。程序性细胞死亡方式在ALI/ARDS发病机制中的研究日益成为热点。程序性细胞死亡是由基因决定的细胞主动死亡方式，除常见的凋亡、焦亡等方式外，近年来铁死亡、坏死性凋亡、NETosis等方式逐一被发现。文章通过介绍铁死亡、坏死性凋亡、NETosis等方式在ALI/ARDS中的研究进展，总结不同程序性细胞死亡方式在不同ALI模型中的调控机制，为靶向治疗ALI/ARDS提供更多理论依据。

脑缺血再灌注损伤是脑损伤的主要形式之一，包括兴奋性氨基酸增多、氧化应激、炎症反应以及钙超载等病理生理机制，主要涉及细胞凋亡、坏死性凋亡和细胞焦亡三大经典细胞死亡方式 [1]。目前为止，脑缺血再灌注损伤的病理生理机制仍未完全明确。近年来，诸多新型细胞死亡方式出现在人们的视野中，例如：自噬依赖性细胞死亡(autophagy-dependent cell death，ADCD)、NETosis、铜死亡和铁死亡等 [2]。

近年来，随着细胞死亡分子机制方面的研究取得进展，人们才逐渐发现有多种新型的细胞程序性死亡方式，包括非凋亡性(10种)及凋亡性(2种)二大类。它们广泛参与感染性疾病和肿瘤等疾病的发生、发展，是目前热门研究的前沿课题，为临床防治提供了新思路。本文通过对程序性细胞死亡文献的梳理，围绕细胞坏死、凋亡、焦亡、铁死亡、中性粒细胞的炎性细胞死亡、铜死亡及细胞广泛凋亡等特征性表现，以及与若干感染性疾病相关性研究进展作一综述。

目的:建立流式细胞术(FCM)检测中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的表达方法，探讨NETs在脓毒症相关凝血功能障碍(SAC)患者中的临床诊断价值。方法:收集2018年5月至2019年6月苏州大学附属第二医院50例非脓毒症者和21例脓毒症患者抗凝血。脓毒症患者符合3.0定义的诊断标准，血培养鉴定出革兰氏阴性菌，D二聚体含量>0.5 mg/L，彩色多普勒超声检查显示血栓形成，即时收集外周血样。采用别藻蓝蛋白(APC)标记的白细胞分化抗原66b(CD66b)识别多型分叶核细胞(PMNs)，异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗髓过氧化物酶(MPO)抗体耦联PMNs膜表面MPO，Sytox orange(SO)核酸染料标记脱氧核糖核酸(DNA)，建立FCM检测全血NETosis相关标志物方法。7-氨基放线菌素D(7-AAD)染料观察溶血对细胞膜完整性的影响，进行NETosis相关标志物(SO/MPO)的特异性检测。受试者工作特征(ROC)曲线分析NETosis相关标志物和白细胞总数(WBC)在SAC患者中的灵敏度和特异性，用Mann-Witney统计量的非参数法估计ROC曲线下面积(AUC)，AUC的比较采用配对设计的两相关诊断试验差异假设检验。结果:全血分离的PMNs与FACS试剂溶血后的PMNs对7-AAD的阴性表达率比较，两者差异无统计学意义[(95.1±6.6)%比(93.5±5.7)%， t＝1.984， P>0.05]。NETosis相关标记物SO/MPO不能识别Etoposide药物诱导的PMNs凋亡(Apoptosis)。ROC曲线分析SAC患者的AUC，NETosis相关标记物取2.5%时的AUC高于WBC取8.0×10 9/L时的AUC(0.97比0.72， Z＝2.011， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:FCM检测外周全血PMNs上NETosis相关标志物具有良好的敏感性、特异性，在SAC诊断中有重要临床价值。

目的 探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在肝衰竭患者中的促炎作用和NETosis在肝衰竭肝脏炎症反应过程中的致病作用.方法 选取2020年10月至2022年2月于武汉大学人民医院就诊的30例肝衰竭患者作为观察组,选取同期体检健康人群30例作为对照组.比较2组受试者的血清生化指标,采用酶联免疫吸附试验法检测血清中NETs标志物髓过氧化物酶(MPO)-DNA水平,采用免疫荧光法检测中性粒细胞中NETs标志物分子MPO和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平,采用免疫组织化学染色法检测供肝和肝衰竭患者肝组织中MPO水平.结果 观察组凝血酶原活动度、白蛋白水平均低于对照组,观察组中性粒细胞百分比、总胆红素、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平均高于对照组(均P＜0.05).酶联免疫吸附试验结果显示观察组MPO-DNA水平高于对照组[(10.0±2.7)μg/L比(3.4± 1.0)μg/L](P＜0.001).免疫荧光结果显示观察组外周血中性粒细胞中NE、MPO表达水平均高于对照组.免疫组织化学染色结果显示肝衰竭患者肝组织中MPO的表达水平高于供肝组织.结论 肝衰竭时,中性粒细胞活化产生NETs,并通过NETosis促进肝脏炎症反应,加重肝脏损伤.

目的 比较18种中药多糖与唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin,Siglec-9)的亲和力以及抗炎能力,探讨中药多糖发挥抗炎作用的新机制.方法 选择18种不同药性的中药用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸法检测多糖含量,高效液相色谱法检测多糖的单糖组成,红外光谱法检测中药多糖结构.通过竞争性ELISA法检测多糖与Siglec-9的亲和力,并研究中药多糖对LPS诱导巨噬细胞炎症反应以及R848诱导中性粒细胞NETosis的影响,利用髓系细胞特异性敲除Siglec-E(Lyz2-cre:Siglec-E flox/flox)小鼠来源的原代巨噬细胞和腹腔中性粒细胞进一步明确多糖结合Siglec-9产生抗炎作用的机制.结果 中药多糖的糖含量均在55％以上,主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等组成,但单糖构成比各不相同.红外光谱检测4种代表性中药多糖均有典型的多糖吸收峰,柴胡和蒲公英多糖具有葡萄糖醛酸结构.枸杞和黄芪多糖与Siglec-9的亲和力,对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应和R848诱导的中性粒细胞NETosis反应无显著抑制作用.柴胡和蒲公英多糖与Siglec-9亲和力较强(P<0.01),能够显著抑制上述炎症反应,但其抗炎作用在髓系细胞特异性敲除Siglec-E基因小鼠来源的巨噬细胞和中性粒细胞中消失.结论 中药多糖与Siglec-9的亲和力有潜力成为研究中药抗炎作用的新的现代药理学机制.

中性粒细胞胞外捕获网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞通过一种名为NETosis的程序后形成的一种纤维网状结构,其主要功能是诱捕和杀死病原体.同时,NETs也广泛参与免疫系统疾病、呼吸系统疾病、代谢性疾病、癌症、再灌注损伤等重大疾病的病理过程,因此调节NETs已成为防治上述疾病的重要途径之一.中医药作为我国优秀传统文化,对于疾病的治疗有着突出的贡献.近年研究发现多种中药有效成分、复方和单味中药可通过调节免疫系统疾病、呼吸系统疾病、代谢性疾病、癌症、再灌注损伤等重大疾病病理过程中的NETs,进而改善相关疾病的症状.该文综述近五年国内外中药有效成分、复方和单味中药调节NETs的研究进展,以供参考.