目的:研究活动期克罗恩病（CD）患者外周血单个核细胞（PBMC）中高表达的环状RNA分子103124（hsa_circRNA_103124）在巨噬细胞分化、焦亡和炎症中的作用及相关机制。方法:回顾性选取2018年4至9月南京医科大学附属苏州医院收治的活动期CD患者（CD组）和2018年7至10月该院体检中心健康体检人群（对照组），通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测两组PBMC中hsa_circRNA_103124和Toll样受体4（TLR4）的水平。使用人单核细胞白血病细胞株（THP1）作为hsa_circRNA_103124调控巨噬细胞分化的研究模型。慢病毒感染构建hsa_circRNA_103124过表达或下调表达THP1细胞稳转株，诱导巨噬样分化，根据hsa_circRNA_103124的表达水平，将THP1细胞株分为以下4组：pLC5-ciR为过表达对照组；hsa_circRNA_103124 OE为过表达组；ShRNActrl为下调表达对照组；hsa_circRNA_103124 ShRNA为下调表达组。流式细胞术检测分化簇（CD）68、CD80、白细胞介素（IL）-6和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平及活性氧（ROS）生成水平。RT-qPCR检测IL-6、TNF-α、IL-1β、TLR4和髓样分化因子88（MyD88）水平。免疫荧光、RT-qPCR检测焦孔素D（GSDMD）、IL-18、热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）水平。采用Pearson相关法分析hsa_circRNA_103124的丰度和TLR4表达水平或克罗恩病活动指数（CDAI）的相关性。结果:CD组共纳入50例患者，男36例，女14例，年龄（35±10）岁（19~64岁）；对照组共纳入30名，男22名，女8名，年龄（38±9）岁（24~64岁）。CD组 PBMC中hsa_circRNA_103124［（0.009±0.016）比（0.003±0.002）， P=0.042］和TLR4［（0.005±0.003）比（0.001±0.001）， P<0.001］的水平均高于对照组，且hsa_circRNA_103124和TLR4的水平呈正相关（ r=0.40， P=0.004）。hsa_circRNA_103124水平与CDAI呈正相关（ r=0.32， P=0.024）。CD68（ P=0.002）和CD80（ P<0.001）的表达均增强。巨噬样M1型分化的THP1细胞中，hsa_circRNA_103124可促进ROS生成及IL-6、TNF-α、IL-1β、TLR4、MyD88、GSDMD、IL-18和NLRP3等表达（均 P<0.05）。 结论:活动期CD患者PBMC中高表达的hsa_circRNA_103124可能通过促进TLR4、MyD88、NLRP3和GSDMD等的生成，促进巨噬细胞M1分化、焦亡及炎症。

目的:研究中性粒细胞外陷阱（NETs）在程序性细胞死亡受体-1（PD-1）抑制剂相关心肌炎中的作用，探索靶向NETs的免疫检查点抑制剂相关心肌炎（ICIAM）治疗靶点。方法:选6周龄健康雄性BALB/c小鼠30只，分别编号并随机分为对照组（ n=10）、模型组（ n=10）和治疗组（ n=10）。除对照组外，分别于第1和7天给小鼠皮下注射100 μl含有250 μg小鼠心肌肌钙蛋白I（TnI）肽段的弗氏完全佐剂（CFA）。第8天起每2天腹腔注射一次PD-1抑制剂（15 μg/只），共5次。PF-1355治疗组从造模开始前1天起连续16 d腹腔注射PF-1355（50 mg·kg -1·d -1）。观察各组小鼠一般状态，实时荧光定量聚合酶链式反应（RTFQ-PCR）评估中性粒细胞相关趋化因子、NETs和焦亡相关因子、促炎细胞因子的转录水平调控，免疫组化、免疫荧光检测和蛋白质印迹法反映焦亡相关分子的蛋白水平变化，超声心动图展示主要心功能指标改变，心肌病理对比炎性浸润程度。 结果:模型组小鼠较对照组小鼠心肌NETs免疫荧光强度明显增加（2.49±0.08和0.99±0.26， P<0.001）。模型组心肌组织焦亡相关NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cleaved-Caspase 1）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（Caspase 1）、剪切的Gasdermin-D（cleaved-GSDMD）、Gasdermin-D（GSDMD）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18）的蛋白表达水平较对照组上调（均 P<0.05）。PF-1355治疗后，相比于模型组，治疗组小鼠左心室射血分数（LVEF）（73.58%±5.31%和58.12%±3.19%， P<0.001）、左室缩短分数（LVFS）（39.78%±4.31%和33.89%±2.19%， P<0.001）升高；苏木精-伊红染色结果显示与模型组相比，治疗组炎性浸润面积百分比减少（30.12%±3.57%和14.92%±2.46%， P<0.001）；治疗组免疫荧光NETs生成较模型组减少（2.52±0.04和1.03±0.05， P<0.001）；治疗组NLRP3等焦亡相关分子水平较模型组下调（均 P<0.05）。 结论:在PD-1抑制剂相关的心肌炎中，NETs通过激活NLRP3炎症小体导致心肌细胞焦亡。特异性髓过氧化物酶抑制剂PF-1355通过调控NETs来下调NLRP3炎症小体激活，可能进一步挽救和逆转NETs介导的心肌焦亡损伤。

目的:探讨二甲双胍改善小鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)脂肪代谢和炎症的作用机制。方法:将18只8周C57BL/6J雄性小鼠按随机数字法分为3组：正常饮食组、高糖高脂加胆固醇饮食(HFF)模型(HFF组)和HFF模型二甲双胍处理组(Met组)，每组6只小鼠，喂养16周，第12周起Met组每天给予一次二甲双胍药物(150 mg/kg)灌胃干预，持续4周，正常饮食组和HFF组给予等体积生理盐水灌胃处理。造模结束后，麻醉并称取小鼠体重后，取小鼠血清和肝组织，计算肝脏指数(肝重/体重)，检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及血清甘油三酯(TG)、肝脏TG；通过苏木精-伊红(HE)染色和油红O染色观察肝脏的病理变化；蛋白质印迹法(Western blot)检测脂质合成相关蛋白甾醇调节元件结合蛋白(SREBP1c)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FASN)的蛋白表达水平；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Acc、Fasn、Srebf1、白细胞介素-1β(IL-1β)、淋巴细胞抗原6(Ly6g)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA相对表达水平。其次，利用HFF组和Met组小鼠肝组织进行表达谱高通量测序并分析相关信号通路的变化。最后，Western blot检测自噬底物p62、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3-Ⅰ/Ⅱ)、自噬相关基因5(ATG5)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)及其磷酸化水平，以及M1型巨噬细胞标志物[IL-1β、iNOS、单位细胞趋化蛋白1(MCP1)、CD86]和M2型巨噬细胞标志物(CD163、CD206)的蛋白水平。两组间采用 t检验进行比较。 结果:HE染色和油红O染色显示，与正常饮食组比较，HFF组小鼠肝组织脂滴累积，炎性细胞浸润增加；HFF组小鼠肝组织ACC、SREBP1c以及iNOS、MCP1的蛋白表达水平高于正常饮食组(1.03±0.15比0.60±0.15， t＝3.277， P<0.05；1.04±0.08比0.70±0.10， t＝4.467， P<0.05；1.16±0.02比0.54±0.22， t＝3.772， P<0.05；1.20±0.15比0.51±0.09， t＝6.908， P<0.05)。Met组小鼠体重、肝重、肝脏指数低于HFF组[(27.45±4.26) g比(35.51±1.69) g， t＝4.306， P<0.05；(1.20±0.21) g比(1.74±0.17) g， t＝4.839， P<0.05；0.04±0.01比0.05±0.01， t＝2.147， P<0.05]；Met组小鼠血清ALT和AST对比HFF组无明显变化[(21.33±4.32) U/L比(30.33±10.84) U/L， t＝1.889， P>0.05；(106.70±17.33) U/L比(112.30±14.33) U/L， t＝0.617， P>0.05)]。Met组小鼠血清TG、肝脏TG水平低于HFF组[(0.72±0.27) mmol/L比(1.33±0.41) mmol/L， t＝3.004， P<0.05；(0.02±0.01) mmol/L比(0.05±0.03) mmol/L， t＝2.350， P<0.05)]；HE染色和油红O染色结果观察到Met组小鼠肝细胞内未见明显空泡和脂滴；Met组小鼠肝组织中ACC、FASN、SREBP1c蛋白表达水平低于HFF组(0.37±0.13比0.66±0.09， t＝3.174， P<0.05；0.61±0.03比1.11±0.14， t＝6.069， P<0.05；0.48±0.05比0.88±0.01， t＝12.310， P<0.05)；Met组小鼠肝组织中ACC、FASN、SREBP1c mRNA表达水平低于HFF组(2.21±0.08比8.13±3.45， t＝2.974， P<0.05；1.06±0.12比1.39±0.05， t＝4.310， P<0.05；1.03±0.06比1.50±0.26， t＝3.055， P<0.05)。Met组小鼠IL-1β、Ly6g、NLRP3、iNOS mRNA表达水平低于HFF组(0.47±0.02比1.40±0.08， t＝21.030， P<0.05；0.16±0.06比0.65±0.19， t＝4.276， P<0.05；0.67±0.04比1.17±0.16， t＝5.082， P<0.05；0.82±0.52比4.49±0.78， t＝6.784， P<0.05)。Met组小鼠肝组织p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K比值低于HFF组(1.05±0.02比1.58±0.04， t＝15.420， P<0.05；0.47±0.11比1.07±0.10， t＝6.906， P<0.05)；Met组小鼠肝组织ATG5、CD163蛋白表达和LC3II/LC3I比值高于HFF组(1.05±0.11比0.52±0.04， t＝7.690， P<0.05；0.99±0.02比0.64±0.04， t＝14.470， P<0.05；1.58±0.05比1.34±0.03， t＝7.091， P<0.05)；Met组小鼠肝组织P62、IL-1β、iNOS、MCP1蛋白表达低于HFF组(0.72±0.06比1.07±0.08， t＝6.047， P<0.05；0.17±0.10比0.56±0.10， t＝4.310， P<0.05；0.42±0.03比0.78±0.15， t＝4.038， P<0.05；0.39±0.10比0.72±0.02， t＝4.253， P<0.05)；Met组小鼠肝组织CD86、CD206蛋白表达对比HFF组无明显变化(0.65±0.04比0.68±0.08， t＝0.600， P>0.05；0.72±0.33比0.88±0.21， t＝0.664， P>0.05)。 结论:二甲双胍治疗通过抑制PI3K/Akt通路，增强自噬，促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化，从而减轻小鼠NASH的肝脂肪变性和炎症。

目的:探究18α甘草次酸(18α-GA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用，为18α-GA的临床应用提供理论依据和实验基础。方法:将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组：DSS模型组，阳性药对照组，18α-GA高、中、低剂量组，每组8只，5组小鼠均采用3% DSS溶液连续喂养7 d建立急性UC动物模型，同时各组分别每天腹腔注射100 mg/kg生理盐水、100 mg/kg柳氮磺吡啶、40 mg/kg 18α-GA、20 mg/kg 18α-GA、10 mg/kg 18α-GA。每天测量并记录小鼠的体重，评估小鼠疾病活动指数(DAI)。第8天处死小鼠，取小鼠结肠测量其长度；切片观察结肠黏膜并进行病理学评分；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体通路相关蛋白表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定结肠组织中IL-1β含量。结果:与DSS模型组比较，18α-GA高、中剂量组第7天时的体重减轻幅度明显更小(均 P<0.05)；结肠长度更长(均 P<0.05)，结肠黏膜病理学评分明显更低(均 P<0.05)；结肠组织中GSDMD、cleaved-caspase1及IL-1β的表达显著更低(均 P<0.05)；18α-GA高剂量组DAI评分更低( P<0.05)；结肠组织中NLRP3表达更低( P<0.05)。 结论:18α-GA可通过抑制NLRP3炎症小体通路的激活，改善DSS诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎。

目的:探讨右美托咪定（Dex）对高氧诱导急性肺损伤大鼠肺损伤及肺组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎性体水平的影响。方法:70只成年SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、高Dex组、中Dex组、低Dex组，每组14只。除对照组外，其余各组通过暴露高氧环境建立急性肺损伤大鼠模型。高Dex组、中Dex组、低Dex组大鼠分别腹腔注射15.0、10.0、7.5 μg/kg的Dex，对照组、模型组腹腔注射等量25 μl的生理盐水，1次/d，连续干预7 d后处死取材。采用HE染色检测大鼠肺组织病理变化并评估肺损伤；检测大鼠全肺组织的湿/干重比（W/D）及肺功能；采用Western blotting实验检测大鼠肺组织NLRP3炎性体相关蛋白［NLRP3、胱天蛋白酶-1（caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）］的相对表达量；采用ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）炎症细胞因子［白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-6］的表达水平。结果:与对照组比较，模型组大鼠肺组织病变明显，Dex各组大鼠肺组织病变较模型组均明显改善，Dex剂量越大，改善越明显（ P<0.05）。肺损伤、W/D及肺功能比较，对照组大鼠明显优于模型组、各Dex组，各Dex组大鼠明显优于模型组，Dex剂量越大，差异越明显（ P<0.05）。NLRP3、caspase-1、ASC蛋白相对表达量比较，模型组、各Dex组大鼠明显高于对照组，各Dex组大鼠明显低于模型组，Dex剂量越大，降低越明显（ P<0.05）。IL-6、IL-1β、TNF-α水平比较，模型组、各Dex组大鼠明显高于对照组，各Dex组大鼠明显低于模型组，Dex剂量越大，降低越明显（ P<0.05）。 结论:Dex能保护高氧所致急性肺损伤大鼠的肺功能，减少肺组织损伤，抑制NLRP3炎性体表达，降低机体炎症反应。

目的:观察痰瘀同治法对糖尿病模型大鼠心肌c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路的干预机制。方法:选取健康SPF级雄性SD大鼠50只，采用单次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）溶液55 mg/kg建立糖尿病模型。继续喂养3周后，将造模成功大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、阿拉氯胺组、化瘀组、化痰组、痰瘀同治组，每组6只。化痰组、化瘀组、痰瘀同治组分别灌胃小陷胸汤（4.05 g/kg）、血府逐瘀汤（7.02 g/kg）、抵当陷胸汤（8.10 g/kg），阿拉氯胺组灌胃阿拉氯胺（3 mg/kg）。连续灌药8周，采用HE染色观察各组大鼠心肌组织形态学改变；Masson染色观察大鼠心肌间质胶原沉积情况；免疫组化染色检测心肌组织中JNK1蛋白表达；实时荧光定量PCR法检测大鼠心肌组织中JNK1、胰岛素受体底物-1（IRS-1）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）mRNA水平；Western blot法检测IRS-1、p-Akt、NLRP3蛋白表达。结果:模型组大鼠心肌细胞排列混乱，细胞肥大，纹理模糊，间质有炎性浸润，胶原纤维增多，出现局灶性坏死；各给药组均可不同程度地改善纤维化、炎性浸润状况，减少心肌胶原沉积。与模型组比较，痰瘀同治组JNK1、NLRP3 mRNA及蛋白表达降低（ P<0.01），IRS-1 mRNA水平及蛋白表达升高（ P<0.01），p-Akt蛋白表达升高（ P<0.01）。 结论:痰瘀同治法可有效改善糖尿病大鼠心肌病变，且效果较单纯使用化痰法或化瘀法更佳，其机制可能与抑制JNK信号通路激活，下调JNK1、NLRP3蛋白，上调IRS-1、Akt蛋白表达有关。

目的 从肠道菌群探讨化痰活血通络方治疗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机制,为化痰活血通络方临床应用提供依据.方法 25只雄性ApoE-/-小鼠,高脂饲料喂养12周,制备AS模型;分为模型组、全方组、通络组、化痰组、他汀组各5只,另设C57BL/6J雄性小鼠5只作为正常组,各组相应药物灌胃治疗12周.采用16S rRNA扩增子测序检测肠道菌群;苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠主动脉及肠道的病理形态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中相关指标,Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、核因子-κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)蛋白含量.结果 与正常组相比,模型组中物种丰富度及多样性下降明显,厚壁菌门(Fir-micutes)与拟杆菌门(Bacteroidetes)的比例(F/B)显著上升,血清中脂多糖(LPS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),主动脉中TLR4、NLRP3、NF-κB、IL-6蛋白含量显著上升(P＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量显著下降(P＜0.01),小鼠主动脉斑块面积显著增加(P＜0.01)并伴有大量泡沫细胞及炎性浸润,肠内有大片绒毛脱落与固有层裸露,与模型组相比全方组可显著增加物种丰富度及多样性,降低F/B的比例(P＜0.01),提高有益菌的相对丰度,降低有害菌的相对丰度,在全方组与阿托伐他汀组中LPS、TG、TC、LDL-C、TLR4、NLRP3、NF-κB、IL-6均显著下降(P＜0.01),HDL-C显著上升(P＜0.01),并且可明显缓解上述病理改变.结论 化痰活血通络方可改善肠道菌群的组成及脂代谢,减少LPS的产生,并通过TLR4/NF-KB/NLRP3信号通路下调主动脉中炎性因子的表达,减少脂质的积累来缓解ApoE-/-小鼠的动脉粥样硬化.

目的 探讨异荭草苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制.方法 将 48 只 C57BL/6J 小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组(600 mg·kg-1)、异荭草苷低剂量组(25 mg·kg-1)、异荭草苷高剂量组(50 mg·kg-1)及异荭草苷对照组(50 mg·kg-1),每组 8 只.小鼠自由饮用 2%DSS溶液复制UC模型,实验进行 3 周后,各给药组给予相应药物灌胃治疗 4 周.给药结束后,称取体质量,摘眼球取血,剖取结肠组织.采用苏木素-伊红(HE)、阿利新蓝-过碘酸-雪夫染色(AB-PAS)法观察小鼠结肠组织病理形态变化;透射电子显微镜观察小鼠结肠组织超微结构;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂多糖(LPS)和髓过氧化物酶(MPO)水平;免疫组化法检测小鼠结肠组织中半乳糖凝集素(Gal-3)蛋白表达;免疫荧光法检测黏蛋白(MUC2)表达及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白 3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)共定位情况;免疫印迹(Western Blot)法检测小鼠结肠组织中 Gal-3、NLRP3、ASC、半胱氨酸蛋白酶 1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白 1(ZO-1)蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量明显下降,结肠长度明显缩短,肠质量指数明显增加(P＜0.01);小鼠肠黏膜结构紊乱,微绒毛稀疏,隐窝结构见大量炎性细胞浸润,线粒体肿胀明显,杯状细胞明显减少;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显升高,IL-10 水平明显降低(P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达减少及NLRP3 和ASC共定位增强;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显增加,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显降低(P＜0.01).与模型组比较,异荭草苷低、高剂量组小鼠体质量明显上升,结肠长度明显增长,肠质量指数明显降低(P＜0.05,P＜0.01);肠黏膜、微绒毛及线粒体结构明显恢复,炎性浸润减轻,杯状细胞明显增加;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显降低,IL-10 水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达增加,NLRP3 和ASC共定位减弱;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显降低,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显增加(P＜0.05,P＜0.01).结论 异荭草苷对DSS诱导的UC小鼠具有良好的治疗效果,其机制可能与抑制Gal-3/NLRP3/IL-1β信号通路,保护肠黏膜屏障有关.

急性胰腺炎是一种与炎性反应密切相关的消化系统疾病。NOD样受体蛋白3 （NLRP3）炎性小体是一种蛋白质复合物，在炎症风暴发生、炎性状态的调节中起着至关重要的作用，其通过激活氧化应激、调节肠道菌群和驱动细胞焦亡等，影响急性胰腺炎的发生、发展和结局转归，有望成为急性胰腺炎诊断的生物标志物及治疗新靶点。现就NLRP3炎性小体与急性胰腺炎的关系以及其相互影响机制的研究现状作一综述。

细胞焦亡是一种新型促炎性细胞程序性死亡方式,其由NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3炎症小体活化启动,gasdermin D蛋白活性N端破坏细胞膜完整性,导致细胞死亡,随后引发炎症级联反应加重组织损伤.有研究表明,细胞焦亡可能参与心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的发生发展.MIRI是限制急性心肌梗死临床疗效的重要原因之一.针对细胞焦亡的药物在MIRI疾病模型中能够挽救细胞焦亡所致心肌损伤.现就细胞焦亡在MIRI中的作用做一综述,并在此基础上探讨可能的治疗靶点.