目的:建立HPLC法同时测定印度獐牙菜中9个成分含量的方法。方法:用Waters SunFire C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以甲醇-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱；柱温30 ℃，流速1.0 ml/min，检测波长为254 nm。结果:獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、当药苷、芒果苷、异荭草素、苦龙胆酯苷、当药醇苷、8-羟基-1，3，5三甲氧基 酮、雏菊叶龙胆酮在进样质量范围内呈良好的线性关系，加样回收率分别为95.38%、92.41%、95.14%、91.87%、92.24%、92.51%、95.08%、91.72%、95.74%。 结论:该方法简便、高效、灵敏、准确、经济实用，具有良好的重复性和稳定性，为印度獐牙菜的质量控制、综合利用提供了有效参考依据。

目的:优化竹叶石膏颗粒提取和成型工艺,并进行质量评价.方法:采用正交试验优选竹叶石膏颗粒的最佳提取工艺;采用Box-Behnken响应面法优化竹叶石膏颗粒最佳成型工艺;建立特征图谱,以薄层鉴别(TLC)和含量测定进行质量评价.结果:竹叶石膏颗粒的最优提取工艺为:加6倍量水,煎煮3次,每次1 h;竹叶石膏颗粒最优成型工艺为:糊精为辅料,药辅比1∶1,乙醇浓度80％,乙醇用量为药粉和辅料总量的0.25倍;特征图谱共确定5个特征峰;建立了竹叶石膏颗粒中人参、甘草、生姜的薄层鉴别方法,并测定其中荭草苷、异荭草苷、甘草苷、甘草酸的含量.结论:该研究建立的提取、成型工艺稳定可靠,颗粒质量一致性良好,可用于竹叶石膏颗粒的质量评价.

目的 探讨异荭草苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制.方法 将 48 只 C57BL/6J 小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组(600 mg·kg-1)、异荭草苷低剂量组(25 mg·kg-1)、异荭草苷高剂量组(50 mg·kg-1)及异荭草苷对照组(50 mg·kg-1),每组 8 只.小鼠自由饮用 2%DSS溶液复制UC模型,实验进行 3 周后,各给药组给予相应药物灌胃治疗 4 周.给药结束后,称取体质量,摘眼球取血,剖取结肠组织.采用苏木素-伊红(HE)、阿利新蓝-过碘酸-雪夫染色(AB-PAS)法观察小鼠结肠组织病理形态变化;透射电子显微镜观察小鼠结肠组织超微结构;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂多糖(LPS)和髓过氧化物酶(MPO)水平;免疫组化法检测小鼠结肠组织中半乳糖凝集素(Gal-3)蛋白表达;免疫荧光法检测黏蛋白(MUC2)表达及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白 3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)共定位情况;免疫印迹(Western Blot)法检测小鼠结肠组织中 Gal-3、NLRP3、ASC、半胱氨酸蛋白酶 1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白 1(ZO-1)蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量明显下降,结肠长度明显缩短,肠质量指数明显增加(P＜0.01);小鼠肠黏膜结构紊乱,微绒毛稀疏,隐窝结构见大量炎性细胞浸润,线粒体肿胀明显,杯状细胞明显减少;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显升高,IL-10 水平明显降低(P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达减少及NLRP3 和ASC共定位增强;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显增加,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显降低(P＜0.01).与模型组比较,异荭草苷低、高剂量组小鼠体质量明显上升,结肠长度明显增长,肠质量指数明显降低(P＜0.05,P＜0.01);肠黏膜、微绒毛及线粒体结构明显恢复,炎性浸润减轻,杯状细胞明显增加;血清IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、LPS和MPO水平明显降低,IL-10 水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01);结肠组织MUC2 蛋白阳性表达增加,NLRP3 和ASC共定位减弱;结肠组织中Gal-3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 蛋白表达明显降低,Occludin和ZO-1 蛋白表达明显增加(P＜0.05,P＜0.01).结论 异荭草苷对DSS诱导的UC小鼠具有良好的治疗效果,其机制可能与抑制Gal-3/NLRP3/IL-1β信号通路,保护肠黏膜屏障有关.

目的:对小叶三点金药材进行生药学鉴别研究,筛选出具有鉴别意义的特征及质量控制的指标性成分.方法:采用原植物基原鉴定、药材性状鉴定、显微鉴定、薄层色谱法等鉴别手段;检测水分、总灰分、酸不溶性灰分等检查项;测定浸出物含量,采用HPLC测定荭草苷和异荭草苷的含量.结果:建立了小叶三点金的药材标准,包括原植物、药材性状及显微鉴别特征,水分为 6.90%～8.70%,总灰分为 9.31%～12.38%,酸不溶性灰分为 6.14%～7.83%;采用热浸法 70%乙醇作溶剂的浸出物为 18.29%～30.41%;建立了荭草苷和异荭草苷的薄层色谱鉴别;HPLC测定荭草苷和异荭草苷的总含量为 0.23%.结论:该研究为小叶三点金药材鉴定、质量控制以及资源合理开发利用提供了科学依据.

目的 研究荭草素和异荭草素降血糖的靶点及其体外活性.方法 从蛋白质数据库(www.rcsb.org)获取糖尿病相关靶点蛋白结构,利用虚拟分子对接打分评价荭草素和异荭草素与糖尿病相关靶点的结合强弱;基于分子对接的结果,采用荧光标记的 1-脱氧葡萄糖(1-NBDG)、4-硝基苯基-α-D-葡萄糖苷PNDG(PNPG)、对硝基苯酚磷酸酯(pNPP)作为底物对荭草素和异荭草素进行体外抑制α-葡萄糖糖苷酶、钠-葡萄糖协同转运蛋白 2(SGLT2)和蛋白酪氨酸磷酸酶 1B(PTP1B)活性评价.结果 荭草素与α-葡萄糖苷酶、SGLT2、和PTP1B的分子对接得分分别为-5.67、-9.32、-4.75,异荭草素与α-葡萄糖苷酶、SGLT2 和 PTP1B 的分子对接得分分别为-5.34、-8.63、-4.93,而阳性对照药与靶标的分子对接打分依次是-5.58、-9.79、-9.28.体外实验显示,荭草素对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次是(16.7±5.8)%、(15.4±1.2)%、(3.0±0.5)%,异荭草素对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次是(11.8±3.8)%、(9.4±1.1)%、(-3.8±0.6)%,而阳性对照对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次为(63.7±5.8)%、(92.7±8.8)%、(73.4±8.3)%.结论 荭草素和异荭草素对SGLT2 和α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制活性,对PTP1B几乎没有抑制作用,且荭草素的体外活性略强于异荭草素,荭草素有可能作为一类具有双靶点作用的降血糖药物的先导化合物.

目的:研究云南蓍Achillea wilsoniana Heimerl ex Hand.-Mazz.的黄酮类化学成分及其体外抗炎活性.方法:采用多种色谱技术对云南蓍70％乙醇提取物进行分离纯化,并根据化合物的理化性质与波谱数据进行结构鉴定.采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7体外炎症模型测定化合物对一氧化氮(NO)释放的抑制作用.结果:从云南蓍中分离得到22个黄酮类化合物,分别鉴定为:木犀草素(1)、hydnocarpin(2)、槲皮素(3)、异荭草素(4)、quercetin-3-O-α-arabinopyranosyl(1'''→6'')-β-glucopyranoside(5)、芦丁(6)、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(7)、异金雀花素(8)、异鼠李素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、异槲皮苷(10)、蒿黄素(11)、槲皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷(12)、异牡荆苷(13)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、苜蓿素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(16)、芹菜素(17)、异鼠李素(18)、casticin(19)、槲皮苷(20)、泽兰黄素(21)、vitexin(22).体外抗炎实验结果表明,化合物1、3、11、13～15、17、19和21对LPS诱导的RAW 264.7细胞NO生成具有一定的抑制活性.结论:其中,化合物1、3～7、10、11、13～15、17～19、21、22为首次从云南蓍中分离得到,化合物2、8、9、12、16、20为首次从蓍属植物中分离得到,化合物1、3、11、13～15、17、19、21具有一定的抗炎活性.

目的:建立三叶青藤叶中总黄酮、荭草苷及异荭草苷的提取分离和含量测定方法.方法:分别选取不同浓度的乙醇、丙二醇和丁二醇作为溶剂对三叶青藤叶中的有效成分进行提取,分别筛选出对总黄酮、荭草苷及异荭草苷提取率最高的溶剂,并采用高效液相色谱法(HPLC)进行探究.结果:选取荭草苷提取分离溶剂为30%丙二醇,异荭草苷的提取分离溶剂为40%乙醇.荭草苷的线性关系方程为Y = 1.052 4X-0.508 6,在0.4～4 μg/mL范围内的峰面积与进样浓度线性关系良好(R2 = 0.999 7).采用30%丙二醇提取三叶青藤叶中荭草苷的平均含量为3.58 μg/g.异荭草苷的线性关系方程为Y = 1.665 0X-0.826 4,在0.4～4 μg/mL范围内的峰面积与进样浓度线性关系良好(R2 = 0.999 6).采用40%乙醇提取三叶青藤叶中异荭草苷的平均含量为1.47 μg/g.结论:建立了三叶青藤叶总黄酮、荭草苷及异荭草苷的提取分离和含量测定方法.建立的高效液相色谱法方法简便、准确,重复性好,可应用于三叶青中这几种成分的含量测定.

目的 对广金钱草Desmodium styracifolium中的黄酮及黄酮苷类化学成分进行研究.方法 采用溶剂提取法、MCI HP20柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色谱、制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并利用现代波谱技术对化合物进行结构鉴定.结果 从广金钱草醇提取物醋酸乙酯和正丁醇部位中分离得到31个黄酮及黄酮苷类化合物,分别鉴定为5,7-二羟基-2'-甲氧基-3',4'-亚甲二氧基二氢异黄酮(1)、5,7-二羟基-2',4'-二甲氧基二氢异黄酮(2)、金圣草黄素(3)、异鼠李素(4)、红车轴草素(5)、parvisoflavanone(6)、3,3'-二甲氧基槲皮素(7)、5,7,3'-三羟基4,5'-二甲氧基异黄酮(8)、5,7-二羟基-3',4'-二甲氧基黄酮(9)、eriocoumaronochromone(10)、染料木素(11)、苜蓿素(12)、3'-甲氧基大豆苷元(13)、5,7,2'-三羟基-4'-甲氧基二氢异黄酮(14)、山柰酚(15)、木犀草素(16)、大豆苷元(17)、7,3'-二羟基4,5'-二甲氧基异黄酮(18)、spicatolignan B(19)、槲皮素(20)、香豌豆酚(21)、3-甲氧基山奈酚(22)、芹菜素(23)、二氢山柰酚(24)、dalbergiodin(25)、2'-羟基染料木素(26)、木犀草苷(27)、异荭草苷(28)、染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(29)、异牡荆苷(30)、维采宁-2(31).结论 化合物6～8、10、14、18～19为首次从广金钱草中分离得到,丰富了广金钱草黄酮类成分的结构类型.

目的 建立同时测定肋柱花药材中 5 种活性成分含量的超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法.方法 色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18 柱(100 mm×2.1 mm,1.9 μm),流动相为甲醇-含 5 mmol/L甲酸铵的 0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,柱温为 30℃,进样量为 5 μL;离子源为电喷雾电离(ESI),电离模式为ESI-(木犀草素、芒果苷)和ESI+(异荭草苷、獐牙菜苦苷、当药黄素),多反应监测(MRM)模式,喷雾电压为 3 500V(正离子模式)和 3 000V(负离子模式),雾化温度为 300℃.采用SIMCA 14.1软件进行主成分分析.结果 木犀草素、异荭草苷、獐牙菜苦苷、芒果苷、当药黄素的质量浓度分别在0.4041～12.9312 mg/L、0.392 2～12.550 4 mg/L、0.283 8～9.081 6 mg/L、0.305 5～9.776 0 mg/L、0.356 7～11.414 4 mg/L范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.999 0);检测限分别为 0.521 0,1.319 8,0.813 3,1.219 4,2.083 0 μg/L,定量限分别为 1.510 9,3.931 2,2.709 6,4.024 1,6.736 5 μg/L;精密度、稳定性、重复性试验结果的 RSD 均小于 3.5%(n = 6);加样回收率分别为 94.83%,92.30%,100.47%,95.13%,95.53%,RSD分别为 1.49%,2.50%,0.92%,0.91%,1.48%(n = 6).12 批不同产地的药材样品中 5 种活性成分的总含量为39.85～67.82 mg/g,獐牙菜苦苷的含量最多(33.87～61.44 mg/g).主成分分析结果显示,第一主成分、第二主成分的方差贡献率分别为 36.30%和 31.70%,筛选出的主要贡献成分为木犀草素(0.623 0)、獐牙菜苦苷(0.520 5)和芒果苷(0.753 3).结论 该方法操作简便、专属性强、结果准确、灵敏度高,可用于肋柱花药材中活性成分的定量分析,木犀草素、獐牙菜苦苷、芒果苷可作为肋柱花药材的质量控制标志物.

苦荞[Fagopyrum tataricum(L.)Gaertn]富含类黄酮C-糖苷,具有抗氧化、抗癌和消炎等多种保健作用.通过RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)技术从苦荞中克隆得到了一个糖基转移酶基因,命名为FtUGT143,对其进行生物信息学、分子对接、基因表达、基因表达量与代谢物含量相关性等分析.结果表明,FtUGT143 全长CDS序列为 678 bp,编码 226 个氨基酸.密码子偏好分析结果显示,FtUGT143 具有双子叶植物的密码子使用偏好性.多序列比对和进化树分析表明,FtUGT143是植物糖基转移酶基因家族中的C-糖基转移酶亚家族成员.分子对接结果表明,FtUGT143能与合成黄酮C-糖苷(牡荆素、异牡荆素、荭草素和异荭草素)的底物芹菜素和木犀草素相互作用.RT-qPCR结果显示,FtUGT143基因在苦荞的各个组织部位中均有表达,但在芽苗期的根、茎、叶中显著表达,且其在不同组织部位的表达量与 4 种黄酮C-糖苷积累量具有较好的相关性.研究结果表明FtUGT143 是C-糖基转移酶,它可能参与苦荞中黄酮C-糖苷生物合成,对于揭示苦荞中黄酮C-糖苷的合成机制具有重要意义.