[目的]探究骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)信号对黑腹果蝇Drosophila melanogaster浆细胞吞噬功能的影响.[方法]利用黑腹果蝇UAS-Gal4系统,特异性地在浆细胞中敲低BMP信号基因Dpp,Gbb,Tkv,Put,Med,Wit,Sax,Mad,Dad,Sal,Brk和Omb;向黑腹果蝇3龄幼虫和成虫中注射荧光标记的无致病性的微球(FluoSphere Microspheres)以及pHrodo标记的的革兰氏阴性细菌大肠杆菌Escherichia coli(pHrodo-Escherichia coli)和革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus(pHrodo-Staphylococcus aureus)后计算吞噬指数,分析浆细胞的吞噬能力.[结果]与对照组Cg＞w1118相比,在黑腹果蝇3龄幼虫浆细胞中敲低Dpp,Gbb,Tkv,Wit,Dad,Brk和Omb后,浆细胞对FluoSphere Microspheres的吞噬指数显著下降;敲低Dpp,Gbb,Tkv,Wit,Dad和Brk后破坏了浆细胞吞噬pHrodo-Escherichia coli的能力,敲低Gbb后,浆细胞吞噬pHrodo-Staphylococcus aureus的能力明显下降;此外还发现,在成虫中敲低Gbb和Dad后,总的浆细胞吞噬能力明显下降,敲低Put后,总的浆细胞吞噬能力上升.[结论]在黑腹果蝇幼虫中,Dpp,Gbb,Tkv,Wit,Dad,Brk和Omb正调控浆细胞吞噬功能,其中Dpp,Gbb,Tkv,Wit,Dad和Brk促进浆细胞吞噬革兰氏阴性细菌,Gbb促进浆细胞吞噬革兰氏阳性细菌.在黑腹果蝇成虫中,Gbb和Dad有助于总浆细胞的吞噬功能,Put负调控浆细胞的吞噬功能.

目的 探讨他汀的应用是否和不断增长的脑微出血相关,尤其与皮质、皮质下微出血(csMB)的相关性.方法 回顾分析163例发病30 d内经过磁共振检查的脑出血的临床资料,将患者分为皮质、皮质下微出血(csMB)和其他位置的微出血(oMB),并对磁共振上微出血的位置和数量进行比较,根据是否应用他汀、是否存在微出血(MB)、是否有皮质、皮质下微出血(csMB)分别进行分组比较.结果 64％患者有脑叶出血,53％患者有微出血(MB),39％患者皮质、皮质下微出血(csMB).他汀的应用导致胆固醇和低密度脂蛋白显著降低,其中应用他汀的患者患有高血压、糖尿病、血脂紊乱、抗血小板的几率较大,应用他汀治疗的和未应用的患者中其他位置的微出血(oMB)数量相似,他汀治疗患者中存在更多的csMB(57％vS.33％,P=0.007),几乎是未应用他汀患者的2倍(4.6±2.7 vS.2.4±1.8,P＜0.001).多变量因素分析表明,年龄和他汀的应用是MB(0R=1.03;95％ CI:1.00～1.05;P=0.01和OR=2.72;95％ CI:1.02～7.22;P=0.04)和csMB(OR=1.03;95％ CI:1.00～ 1.06;P=0.01和OR =4.15:95％ CI:1.54～11.20,P＜0.01)的独立危险因素.结论 脑出血患者中他汀的应用与MB尤其是csMB相关,但需要更多的研究去确认csMB是否可以作为他汀应用患者脑出血的风险标志.

[目的]本研究克隆飞蝗Locusta migratoria发育相关的optomotor-blind(Omb)基因,并对其进行序列和表达分析,旨在更好地了解Omb基因在飞蝗翅发育中的作用及为进一步蝗灾的治理和防治提供新的理论依据.[方法]利用RT-RCR扩增飞蝗Omb基因cDNA序列,采用生物信息学软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,利用MEGA 6.0构建昆虫纲分子系统进化树;构建重组表达载体pET-30a/ LmOmb,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中,SDS-PAGE及Western blot鉴定重组表达蛋白;基于qPCR技术分析Omb基因在飞蝗不同发育时期及成虫不同组织中的表达谱.[结果]克隆获得飞蝗Omb基因部分cDNA序列,命名为LmOmb(GenBank登录号:MG867658),其长792 bp,编码264个氨基酸,在第37-219位氨基酸之间存在一个T-box superfamily保守结构域.同源序列比对分析表明LmOmb与褐飞虱Nilaparvata lugens NlOmb氨基酸序列一致性为93％.在IPTG诱导下目标蛋白以6×His标签融合蛋白的形式在宿主菌中得到稳定表达.荧光定量PCR结果显示LmOmb基因在飞蝗不同发育时期均有表达,其中胚胎期的表达量最高,进入若虫期后表达量下降,且各龄若虫之间表达量相对平稳.LmOmb基因在雌性和雄性成虫的胸部、足、腹部和翅中都有表达,且雌性和雄性之间表达量明显不同.[结论]LmOmb基因可能参与了飞蝗的胚胎发育.研究结果为进一步研究飞蝗LmOmb的功能提供了依据.

Manipulating an exogenous or endogenous gene of interest at a defined level is critical for a wide variety of experiments.The Gal4/UAS system has been widely used to direct gene expression for studying complex genetic and biological problems in Drosophila melanogaster and other model organisms.Driven by a given tissue-specific Gal4,expressing UAS-transgene or UAS-RNAi (RNA interference) could be used to up-or down-regulate target gene expression,respectively.However,the efficiency of the Gal4/UAS system is roughly predefined by properties of transposon vector constructs and the insertion site in the transgenic stock.Here,we describe a simple way to modulate optomotor blind (omb) expression levels in its endogenous expression region of the wing disc.We co-expressed UAS-omb and UAS-omb-RNAi together under the control of dppGal4 driver which is expressed in the omb expression region of the wing pouch.The repression effect is more sensitive to temperature than that of overexpression.At low temperature,overexpression plays a dominant role but the efficiency is attenuated by UAS-omb-RNAi.In contrast,at high temperature RNAi predominates in gene expression regulation.By this strategy,we could manipulate omb expression levels at a moderate level.It allows us to manipulate omb expression levels in the same tissue between overexpression and repression at different stages by temperature control.