目的:探讨血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白13（CTRP13）参与高糖诱导的人肝窦内皮细胞（HLSEC）滤过功能障碍的分子机制。方法:体外培养HLSEC，构建慢病毒CTRP13过表达载体（LV-CTRP13）并感染HLSEC，依据不同处理条件将细胞分为正常对照（5.5 mmol/L葡萄糖，NC）组、高糖（25 mmol/L，HG）组、NC+LV-CTRP13组、HG+LV-CTRP13组、NC+空载对照（LV-CON）组、HG+LV-CON组、HG+LV-CTRP13+盐诱导激酶1（SIK1）抑制剂（HG-9-91-01）组、HG+LV-CON+HG-9-91-01组、HG+LV-CTRP13+环磷酸腺苷调节转录共激活因子2（CRTC2）抑制剂（GW4064）组、HG+LV-CON+GW4064组。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blotting法检测CTRP13、SIK1、CRTC2、P130 Crk相关底物（P130Cas）的mRNA及蛋白表达水平。采用单因素方差分析进行组间比较。结果:与NC组相比，HG组CTRP13、SIK1、P130Cas的mRNA和蛋白表达降低，CRTC2的mRNA和蛋白表达升高（ P<0.05）。与HG+LV-CON组相比，HG+LV-CTRP13组CTRP13、SIK1、P130Cas的mRNA和蛋白表达升高，CRTC2的mRNA和蛋白表达降低（ P<0.05）。与HG+LV-CTRP13组相比，HG+LV-CTRP13+HG-9-91-01组CRTC2的mRNA和蛋白表达升高，而SIK1、P130Cas的mRNA和蛋白表达降低（ P<0.05）。与HG+LV-CTRP13组相比，HG+LV-CTRP13+GW4064组CRTC2的mRNA和蛋白表达降低，P130Cas的mRNA和蛋白表达升高（ P<0.05）。 结论:CTRP13、SIK1、CRTC2、P130Cas参与了高糖诱导的HLSEC滤过功能障碍，CTRP13过表达可以抑制高糖诱导的HLSEC滤过功能障碍，这一机制是通过SIK1/CRTC2通路实现的。

目的 探讨磷酸酯酶及张力蛋白同源物(PTEN)、P130 Crk相关底物(P130Cas)与瘢痕癌上皮间质转化(EMT)的关系.方法 收集8例瘢痕癌患者的瘢痕癌、癌旁瘢痕和正常皮肤组织,采用免疫组织化学法(S-P法)检测正常皮肤、瘢痕、瘢痕癌组织中PTEN、P130Cas、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达.结果 PTEN、P130Cas、E-cadherin在瘢痕癌、瘢痕、正常皮肤组织的表达水平差异均有统计学意义(P＜0.05);Vimentin在正常皮肤、瘢痕组织内呈阴性表达,两者差异无统计学意义(P＞0.05),但与瘢痕癌组织相比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).PTEN与P130Cas在瘢痕癌中的表达呈负相关(r=-0.78,P=0.023);瘢痕癌中E-cadherin的表达与PTEN的表达呈正相关(r=0.83,P=0.011),与P130Cas呈负相关(r=-0.74,P=0.035),PTEN、P130 Cas与Vimentin的表达不相关.结论 PTEN与P130Cas可能通过影响上皮间质转化现象在瘢痕恶变过程中起重要作用.

目的 探讨腺病毒介导的短发夹RNA(shRNA)下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)表达对体外活化肝星状细胞(HSC)p130Crk相关底物蛋白(p130Cas)及桩蛋白信号转导的影响.方法 体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体,将靶向PTEN的shRNA瞬时转染体外活化HSC,构建体外活化HSC的PTEN低表达模型,采用Western blot及实时荧光定量PCR技术检测活化HSC的PTEN 、p130Cas及桩蛋白的蛋白及mRNA表达.实验分组:对照组:以DMEM代替腺病毒液转染HSC;Ad-绿色荧光蛋白(GFP)组:转染仅表达GFP的空病毒Ad-GFP;Ad-shRNA/PTEN组:转染携带靶向PTEN的shRNA并表达GFP的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN.多组间均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用LSD检验.结果 靶向PTEN的shRNA成功转染并显著下调体外活化HSC的PTEN蛋白及mRNA表达(P＜0.05),体外活化HSC的PTEN低表达模型成功构建.3组HSC的P130Cas RNA表达比较,以对照组 HSC的P130Cas mRNA表达量为1,则Ad-GFP组和Ad-shRNA/PTEN组HSC的P130Cas mRNA相对对照组的表达倍数分别为1.01倍、1.52倍,Ad-shRNA/PTEN组HSC的P130Cas mRNA表达明显高于对照组及Ad-GFP组(P＜0.05),而对照、组与Ad-GFP组之间差异无统计学意义(P＞0.05);3组HSC的p130Cas蛋白表达比较,Ad-shRNA/PTEN组(0.93±0.08)高于对照组(0.74±0.07)及Ad-GFP组(0.72±0.02),P＜0.05,而Ad-GFP组与对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05);3组HSC的桩蛋白mRNA表达比较,以对照组HSC的桩蛋白mRNA表达量为1,则Ad-GFP组及Ad-shRNA/PTEN组HSC的桩蛋白mRNA相对对照组的表达倍数分别为0.97倍、1.58倍,Ad-shRNA/PTEN组HSC的桩蛋白mRNA表达高于对照组及Ad-GFP组(P＜0.05),对照组与Ad-GFP组之间差异无统计学意义(P＞0.05);3组HSC的桩蛋白蛋白表达比较,Ad-shRNA/PTEN组(0.91±0.05)高于对照组(0.46±0.03)及Ad-GFP组(0.50±0.04),P＜0.05,而对照组与Ad-GFP之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PTEN表达下调可显著增强体外活化HSC的P130Cas及桩蛋白信号转导活性.