目的 研究桂枝麻黄各半汤对甲型流感病毒FM1株感染小鼠RLH信号通路的影响,探讨其抗病毒的作用机制.方法 将8周龄的SPF级C57BL/6小鼠和敲除基因的MAVS-I-/-小鼠各60只,随机分为6组,即正常对照组、病毒对照组、奥司他韦(30 mg·kg-1)组、银翘散(11.2 g·kg-1)组、桂枝麻黄各半汤(9.4 g·kg-1)组、新加香薷饮(5.4 g·kg-1)组,饲养于寒环境.另取60只8周龄C57BL/6小鼠,分组同前,饲养于正常环境.采用流式细胞术检测小鼠脾脏免疫细胞Th1/Th2、Th17/Treg的比值;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;RT-PCR法检测FM1、RIG-I、MAVS及NF-κB p65的mRNA表达;Western Blot法检测RIG-I、MAVS及NF-κB p65的蛋白表达.结果 在正常环境中和寒环境中,桂枝麻黄各半汤均可明显减轻C57BL/6小鼠的肺部炎症,明显降低C57BL/6小鼠肺指数、FM1 mRNA表达水平以及肺组织的RIG-I、MAVS、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平;寒环境中桂枝麻黄各半汤还可以降低MAVS-/-小鼠的RIG-I mRNA及蛋白表达水平;桂枝麻黄各半汤等3种中药复方均可不同程度地调节Th1/Th2和Th17/Treg比值.结论 桂枝麻黄各半汤对甲型流感FM1株感染的小鼠在正常环境及寒环境均有较好的治疗作用,可能通过下调RLH信号通路的关键因子发挥抗流感作用.

广藿香醇(PA)是广藿香的主要活性成分,药理研究表明,PA具有抗炎、抗胃溃疡、抗癌、保护肺和脑损伤、抗菌、预防乳腺炎、结肠炎和动脉粥样硬化、抗光老化、治疗腹泻型肠易激综合征、抗氧化应激、血管舒张和抗伤害等多种作用,初步的作用机制研究表明,其抗炎作用与下调炎症介质的mRNA表达来抑制促炎细胞因子产生及减少细胞外调节蛋白激酶(ERK)介导的NF-JB活化等有关;抗胃溃疡、保护肺损伤和脑损伤及抗光老化作用的作用与其抗氧化和抗炎作用有关;PA抑制MV4-11细胞增殖和诱导其凋亡可能与核转录因子-κB(NF-κB),磷酸化M2型丙酮酸激酶(p-PKM2)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达发生明显改变有关;其抗人结直肠癌细胞作用可能与抑制组蛋白去乙酰化酶(HDAC)-2的表达和HDAC酶活性,以及随后下调c-myc和激活NF-κB通路有关;通过阻断表皮生长因子受体(EGFR)通路的磷酸化和激活c-Jun氨基末端激酶(JNK)诱导A549癌细胞凋亡;抗前列腺癌与线粒体细胞色素C凋亡途径激活有关;其抗病毒作用可能与调节1型螺旋酶(RLH)信号通路或与病毒蛋白或核酸以及病毒与细胞结合的位点直接结合来阻断病毒吸附细胞;其抗菌、预防乳腺炎、结肠炎和动脉粥样硬化作用机制与抗炎有很大的关系,PA的药理作用仍需进一步的研究.为了加快PA药理作用分子机制的探索和发现,扩大其应用前景,本文综述了近10年来PA的代谢、生物活性及其可能的作用机制,以期为PA的开发和应用提供参考.

目的 探究小檗碱对流感病毒感染小鼠免疫功能及炎症反应的调节作用.方法 选取60只小鼠分为正常对照组、流感病毒组和小檗碱组,20只/组;除正常对照组外各组使用流感病毒滴鼻制成流感病毒小鼠模型;使用1 mg/ml小檗碱给小鼠灌胃0.4 ml/d.检测肺泡灌洗液中白细胞总数及各类白细胞数;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理改变情况;采用流式法检测辅助性T细胞(Th) 1/Th2及Th17/调节性T细胞(Treg)比例;检测血清中白细胞介素(IL)-6、IL-4和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;使用蛋白质免疫印迹法检测视黄酸诱导基因蛋白-1 (RIG-1)、线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)及核因子(NF)-κB蛋白表达情况.结果 HE染色显示,流感病毒组肺组织炎性细胞增多、肺泡结构被破坏,小檗碱组小鼠炎性细胞数目减少.相比正常对照组,流感病毒组小鼠肺泡灌洗液中白细胞总数及各类白细胞数、Th1/Th2、Th17/Treg、IL-6、TNF-α、RIG-1蛋白、MAVS蛋白及NF-κB蛋白水平均升高,IL-4水平降低(P＜0.05);相比流感病毒组,小檗碱组小鼠肺泡灌洗液中白细胞总数及各类白细胞数、Th1/Th2、Th17/Treg、IL-6、TNF-α、RIG-1蛋白、MAVS蛋白及NF-κB蛋白水平均降低,IL-4水平升高(P＜0.05).结论 小檗碱可以通过影响RLH信号传导通路的活化,调节T淋巴细胞亚群比例,同时抑制炎症反应来实现抗流感病毒的作用.