目的 探究日本血吸虫源多肽SJMHE1对卵清蛋白(OVA)诱导的小鼠变应性鼻炎(AR)的保护作用与机制.方法 将15只雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、AR组以及AR+SJMHE1组,每组5只.正常组全程未给予任何处理;AR组在第0、7、14天腹腔给予OVA佐剂混悬液致敏,随后在第28～32天鼻腔滴注5%OVA溶液(20 μL)进行局部激发,每日1次;AR+SJMHE1组在诱导变应性鼻炎的基础上于第0、14、28天皮下注射SJMHE1乳化液进行干预.末次激发后观察各组小鼠20 min,并进行行为学(挠鼻和打喷嚏)记录;苏木精-伊红染色观察各组小鼠鼻黏膜病理学改变;酶联免疫吸附试验检测各组小鼠血清中白细胞介素(IL)-4、IL-13和IL-10含量;流式细胞术检测小鼠脾脏CD19+细胞中IL-10+细胞比例.另选6只雌性BALB/c小鼠分为空白对照组和异硫氰酸荧光素(FITC)-SJMHE1组,每组3只.空白对照组注射磷酸盐缓冲液(PBS),FITC-SJMHE1组皮下注射FITC标记的SJMHE1(FITC-SJMHE1).流式细胞技术检测FITC阳性细胞在脾脏中的含量,并观察CD19+细胞与FITC-SJMHE1 结合比例.结果 与AR组挠鼻次数(33.20±5.07)次/20 min和打喷嚏次数(中位数=8次/20 min)相比,AR+SJMHE1组小鼠挠鼻次数(17.20±6.02)次/20 min和打喷嚏次数(中位数=1次/20 min)显著下降,差异均有统计学意义(F/H=33.71、10.81,P均<0.01),且鼻粘膜病理损伤得到缓解.与AR组小鼠血清中IL-4(21.55±2.78)pg/mL、IL-13(40.80±3.54)pg/mL和IL-10(61.32±15.30)pg/mL的水平相比,AR+SJMHE1组IL-4(14.39±1.53)pg/mL、IL-13(22.49±3.32)pg/mL水平降低,IL-10(108.65±25.26)pg/mL水平升高,差异均有统计学意义(F=58.92、80.10、17.12,P均<0.01).与AR组小鼠脾脏CD19+细胞中IL-10+细胞比例(0.79±0.32)%相比,AR+SJMHE1 组IL-10+比例(3.35±0.99)%显著上调,差异有统计学意义(F=19.55,P<0.01).流式细胞术结果显示FITC-SJMHE1可分布于小鼠脾脏且与CD19+细胞结合.结论 SJMHE1对OVA诱导的小鼠变应性鼻炎有干预作用,可能与上调脾脏中Breg细胞比例有关.

目的 观察日本血吸虫热激蛋白60来源多肽SJMHE1对哮喘小鼠气道炎症的作用及其对髓源性抑制细胞 (MDSC) 的影响.方法 选择6～8周健康雄性BALB/c小鼠, 随机分为PBS组、卵清蛋白 (OVA) 组、 OVA-PBS组, OVA-SJMHE1组.OVA致敏建立支气管哮喘模型, HE染色观察小鼠肺组织病理形态学变化, ELISA测定小鼠血清中OVA特异性IgE水平, 流式细胞术测定脾脏MDSC中多形核细胞型MDSC (PMN-MDSC) 、单核细胞型MDSC (M-MDSC) 所占比例, 免疫组织化学染色法检测肺组织MDSC的表达.结果 与PBS组比较, OVA、 OVA-PBS组肺组织炎性细胞的浸润增加, 血清IgE水平升高、脾脏PMN-MDSC比例及肺组织MDSC数量增加, 脾脏M-MDSC比例无明显变化;与OVA、 OVA-PBS组比较, OVA-SJMHE1组肺组织炎症细胞浸润减少、脾脏PMN-MDSC比例及肺组织MDSC数量减少, 血清IgE水平及脾脏M-MDSC比例无明显变化.结论SJMHE1可能通过减少MDSC数量, 抑制哮喘小鼠气道炎症.

目的 观察日本血吸虫多肽SJMHE1对关节炎小鼠的毒副反应.方法 选择6～8周健康雄性DBA/1小鼠60只,依据随机数字法分为5组:正常对照(Naive)组、SJMHE1组、卵清蛋白323-339多肽(OVA323-339)组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、胶原诱导的关节炎(CIA)组,每组12只.牛Ⅱ型胶原免疫构建胶原诱导的关节炎模型小鼠(CIA组),分别在牛Ⅱ型胶原免疫的第7天,SJMHE1组、OVA323-339组、PBS组乳化剂皮下免疫处理,每隔14天免疫一次,共注射3次;皮下免疫8周后,检测小鼠脚爪关节病理改变,检测其白细胞及血清中肝、肾功能酶学指标、苏木精-伊红染色观察小鼠肝脏、肾脏、肺脏、心脏病理形态学变化.结果 关节炎小鼠脚爪病理出理大量炎性细胞的浸润及软骨破坏,但SJMHE1处理小鼠关节的炎症细胞浸润及软骨破坏最轻;OVA323-339组、PBS组、CIA组小鼠的白细胞计数显著高于Naive组[(4.12±1.13)×109/L、(3.70±1.11)×109/L、(5.10±1.27)×109/L比(1.85±0.07)×109/L](P<0.01),但SJMHE1组小鼠的白细胞计数与Naive组比较差异无统计学意义(P>0.05);各组小鼠丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、尿素氮和尿肌酐比较差异无统计学意义(均P>0.05);SJMHE1处理小鼠8周后,小鼠肝脏、肾脏、肺脏、心脏均表现出正常的组织学形态.结论 SJMHE1可以抑制关节炎小鼠炎症,但不引起小鼠肝、肾功能损伤,不引起小鼠重要脏器的病理学改变,安全性较好.

目的 探索日本血吸虫热激蛋白来源多肽SJMHE1对辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的调控以及在小鼠过敏性哮喘治疗中的作用.方法 免疫磁珠法分选正常小鼠脾脏CD4+T细胞,分别加入0.5、1和1.5μg/mL的SJMHE1进行体外培养.流式细胞术检测不同SJMHE1浓度作用下Th17细胞和Treg细胞的比例,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测视黄酸相关核孤儿受体γt(RORγt)和叉头框蛋白P3(FoxP3)mRNA的表达水平.将15只6～8周龄雄性健康BALB/c小鼠依据随机数字法分为磷酸盐缓冲溶液(PBS)组、卵白蛋白(OVA)组和OVA+SJMHE1组,每组5只.构建哮喘小鼠模型,苏木精-伊红染色观察小鼠肺组织病理学变化,实时荧光定量PCR检测小鼠肺组织中白细胞介素(IL)-17A和IL-10 mRNA的表达水平.结果 在一定范围内,随着SJMHE1浓度的增加,Th17细胞的比例逐渐降低,Treg细胞的比例逐渐升高.1μg/mL和1.5μg/mL SJMHE1组RORγt mRNA低于0μg/mL SJMHE1组(0.623±0.091、0.347±0.102比1.000±0.087)(P<0.05),FoxP3 mRNA高于0μg/mL SJMHE1组(2.310±0.307、3.010±0.582比1.040±0.133)(P<0.05).与PBS组相比,OVA组小鼠肺部支气管管壁明显增厚,周围出现大量炎症细胞浸润,而OVA+SJMHE1组小鼠肺部病理学改变较OVA组明显减轻.OVA组IL-17A mRNA高于PBS组(2.500±0.266比0.998±0.054)(P<0.05),OVA+SJMHE1组低于OVA组(1.100±0.188比2.500±0.266)(P<0.05);OVA组IL-10 mRNA低于PBS组(0.498±0.085比1.050±0.141)(P<0.05),OVA+SJMHE1组高于OVA组(2.230±0.455比0.498±0.085)(P<0.05).结论 多肽SJMHE1可能通过调控Th17/Treg细胞平衡缓解哮喘小鼠气道炎症.

目的 通过注射卵清蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型并用血吸虫多肽SJMHE1干预,研究SJMHE1对白细胞介素-25(IL-25)、神经介素U(NMU)和2型细胞因子表达水平,以及2型固有淋巴细胞(ILC2)和2型辅助性T细胞(Th2细胞)的调控作用.方法 将6～8周BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组和多肽组,每组6只.正常组小鼠未给予任何干预;哮喘组和多肽组小鼠在第0、7、14天给予腹腔注射抗原混合溶液0.2 mL(含OVA 50 μg、10％氢氧化铝,溶于PBS),在第21～28天给予2.5％ OVA溶液(溶于PBS)雾化,每次至少40 min,进行哮喘激发;多肽组小鼠第0、7、14天皮下注射多肽乳化液(SJMHE1) 100 μL;第28天,安乐死法处死所有小鼠.HE染色观察小鼠肺部病理变化,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清IgE水平,用流式细胞术检测小鼠肺脏ILC2和Th2细胞比例,用荧光定量PCR检测小鼠肺组织IL-25、NMU、IL-4、IL-5、IL-13 mRNA水平.结果 哮喘模型成功建立,SJMHE1能够显著减轻哮喘小鼠肺组织炎症反应.哮喘组和多肽组小鼠血清IgE水平较正常组显著增高,差异有统计学意义(P＜0.05).与正常组比较,哮喘组小鼠Th2和ILC2细胞比例显著增高,IL-4、IL-5和IL-13 mRNA相对表达量增高,IL-25和NMU表达量均增高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与哮喘组比较,多肽组小鼠Th2和ILC2细胞比例显著减低,IL-4、IL-5和IL-13 mRNA相对表达量减低,NMU表达量减低,差异均有统计学意义(P＜0.05).相关性分析显示,IL-25和NMU呈显著正相关(r=0.874,P=0.002).结论 SJMHE1下调NMU的表达量,抑制ILC2和Th2细胞的活化和增殖,减轻哮喘小鼠炎症反应.

目的 探索日本血吸虫多肽SJMHE1 (VPGGGTALLRCIPVLDTLSTKNED)对卵清蛋白诱导的哮喘小鼠2型辅助T(Th2)细胞、2型固有淋巴细胞(ILC2)反应的干预作用和机制.方法 将6～8周龄雄性BALB/c小鼠随机分成PBS组、卵清蛋白(OVA)组、OVA-PBS组和OVA-SJMHE1组.用OVA诱导小鼠支气管哮喘模型,HE染色观察小鼠肺组织病理改变,ELISA检测小鼠血清中OVA特异性IgE水平,用血细胞计数板计数肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞总数,流式细胞术检测小鼠BALF中的Th2细胞和ILC2,用实时荧光定量PCR检测肺组织中的白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、IL-35和GATA结合蛋白3(GATA3) mRNA的表达水平.结果 与PBS组相比,OVA组和OVA-PBS组小鼠肺组织炎性细胞浸润明显,气道黏液分泌明显增多,OVA组小鼠血清中的IgE水平升高,肺组织中的IL-4、IL-5、IL-13、GATA3 mRNA的表达水平均显著升高,IL-35 mRNA的表达水平显著下降.与OVA组和OVA-PBS组相比,OVA-SJMHE1组血清特异性IgE水平无显著变化,但是肺IL-4、IL-5、IL-13、GATA3 mRNA的表达水平均显著下降,IL-35 mRNA的表达水平无显著改变;而且,BALF中Th2细胞和ILC2比例明显减少.结论 SJMHE1可通过抑制哮喘小鼠肺部Th2细胞和ILC2反应,减轻哮喘小鼠的气道炎症.

目的:探讨日本血吸虫源多肽SJMHE1对小鼠自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的干预作用及其分子机制.方法:将15只6～8周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、AIT模型组和AIT+SJMHE1组,每组5只.对照组小鼠未经任何处理;采用高碘水喂食和皮下多点注射猪甲状腺球蛋白法构建AIT小鼠模型(AIT模型组),并施加SJMHE1干预(AIT+SJMHE1组).造模28 d后,苏木素伊红(HE)染色观察各组小鼠甲状腺病理变化;化学发光法检测血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平;实时荧光定量PCR检测各组小鼠甲状腺及脾脏组织中IFN-γ和IL-10 mRNA的表达水平;ELISA检测血清中IFN-γ和IL-10含量.另选取未经任何处理的10只雌性C57BL/6小鼠,随机分为实验组和对照组,每组5只;实验组小鼠皮下输注FITC标记的SJMHE1(FITC-SJMHE1),对照组注射等量PBS,用流式细胞技术检测FITC-SJMHE1在甲状腺及脾脏组织中的分布.结果:SJMHE1可减轻AIT小鼠甲状腺组织炎症细胞浸润及滤泡结构破坏,且显著降低血清TgAb水平(P<0.01);此外,SJMHE1显著降低AIT小鼠甲状腺组织和脾脏组织中IFN-γmRNA的表达,而上调IL-10 mRNA的相对表达量(P均<0.05);且血清中IFN-γ和IL-10含量的改变趋势与mRNA一致(P<0.01和P<0.05).流式细胞技术结果显示FITC-SJMHE1分布于小鼠脾脏组织.结论:SJMHE1可显著抑制AIT小鼠甲状腺炎症反应,其机制可能与其对脾脏IFN-γ和IL-10的调节有关.