Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) has become the third-leading cause of death worldwide, which is a severe economic burden to the healthcare system. Chronic bronchitis is the most common condition that contributes to COPD, both locally and systemically. Neutrophilic inflammation predominates in the COPD airway wall and lumen. Logically, repression of neutrophilia is an essential fashion to COPD treatment. However, currently available anti-neutrophilic therapies provide little benefit in COPD patients and may have serious side effects. Thus, there is an urgent need to explore an effective and safe anti-neutrophilic approach that might delay progression of the disease. Sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin (Siglec)-9 is a member of the Siglec cell surface immunoglobulin family. It is noteworthy that Siglec-9 is highly expressed on human neutrophils and monocytes. Ligation of Siglec-9 by chemical compounds or synthetic ligands induced apoptosis and autophagic-like cell death in human neutrophils. Furthermore, administration of antibody to Siglec-E, mouse functional ortholog of Siglec-9, restrained recruitment and activation of neutrophils in mouse models of airway inflammation in vivo. Given the critical role that neutrophils play in chronic bronchitis and emphysema, targeting Siglec-9 could be beneficial for the treatment of COPD, asthma, fibrosis, and related chronic inflammatory lung diseases.

目的 比较18种中药多糖与唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin,Siglec-9)的亲和力以及抗炎能力,探讨中药多糖发挥抗炎作用的新机制.方法 选择18种不同药性的中药用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸法检测多糖含量,高效液相色谱法检测多糖的单糖组成,红外光谱法检测中药多糖结构.通过竞争性ELISA法检测多糖与Siglec-9的亲和力,并研究中药多糖对LPS诱导巨噬细胞炎症反应以及R848诱导中性粒细胞NETosis的影响,利用髓系细胞特异性敲除Siglec-E(Lyz2-cre:Siglec-E flox/flox)小鼠来源的原代巨噬细胞和腹腔中性粒细胞进一步明确多糖结合Siglec-9产生抗炎作用的机制.结果 中药多糖的糖含量均在55％以上,主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等组成,但单糖构成比各不相同.红外光谱检测4种代表性中药多糖均有典型的多糖吸收峰,柴胡和蒲公英多糖具有葡萄糖醛酸结构.枸杞和黄芪多糖与Siglec-9的亲和力,对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应和R848诱导的中性粒细胞NETosis反应无显著抑制作用.柴胡和蒲公英多糖与Siglec-9亲和力较强(P<0.01),能够显著抑制上述炎症反应,但其抗炎作用在髓系细胞特异性敲除Siglec-E基因小鼠来源的巨噬细胞和中性粒细胞中消失.结论 中药多糖与Siglec-9的亲和力有潜力成为研究中药抗炎作用的新的现代药理学机制.

目的:利用高通量测序平台研究胰腺黏液性囊腺癌 (PMCC) 组织中基因突变的分布特点及其临床意义.方法:收集2012年1月至2016年12月经外科手术切除的4例PMCC患者癌及癌旁组织石蜡标本, 通过Illumina Hiseq 2500平台进行二代基因测序 (NGS), 结合患者临床病理资料分析PMCC患者癌组织的基因突变特征.结果:在4个PMCC样本中, 均检测到7个高频突变基因 (SMG), 分别是KRAS、AHNAK2、MUC16、MUC17、MUC19、MUC3A和MUC4.3个样本中检测到24个SMG, 分别为ADAMTS9、ALDH3B1、CARD14、CSMD3、MKI67、OR1N2、PKHD1、PLCE1、RTL1、SIGLEC12、CCDC168、CEP295、CUBN、DST、HRNR、LAMA5、OR10G4、OR2T4、PLEKHG4B、RP1L1、SLC15A5、SVEP1、TAS1R1和TNRC18.所有样本中均检测到KRAS驱动基因突变, 其中3例检测到KRAS的K12热点突变, 另1例检测到KRAS的D33E非热点突变.结论:PMCC患者的高突变KRAS和MUC家族, 可能成为PMCC精准治疗的潜在靶点和生物标志物.

目的 探讨血小板表面Siglec-9聚糖配体表达水平在缺氧条件下的变化及其对血小板活化功能的影响.方法 鉴定血小板表面表达的Siglec-9/E聚糖配体,并加入唾液酸酶处理血小板,分为对照组和唾液酸酶组;对24只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠和血小板进行缺氧处理,分为对照3 d组、缺氧3 d组、对照7 d组和缺氧7 d组(n=6);将健康志愿者全血分离提取血小板放置于缺氧箱,分为对照组、缺氧48 h组、唾液酸神经节甘脂(Ganglioside GT1b,GT1b)组和奥司他韦组(n=3).采用流式细胞术检测血小板上Siglec-9/E配体、神经氨酸酶1(Neuraminidase-1)等表达,以及二磷酸腺苷(ADP)、胶原和凝血酶刺激后血小板活化标记物CD62p的表达水平;利用髓系细胞条件性6只6～8周龄雄性Siglec-E基因敲除小鼠(Lyz2-cre:Siglec-Eflox/flox)血小板验证Siglec-E对血小板活化的抑制作用.结果 相对分子质量约为130×103的Siglec-9/E配体在血小板表面广泛表达且具有唾液酸末端的聚糖结构;与对照7 d组相比,缺氧7 d组小鼠外周血血小板上该配体表达显著降低18.03％(P＜0.05),CD62p表达在ADP、胶原和凝血酶刺激下显著增高(P＜0.01),缺氧48 h组培养的血小板上该聚糖配体出现了相同改变(P＜0.01);与野生型比较,敲基因小鼠血小板在ADP、胶原和凝血酶刺激下CD62p水平显著增高(P＜0.01);Siglec-9/E特异性配体GT1b处理能够逆转缺氧导致的血小板异常活化(P＜0.05);神经氨酸酶抑制剂能够阻断缺氧导致的Siglec-9配体表达降低(P＜0.05).结论 缺氧激活NEU1降低Siglec-9/E聚糖配体表达,减弱了 Siglec-9/E途径抑制血小板活化的能力,导致血小板功能异常活化.