目的:观察并分析象限性视网膜色素变性（sector RP）的致病基因及临床表型。方法:回顾性临床研究。2021年4月于武汉大学人民医院眼科就诊的sector RP一家系的1例患者（先证者）及其父母纳入研究。详细询问病史并行最佳矫正视力（BCVA）、眼底彩色照相、自身荧光（AF）、视野、光相干断层扫描（OCT）、视网膜电图（ERG）、荧光素眼底血管造影（FFA）、吲哚青绿血管造影（ICGA）检查。采集先证者及其父母的外周静脉血3 ml，提取全基因组DNA。全外显子测序，采用Sanger测序及实时定量聚合酶链反应对变异位点进行验证，并进行生物信息学分析和共分离分析。结果:先证者男，17岁。双眼视力渐进性下降2年。双眼BCVA均为0.4；视网膜血管变细，黄斑区营养不良，无明显色素沉着；眼底AF检查，鼻下象限视网膜变性呈斑驳影，黄斑呈"花瓣状"强AF；视野检查，双眼对称性颞上方视野缺失；OCT检查，中心凹区域以外光感受器层消失；ERG检查，暗适应波幅降低、明适应呈熄灭状态；FFA和ICGA检查，视盘周围及下方视网膜色素上皮层萎缩。其父母眼部表型正常。基因检测结果显示，先证者 SPATA7基因第10号外显子存在一错义突变c.1112T>C（p.Ile371Thr），导致编码的SPATA7蛋白第371号氨基酸由异亮氨酸变成苏氨酸；其母亲携带c.1112T>C杂合突变。根据美国医学遗传学和基因组学学院（ACMG）遗传变异分类标准与指南，该变异为意义不明确变异。同源染色体存在一来源于父亲的拷贝数变异，导致 SPATA7基因第10号外显子缺失。根据ACMG指南，该变异为可能致病变异。 结论:sector RP可累及黄斑，导致黄斑营养不良； SPATA7基因c.1112T>C（p.Ile371Thr）错义突变可能是本家系的致病原因。

目的 对1个常染色体显性遗传的视网膜色素变性家系进行变异分析,寻找该家系的致病基因.方法 收集该家系临床资料,提取10名家系成员(5例患者,5例正常人员)及30例正常对照外周血DNA.对家系中3例患者及1例正常人员进行全外显子组测序,采用Sanger测序对候选致病基因位点进行验证.结果 通过查阅资料将测序结果中的SPATA 7、HMCN 1、RHO作为首批候选基因进行Sanger测序,结果显示,家系中5例患者均存在视紫红质基因RHO第3个外显子c.560G>A(p.Cys187Tyr)杂合变异,而5例正常的家系成员及30例正常对照中均未检测到此变异.结论 视紫红质基因RHO c.560G>A(p.Cys187Tyr)杂合变异为该家系视网膜色素变性的致病原因,变异位点的发现为该家系的遗传咨询和产前诊断提供参考依据.

目的 构建小鼠Spata7基因视网膜内敲除模型,探讨Spata7基因突变导致光感受器细胞凋亡的机制.方法 以腺相关病毒(AAV)为载体搭载CRISPR/Cas9系统,注射1μL AAV病毒混合液(3×1013 vg/mL)于出生14 d小鼠视网膜中,对Spata7基因进行视网膜内特异性敲除.1个月后行视网膜眼底照相观察AAV感染效率;定量PCR测定敲除效率;视觉电生理检测光感受器细胞功能;免疫荧光实验探究Spata7基因功能.结果 AAV有效搭载CRISPR/Cas9系统进入视网膜内并对Spata7基因进行敲除,敲除效率为54％.小鼠光感受器细胞大量死亡,导致整体光感受器细胞功能明显下降.敲除后,视紫红质无法被转运到光感受器细胞外节,引起明显的内质网应激.结论 Spata7基因敲除导致视紫红质蛋白运输到外节受阻而停留在内质网,并造成内质网应激,是导致光感受器细胞大量死亡的重要原因.

目的 应用生物信息学方法研究非梗阻性无精子症(NOA)的关键微小RNA(microRNAs,miRNAs)和差异表达基因,为非梗阻性无精子症的病因分析提供新的思路.方法 在PubMed、Embase和Web of Science中筛选、提取并整合文献报道的NOA相关的miRNAs,并利用联川生物云平台预测靶基因.检索NCBIGEO数据库中的非梗阻性无精子症基因芯片数据,获得GSE145467和GSE108886数据集并进行GEO2R在线分析,得出NOA相关的差异表达基因,并与预测的靶基因取交集获得最终的差异表达基因.运用DAVID对差异表达基因进行GO富集和KEGG通路分析,应用STRING构建差异表达基因相关的蛋白质互作网络.结果 共检索到5条差异表达miRNAs,其中上调表达1条为miR-10b-5p,下调表达4条分别为miR-34b-5p、miR-34b-3p、miR-34c-5p和miR-449a.共得出最终差异表达基因868个,其中上调基因776个,下调基因92个.GO富集结果显示,差异基因参与的生物过程(BP)主要包括纤毛组装、精子轴丝组装、纤毛依赖性细胞运动、顶体组装、精子发生、细胞蛋白质代谢过程等;细胞组成(CC)主要包括活动纤毛、轴丝、精子鞭毛、中心粒等;分子功能(MF)主要包括蛋白质结合、纤毛蛋白轻链的结合和蛋白质稳定化等.KEGG相关通路涉及卵巢类固醇激素生成、多个物种长寿调控途径、扩张型心肌病、内分泌抵抗、孕酮介导的卵母细胞成熟等.通过cytoscape分析前20位的hub基因分别为TEKT3、EFHC1、DYNLL2、DNAH2、CETN1、SPATA7、ASRGL1、CCDC146、PLCZ1、SPAG16、DNAL1、EFCAB11、SPA4L、LIN7A、TEKT1、FXR1、RPGRIP1、DPY19L2、DDX25、ZC3H14.结论 本研究鉴定的miRNAs、hub基因和相关通路,在精子发生过程中发挥着重要的作用,可为后续拓展研究NOA的病因机制提供参考靶点.