目的:研究外泌体负载的枸杞miRNA(Lb-miR2911)药物通过跨界调控Wnt/β-catenin信号通路对非梗阻性无精子症(NOA)大鼠模型生精功能恢复的影响.方法:4 周龄雄性SD大鼠30 只,采用白消安腹腔注射方法构建NOA模型,造模5 周后将模型大鼠随机分为模型组(MC)、Lb-miR2911EXO治疗组(Lb-miR2911EXO)、外泌体空载治疗组(Sham),每组10 只.MC组NOA模型大鼠自然恢复,无特殊处理;Lb-miR2911EXO组NOA模型大鼠,睾丸生精小管注射外泌体包被Lb-miR2911 药物(0.1 mg/kg),1 次/周,共治疗 3 次;Sham组NOA模型大鼠,睾丸生精小管注射外泌体空载药物(0.1 mg/kg),1 次/周,共治疗3 次.另取10 只同龄正常健康SD大鼠作为正常对照组(NC).治疗后第2、6 周采用RNA FISH技术观察Lb-miR2911 药物在睾丸组织中的摄取及代谢变化;治疗后 12周采用转录组测序分析结合 Western 印迹、RT-PCR 方法检测各组大鼠睾丸组织中细胞增殖、精子发生及Wnt/β-catenin信号通路的基因表达;睾丸组织形态学及精子质量分析比较各组大鼠生精功能恢复情况;通过组织形态学分析结合血清TNF-α、IL-1β、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)等指标检测评估Lb-miR2911 外泌体药物对大鼠组织器官毒性.结果:治疗12 周后睾丸组织形态学分析发现Lb-miR2911EXO组大鼠睾丸组织各层次生精细胞排列规则,管腔中可见大量成熟精子,与Sham组比较,Johnsen评分显著增加(P<0.05),睾丸重量、睾丸指数、精子浓度和精子活力显著增加(P<0.05);转录组测序分析结合Western 印迹、RT-PCR方法证实,与MC组相比,Lb-miR2911EXO组DACT3 基因表达下调(P<0.05),而DVL2、β-catenin表达上调,同时p-DVL2及β-catenin(nucleus)蛋白含量增加(P<0.05);细胞增殖相关基因CCND1、CCNE1、CCNE2 mRNA表达上调(P<0.05);精子发生相关基因 DMC1、CCR6、JAM2、KLC3 表达上调(P<0.05);组织器官毒性检测表明:治疗后Lb-miR2911EXO组大鼠肺部、肝脏、肾脏组织未见病理性变化,与NC组比较血清TNF-α、IL-1β、AST、ALT、肌酐或尿素氮等水平未见升高(P>0.05).结论:外泌体负载的Lb-miR2911 药物通过跨界调节DACT3/Wnt/β-Catenin信号通路促进了NOA大鼠生精功能恢复.

本文报告1例无精子症和特发性睾丸微石症合并炎症患者的诊治经过。24岁不育男性患者因睾丸外伤后出现疼痛和睾丸萎缩就诊，经检查诊断为特发性睾丸微石症（TM）伴炎症，精液分析提示非梗阻性无精子症。睾丸切开组织活检病理显示生精小管纤维化、萎缩、钙化灶，未见到精子。TM相关的基因SLC34A2的突变分析未发现致病性变异。患者接受药物治疗，获得精子并自然生育，建议定期睾丸自检和随诊。本病例的管理经验可能为处理类似复杂情况提供参考。

目的:探讨由腮腺炎性睾丸炎所导致的非梗阻性无精子症（NOA）患者行同周期显微睾丸取精（microTESE）结合卵胞质内单精子显微注射（ICSI）治疗的临床结局。方法:回顾性分析2013年12月至2019年10月期间在西北妇女儿童医院生殖中心接受同周期microTESE结合ICSI治疗的有腮腺炎病史的NOA患者，根据是否合并睾丸炎分为合并睾丸炎NOA患者（合并睾丸炎组）和未合并睾丸炎NOA患者（未合并睾丸炎组）2组，观察这2组在实施同周期microTESE结合ICSI治疗后的临床结果。结果:52例既往有腮腺炎病史的NOA患者实施了microTESE手术，其中检见精子26例，总精子获得率（SRR）为50.0%。合并睾丸炎组SRR为94.4%（17/18），未合并睾丸炎组SRR为26.5%（9/34），组间比较差异有统计学意义（ P<0.001）。检见精子患者尝试ICSI治疗，每取卵周期首次移植即临床妊娠16例，临床妊娠率为61.5%（16/26）。合并睾丸炎组和未合并睾丸炎组的临床妊娠率和早期流产率差异均无统计学意义［58.5%（10/17）比66.7%（6/9）， P=0.696；20.0%（2/10）比16.7%（1/6）， P=0.868］。实验室数据中，合并睾丸炎组和未合并睾丸炎组的双原核率差异有统计学意义（73.9%比57.0%， P=0.006），而优质胚胎率组间比较差异无统计学意义（44.2%比56.8%， P=0.144）。 结论:腮腺炎性睾丸炎NOA患者的SRR较高，通过同周期ICSI-microTESE治疗的临床效果良好。

目的:利用Meta分析系统评价雌激素受体β(ERβ)的Rsa I(rs1256049)和Alu I(rs4986938)位点基因多态性与非梗阻性无精子症(NOA)的相关性。方法:检索国内外各数据库关于ERβ与NOA的相关文献，其中国外数据库包括PubMed、Medline、Embase、Web of Science、Cochrane Library，国内数据库包括中国知网、万方数据库，检索时间从建库至2020年10月1日。利用STATA 12.0软件计算优势比及95%置信区间(95% CI)评价其相关性，并进行异质性、敏感性和发表偏倚分析。 结果:共纳入5篇病例对照研究，其中病例组702例，对照组1 323例。对于Rsa I(rs1256049)基因位点，G vs. A( OR＝0.580，95% CI：0.380~0.900)、GG vs. AG+AA( OR＝0.560，95% CI：0.360~0.860)、GG vs. AG( OR＝0.569，95% CI：0.374~0.894)三种模型结果均与NOA具有明显的相关性(均 P<0.05)，提示G等位基因是NOA的保护性因素，A等位基因可增加NOA风险，GG和GA基因型可降低NOA的风险。Alu I(rs4986938)基因多态性与NOA均无相关性(均 P>0.05)。 结论:Rsa I(rs1256049)基因位点多态性与NOA具有明显的相关性，其中A等位基因可增加NOA风险，而Alu I(rs4986938)基因位点多态性与NOA无相关性。

目的:探究基于PERMA模式的心理干预模式对睾丸切开取精术患者负性情绪、幸福指数及并发症的影响效果。方法:依照患者及家属护理意愿，将2020年1月至2021年3月期间河南省人民医院收治的238例睾丸切开取精术患者分成两组。对照组113例行常规护理，观察组125例在此基础上行基于PERMA模式的心理干预模式。观察两组干预前后负性情绪、幸福指数及并发症发生率。结果:观察组干预后贝克焦虑量表(BAI)和贝克抑郁量表(BDI-21)评分均优于对照组( t＝10.240、13.088， P<0.05)；观察组干预后幸福感指数量表(WBIS)评分优于对照组( t＝8.386， P<0.05)；观察组术后并发症发生率0.80%低于对照组7.10%( χ2＝4.822， P<0.05)。 结论:睾丸切开取精术患者围术期开展基于PERMA模式的心理干预模式，有利于消除患者负性情绪，提高患者幸福指数，有效降低术后并发症，对加快患者术后身体恢复、提高患者生活质量具有重要意义。

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA，LncRNA）AC000061.1调节 CFTR基因表达在非梗阻性无精子症（nonobstructive azoospermia，NOA）发病机制中的作用。 方法:基因芯片检测梗阻性无精子症（obstructive azoospermia，OA）组（50例）、NOA组（50例）及对照组（50例）患者的睾丸组织中差异表达的LncRNA 并对其对应的靶向mRNA进行生物信息学分析，用qRT-PCR和Western blotting法检测三组患者的睾丸组织凋亡基因 Bcl-2表达差异。qRT-PCR验证三组患者睾丸组织、血清、精浆中LncRNA AC000061.1和 CFTR mRNA表达水平。酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清和精浆中CFTR蛋白浓度。构建LncRNA AC000061.1过表达（H-LncRNA组）、沉默（Si-LncRNA组）及空载对照组载体转染至睾丸癌细胞系（NTERA-2），qRT-PCR验证LncRNA AC000061.1及 CFTR mRNA的表达，Western blotting检测CFTR蛋白水平，CCK-8检测细胞增殖能力，流式细胞术及TUNEL凋亡试剂盒检测细胞凋亡率。 结果:芯片检测和qRT-PCR显示，与对照组相比，NOA组睾丸组织LncRNA AC000061.1和 CFTR表达降低（ P=0.033， P=0.042），OA组LncRNA AC000061.1表达无差异， CFTR低表达（ P=0.039）；OA组和NOA组凋亡基因 Bcl-2表达水平依次增高（ P=0.031， P=0.008）。三组血清中LncRNA AC000061.1 mRNA和 CFTR mRNA及蛋白表达水平差异均无统计学意义（ P均>0.05）。在精浆中，与对照组相比，NOA组和OA组LncRNA AC000061.1和 CFTR mRNA及蛋白含量依次降低（ P=0.002， P=0.038和 P=0.006， P=0.026），且LncRNA AC000061.1与 CFTR mRNA呈正相关（ r=0.169， P=0.039）。质粒转染NTERA-2细胞后，沉默Si-LncRNA组LncRNA AC000061.1 mRNA及 CFTR mRNA和蛋白表达均降低（ P=0.005， P=0.003），过表达H-LncRNA组LncRNA AC000061.1 mRNA及 CFTR mRNA和蛋白表达均显著增高（ P=0.002， P=0.009）。沉默Si-LncRNA组细胞增殖能力显著下降（ P=0.003），细胞凋亡率明显增高（ P=0.001）；过表达H-LncRNA组细胞增殖能力增加（ P=0.017），细胞凋亡率降低（ P=0.017）。 结论:NOA睾丸组织中LncRNA AC00006.1通过调控 CFTR基因表达引发细胞增殖与凋亡的异常，可能参与NOA的发病机制。

目的:评价显微镜下睾丸切开取精术（micro-dissection testicular sperm extraction，micro-TESE）结合卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）技术的治疗效果，指导无精子症因子（azoospermia factor，AZF）c区缺失导致的非梗阻性无精子症（non-obstructive aoospermia，NOA）的临床诊治。方法:通过回顾性研究分析了自2015年1月至2019年12月期间于北京大学第三医院生殖医学中心因AZFc缺失所致NOA行非同步micro-TESE患者的临床资料，随访了手术成功获取精子的患者行ICSI助孕的临床结局，包括受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率和活产率等。结果:共47例AZFc缺失NOA患者行非同步micro-TESE，28例术中成功发现精子，获精率（sperm retrieval rate，SRR）为59.6%（28/47），术后25例冷冻保存精子。15例后期行解冻精子-ICSI助孕，14例找到足够精子行ICSI助孕。14个解冻精子-ICSI周期后进行了11个周期移植，1例成功活产1子；后11例患者进行第二次同步手术且均成功发现精子，行11个新鲜精子-ICSI周期和11个周期移植，3例成功活产，生育1子2女。结论:AZFc缺失NOA患者有较大的概率通过micro-TESE在睾丸中成功获取精子，并结合ICSI孕育具有自己生物学特征的子代，对首次非同步方案使用冷冻精子ICSI助孕失败的患者，可考虑第二次同步手术、使用新鲜精子进行ICSI，以提高精子的利用率和最终的活产率。

非梗阻性无精子症（non-obstructive azoospermia，NOA）是因精子生成障碍所致的复杂性生殖系统疾病。近年来随着测序技术的广泛应用，精子发生中一些关键基因被不断挖掘。这些基因中涉及减数分裂前后变化的基因数量最多。表观遗传修饰包括DNA甲基化、组蛋白变体参与以及非编码RNA调控等。它们在多个层面反映了NOA患者的精子发生异常。本文系统地梳理了NOA中精子发生关键基因和一些表观遗传因素的最新研究动态，为NOA临床诊断的生物学标志物开发和临床诊疗方案的优化提供新思路。

男性不育是影响生殖健康的重要问题，由于致病因素和发病机制复杂，临床上针对非梗阻性无精子症等不明原因的男性不育症往往缺乏特异性治疗措施。随着生殖细胞体外诱导培养的技术的发展，研究者们希望利用无精子症患者源性的多能干细胞体外培养出自身具有功能性的精子，从而治疗男性不育症。体外培养生殖细胞的策略，通常是先将诱导多能干细胞分化为原始生殖样细胞，然后进一步诱导分化为单倍体精子样细胞，其培养的难点在于将二倍体生殖细胞减数分裂为单倍体的精细胞，但是目前这个问题还没有得到解决。我们对诱导多能干细胞诱导雄性配子的技术进展和原理进行综述，希望能帮助我们更好地理解体外精子发生的机制，为体外受精的临床应用提供参考。

目的:探讨血清抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）测定在评估非梗阻性无精子症（non-obstructive azoospermia，NOA）患者显微取精成功率中的价值。方法:采用回顾性病例对照研究分析2014年9月至2022年5月期间于中山大学附属第六医院生殖医学中心接受显微取精手术的502例NOA患者的临床资料，根据手术结果分为获精组和未获精组，根据取精术中生精小管是否出现可辨别的差异分为差异可辨组和差异不可辨组，比较各组年龄、睾丸体积、血清AMH以及卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）、睾酮水平的差异，根据NOA病因分为睾丸炎组（特发性或腮腺炎继发）、AZFc 区基因缺失组、隐睾下降固定术后组、克氏综合征（Klinefelter’s syndrome，KS）组、特发性 NOA组，比较不同病因NOA患者获精率（sperm retrieval rate，SRR）与AMH水平的差异。结果:270例患者成功获取到精子，SRR为53.8%；获精组AMH水平显著低于未获精组［0.81（0.16，3.26）μg/L比1.37（0.21，4.84）μg/L， P<0.001）］，两组间年龄、睾丸体积、FSH、睾酮水平差异均无统计学意义（均 P>0.05）。不同病因NOA的血清AMH水平差异有统计学意义（ P<0.001），睾丸炎、AZFc缺失、隐睾下降、KS和特发性NOA的AMH水平分别为0.15（0.01，0.41）μg/L、5.71（3.57，8.26）μg/L、2.29（1.36，3.81）μg/L、0.15（0.05，0.39）μg/L、2.46（0.75，5.49）μg/L。在特发性NOA患者中，显微取精获精组的年龄高于未获精组［（35.2±8.9）岁比（32.5±5.5）岁， P=0.010］，睾酮、AMH水平显著低于未获精组［（3.1±1.4）μg/L比（3.7±2.1）μg/L， P=0.029；1.63（0.35，3.84）μg/L比3.00（1.20，6.68）μg/L， P=0.001］，两组睾丸体积与FSH水平差异均无统计学意义（均 P>0.05）；AMH水平对显微取精SRR的受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析，AMH切点值为2.96 μg/L、敏感度为0.710、特异度为0.523、曲线下面积（area under the curve，AUC）为0.649。生精小管差异可辨组的AMH水平显著低于差异不可辨组［0.55（0.12，2.05）μg/L比2.99（0.76，6.11）μg/L， P<0.001）］，而SRR高于差异不可辨组［75.9%（236/311）比17.8%（34/191）， P<0.001］。 结论:对NOA患者实施显微取精时，低AMH水平病例更易于观察到生精小管之间的差异，并有更好的SRR，测定AMH的价值在特发性NOA患者中尤其明显。