目的:报告1例硫胺素代谢功能障碍综合征5型患儿的临床表现及基因特征。方法:收集患儿的临床表现、实验室检查和家族史等资料，并采集患儿及其父母外周血样，进行全外显子组高通量测序，并验证该位点变异后对其TPK1酶活性的影响。结果:患儿为4岁男孩，学龄前起病，以共济失调为首发症状。高通量测序发现其携带TPK1基因c.382G>A(p.Leu128Phe)纯合变异，既往未见报道，患儿父母分别携带该变异。人工合成的该TPK1变异序列显示，与对照组相比，TPK1基因在该位点的变异导致TPK1酶活性下降了30.9%。结论:确诊了1例硫胺素代谢功能障碍综合征5型患儿，丰富了TPK1基因变异数据库。

目的:探讨一个硫胺素焦磷酸激酶缺乏症(thiamine pyrophosphokinase deficiency，TPKD)家系的临床和基因变异特点。方法:分析TPKD家系的临床表现、影像学特点，对家系成员行全外显子测序。结果:先证者，女，2岁8个月出现发作性共济失调伴肌张力障碍，此后反复发作共济失调7～8次。11岁时因病情再次发作且逐渐加重就诊，入院后第4天死亡。MRI示脑实质弥漫对称性损害及脊髓病变。胞兄有类似症状，6岁时去世。父母系近亲婚配。基因测序显示先证者 TPK1 c．161C>T纯合突变，关联疾病为TPKD；患儿父亲、母亲及姐姐均为c.161C>T杂合突变。 结论:对于婴幼儿期起病，呈发作性脑病、共济失调、肌张力障碍等表型的患儿，早期进行基因检测明确诊断，可以指导治疗及遗传咨询。

目的 探讨灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌CA23 毒力因子的作用和潜在机制.方法 微量稀释法、棋盘法及时间-杀菌曲线测定灯台叶总碱与氟康唑联用效果;荧光探针测定菌株外排泵功能,实时荧光定量PCR法检测耐药相关基因表达;倒置显微镜、扫描电镜观察菌丝诱导培养基中菌株形态转换,RT-qPCR法检测菌丝相关基因表达,添加外源性cAMP验证;卵黄琼脂平板法检测菌株胞外磷脂酶活性.结果 灯台叶总碱与氟康唑对耐药白念珠菌具有较强的协同抑菌作用;联用处理并不能显著抑制菌株的外排功能,与耐药相关基因表达结果一致;两药联用可以抑制在SD和Spider诱导培养基中菌丝生长,且下调菌丝相关基因CYR1、ALS3、RAS1、BCR1、ALS2、TPK2 表达,添加外源性cAMP后,能恢复部分药物联用引起的菌株形态变化;两药联用能抑制胞外磷脂酶活性,且对灯台叶总碱存在剂量依赖性.结论 灯台叶总碱与氟康唑联用对氟康唑耐药株表现为协同抑菌作用,其机制与调节Ras1-cAMP-PKA信号通路抑制菌丝生长,并降低胞外磷脂酶活性从而影响耐药白念珠菌毒力因子有关.

目的 研究携带缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和角质细胞生长因子(KGF)的重组减毒沙门菌(TPHK)对大鼠肠黏膜氧化应激损伤的防护作用.方法 雄性Wistar大鼠126只,随机分为NC组(6只)及TC、Ty21a、TPH、TPK、TPHK组,各实验组又分为2、6、12、24 h四个时间点,每个时间点6只.建模前给予相应基因药物109 CFU/只,共4次,隔日1次,随后建立肠缺血再灌注(I/R)模型.检测各组小肠组织HIF-1α和KGF蛋白表达,并进行组织病理学观察,比较各组小肠组织和血浆超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量.结果 与NC组比较,各实验组小肠组织HIF-1α表达水平在I/R后6 h时达峰值,且TPHK组HIF-1α表达水平在6、12、24 h高于TPK和TPH组(P<0.05,P<0.01);与NC组比较,TPK和TPHK组小肠组织KGF表达水平在I/R后6 h时达峰值,后开始下降,TPHK组小肠组织KGF表达水平在I/R后2、6、24 h高于TPK和TPH组(P<0.05).I/R后24 h组织病理学观察显示,TPHK组较其他实验组黏膜和腺体结构完整,隐窝深度深,炎性细胞浸润少,黏膜固有层结构近似正常.与NC组比较,各实验组小肠组织和血浆SOD活力在I/R后6 h达峰值,TPHK组SOD活力在I/R后6、12、24 h高于TPK和TPH组(P<0.05);I/R后6 h时各实验组小肠组织和血浆MDA含量达峰值,TPHK组小肠组织和血浆MDA含量在I/R后6、12、24 h低于TPK和TPH组(P<0.01).结论 TPH、TPK和TPHK对大鼠肠I/R应激致肠黏膜氧化应激损伤有较好防护作用,其中TPHK抗氧化应激作用优于TPH与TPK,KGF和HIF-1α对氧化应激损伤有协同防护作用.