目的 构建单纯痕疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27和UL29双基因shRNA慢病毒表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法 针对HSV-2 UL27、UL29基因,各筛选干扰效率最佳的shRNA片段相连接,构建双基因共表达慢病毒载体,并转染HEK293细胞作为干扰组,另设空白对照组(不做任何处理)和阴性对照组(转染不针对任何基因的慢病毒载体).转染48或24 h后接种HSV-2,RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中目的基因mRNA和蛋白的表达水平,MTT法检测各组细胞的存活率.结果 干扰组UL27和UL29基因mRNA的表达抑制率可达(78.61±2.14)％和(84.86±1.52)％,同时gB和ICP8蛋白的相对表达量明显下降(P均＜0.05),细胞的存活明显率提高(P均＜0.05).结论 构建的HSV-2 UL27、UL29双基因shRNA重组慢病毒表达载体能在HEK293细胞中表达,为后续HSV-2的基因治疗奠定了实验基础.

目的 探讨延胡索酸水合酶(fumarate hydratase,FH)缺陷型子宫平滑肌瘤(fumarate hydratase-deficiency in uterine leio-myomas,FH-DUL)的临床病理学特征.方法 回顾性分析29例FH-DUL的临床病理学特征及免疫表型等,并复习相关文献.结果 患者年龄27～52岁,平均43岁.镜检:肿瘤有两种类型,经典型占62.1％(18/29),可见数量不等的核大深染细胞和局灶或多灶的奇异型细胞,有嗜酸性核仁及核周空晕;类似"普通型平滑肌瘤(usual leiomyomas,UL)"样型占37.9％(11/29),细胞轻度异型性,无明显嗜酸性大核仁.免疫表型:28例FH完全缺失,1例FH和29例2-琥珀酸-半胱氨酸(2-succino-cyste-ine,2SC)均弥漫阳性.1例行分子遗传学检测,未检测到FH基因胚系突变.29例均行手术切除,术后均无瘤生存.结论 FH-DUL属于子宫平滑肌瘤的罕见亚型,诊断依赖于临床影像学、病理形态学及免疫表型,必要时行FH基因检测辅助诊断,需与UL及其它子宫间叶源性肿瘤鉴别,治疗以手术切除为主,预后较好.

目的 探讨延胡索酸水合酶缺陷型子宫平滑肌瘤(fumarate hydratase-deficient uterine leiomyomas,FH-d UL)的临床病理学特征.方法 应用组织芯片结合免疫组化延胡索酸水合酶(fumarate hydratase,FH)和S-(2-琥珀酸)-半胱氨酸[S-(2-succi-no)-cysteine,2SC]对1389例子宫平滑肌肿瘤(uterine smooth muscle tumors,USMT)进行检测,筛查FH-d UL,采用Sanger测序技术检测FH-d UL中FH基因突变情况,回顾性分析其临床病理学特征,并复习相关文献.结果 1389例USMT中筛选出40例FH-d UL,其在不同病理类型USMT中的发生率从高到低依次为子宫平滑肌瘤伴奇异核(leiomyomas with bizarre nuclei,LBN)(55.6％,10/18)、恶性潜能未定的平滑肌肿瘤(smooth muscle tumor of uncertain malignant potential,STUMP)(12.5％,1/8)和普通型子宫平滑肌瘤(2.2％,29/1324).FH-d UL患者平均年龄为(35.7±8.3)岁,55％(22/40)有临床症状,60％(24/40)为多发性(≥2枚)肌瘤,肌瘤最大径0.3～13.1 cm.组织学上,FH-d UL均表现出一个或多个FH-d形态学.免疫表型:35例为FH-/2SC+,5例为FH+/2SC+.Sanger测序结果显示,5％(2/40)测序失败,23.7％(9/38)检测到体细胞突变.随访期内无死亡,12.5％(5/40)复发,发病年龄(<30岁)、有家族肿瘤史与患者术后的复发风险显著相关(P均<0.05).结论 FH-d UL临床少见,在形态学上与LBN有交叉重叠,联合应用FH和2SC有助于FH-d UL的筛查,但遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征的诊断尚需结合临床病史和胚系突变检测.当患者年龄<30岁、有家族肿瘤史时,需警惕其复发风险.