目的:评估改良磁珠筛选法富集胎儿游离DNA（cell-free fetal DNA，cffDNA）在无创产前检测（non-invasive prenatal testing，NIPT）中的应用价值。方法:从2017年10月至2019年12月在北京市海淀区妇幼保健院接受常规NIPT的11 000例孕妇中，回顾性纳入cffDNA浓度偏低（<6.00%），或首次检测Z值灰区（3.00~4.00），或产前介入性产前诊断确定假阳性或生后确定假阴性病例共31例。取首次常规NIPT留存的血浆标本，使用改良磁珠筛选法富集cffDNA进行NIPT（改良富集法NIPT）。采用Wilcoxon秩和检验比较改良富集法NIPT与常规NIPT测得的男胎cffDNA浓度变化。结果:31例孕妇中13例常规NIPT cffDNA浓度偏低，11例常规NIPT 13/18/21-三体假阳性（3例13-三体，4例18-三体，4例21-三体，均经介入性产前诊断证实），6例首次常规NIPT Z值灰区（复测为低风险），1例常规NIPT 21-三体假阴性（生后染色体检查证实）。使用改良富集法后，<150 bp的游离DNA（cell-free DNA，cfDNA）片段得到有效富集，21例男胎的cffDNA浓度由常规NIPT的4.43%（2.45%~17.61%）提升至改良富集法NIPT的13.46%（7.75%~36.64%），差异有统计学意义（Z=-14.22， P<0.01）。13例常规NIPT cffDNA浓度偏低者经改良富集法NIPT，均成功检出为低风险；6例Z值灰区病例及11例假阳性病例中的6例经改良富集法NIPT确定为低风险，与常规NIPT复测结果一致；1例假阴性病例确定为高风险。 结论:与常规NIPT相比，改良富集法NIPT降低了因cffDNA浓度偏低导致的检测失败率，降低了假阳性率，并成功检测出假阴性病例，显示出更高的检测成功率和更低的假阳性率。

目的:比较2种超顺磁性纯化磁珠筛选富集胎儿游离DNA(cffDNA)的技术在无创产前检测(NIPT)中的效能，探讨改良筛选富集游离DNA(cfDNA)技术的临床应用价值。方法:回顾性分析2017年12月至2022年9月在北京市海淀区妇幼保健院接受NIPT检测的26 252例孕妇的资料，根据磁珠筛选cffDNA的方法将其分为常规组(10 573例)和改良富集组(15 679例)。对NIPT提示高风险的孕妇进行介入性产前诊断。随访所有孕妇的妊娠结局。从文库片段大小、cffDNA浓度、重复检测率和临床检验方法学评价常用指标等方面比较两种方法的检测效能。结果:改良磁珠筛选富集法使游离DNA文库主峰的片段长度由常规法的294 bp减小至267 bp；cffDNA浓度由9.08%提升为21.86%( P<0.01)；重复检测率由2.02%降低至0.740% ( χ2＝83.90， P<0.01)；检测失败率由0.057%降至0.006%( P<0.05)。改良富集组在高风险及低风险人群中的复合PPV均略低于常规组(64.3%/76.1%和35.3%/45.5%)，但组间无差异。常规组检测的高风险人群中出现1例21三体假阴性，改良富集组未出现假阴性。 结论:改良磁珠筛选富集法可显著提高cffDNA的相对浓度，降低NIPT检测的失败率及复检率，从而减少cffDNA浓度低造成的假阴性，改善了NIPT检测的整体性能。

目的 通过对孕妇血浆中胎儿游离DNA(cell-free fetal DNA,cffDNA)的深度测序实现无创性α-地中海贫血(--SEA型)的基因分型.方法 对cffDNA进行α-地中海贫血基因分型.于2021年11月至2022年11月通过分离来自海口市妇幼保健院、海南省妇女儿童医学中心、海南医学院第一附属医院因夫妻双方为东南亚型α-地中海贫血(--SEA/αα)而需要进行产前诊断的34例孕妇(孕12～24周,均为单胎妊娠)血浆,历经cffDNA的提取、文库构建与杂交、模板制备与富集、上机测序等一系列基于Ion Proton平台的高通量测序操作,采用多维贝叶斯概率模型方法评估胎儿患巴氏胎儿水肿综合征的概率.随后从孕妇羊水中提取DNA,利用Gap-PCR对α-地中海贫血进行基因分型,并比较cffDNA与胎儿羊水DNA α-地中海贫血基因分型的符合率.结果 34例孕妇血浆的cffDNA分型结果与对应的羊水DNA分型结果进行比较,28例的分型结果一致,4例不一致,2例因孕妇未行产前诊断无法比较,最终结果相符率为87.5％.结论 利用孕妇血浆cffDNA进行巴氏胎儿水肿综合征(--SEA/--SEA)的鉴定获得成功,其与羊水DNA分型结果具有高水平的符合率.

无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)由于规避了有创操作的潜在流产风险,且检测准确性高,一经出现就迅速在世界范围内得到广泛应用,并深刻改变了当前产前诊断的临床实践.新一代测序技术、游离DNA(cell-free DNA,cfDNA)富集扩增技术的快速发展以及新型生物信息算法的诞生进一步提高了 NIPT的性能,NIPT的检测范围从常见的染色体非整倍体扩展到全基因组范围的染色体非整倍体、染色体微缺失微重复综合征(microdeletion and mi-croduplication syndromes,MMs),而且还允许从母体血浆中检测和研究胎儿基因组,提供单基因疾病的非侵入性产前诊断.本文将对母体循环中胎儿游离DNA(cell-free fetal DNA,cffDNA)的发现、无创产前检测技术的诞生发展、临床应用进展及未来前景进行述评.