目的 探讨 circNT5 E对胃癌细胞生物学行为的影响及其可能的作用机制.方法 采用 qRT-PCR法检测胃癌组织、癌旁组织与人胃黏膜上皮细胞 GES-1、人胃癌细胞 HGC27 中 circNT5E、miR-152-3p 的表达量.双荧光素酶报告基因实验检测miR-152-3 p过表达对野生型载体 wt-circNT5 E、突变型载体 mut-circNT5 E 荧光素酶活性的影响.以HGC27 细胞为研究对象进行体外细胞实验,实验分组为 si-NC组、si-circNT5 E组、si-circNT5 E-NC组、si-circNT5E-152-3p组.CCK-8 法、平板克隆形成实验、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭能力.Western blot检测Bax、Bcl-2 蛋白表达量.结果 与癌旁组织和 GES-1 细胞相比,circNT5E 在胃癌组织和细胞中表达量升高(均P＜0.05),miR-152-3p的表达量降低(均P＜0.05);进一步机制分析提示 miR-152-3 p 是 circNT5 E的靶基因.功能实验表明敲除 circNT5 E抑制胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭的能力,诱导细胞凋亡(均P＜0.05).敲除 miR-152-3p可逆转 circNT5 E表达降低对细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用和对凋亡的促进作用(均P＜0.05).结论 circ-NT5E可通过调控miR-152-3 p介导胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡.

As a newly discovered type of RNA,circular RNAs (circRNAs) are widespread throughout the eukaryotic genome.The expression of circRNAs is regulated by both cis-elements and trans-factors,and the expression pattern of circRNAs is cell type-and disease-specific.Similar to other types of non-coding RNAs,functions of circRNAs are also versatile.CircRNAs have been reported previously to function as microRNA (miRNA) sponges,protein sponges,coding RNAs or scaffolds for protein complexes.Recently,several circRNAs have been reported to play important roles in human malignancies,including glioma.Here,we reviewed several reports related to circRNAs and glioma,as well as the potential diagnostic and therapeutic applications of circRNAs in brain cancer.In general,some circRNAs,such as circSMARCA5 and circCFH,are found to be expressed in a glioma-specific pattern,these circRNAs may be used as tumor biomarkers.In addition,some circRNAs have been found to play oncogenic roles in glioma (e.g.,circNFIX and circNT5E),whereas others have been reported to function as tumor suppressors (e.g.,circFBXW7 and circSHPRH).Furthermore,circRNA is a good tool for protein expression because of its higher stability compared to linear RNAs.Thus,circRNAs may also be an ideal choice for gene/protein delivery in future brain cancer therapies.There are some challenges in circRNA research in glioma and other diseases.Research related to circRNAs in glioma is comparatively new and many mysteries remain to be solved.

目的 探讨circNT5E对结肠癌细胞迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制.方法 选取40例2017年1月至2019年5月本院结肠癌患者癌组织及其相应癌旁组织;将结肠癌细胞HCT 116分为si?NC组、si?circNT5E组、pcDNA组、pcDNA?circNT5E组、miR?NC组、miR?506?3p组、si?circNT5E+anti?miR?NC组、si?circNT5E+anti?miR?506?3p组.实时荧光定量PCR(RT?qPCR)检测circNT5E和miR?506?3p的表达水平;显色原位杂交(CISH)检测癌组织中circNT5E表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶2(MMP?2)、基质金属蛋白酶9(MMP?9)、B细胞淋巴瘤/白血病?2(Bcl?2)、Bcl?2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证circNT5E和miR?506?3p的靶向关系.结果 与癌旁组织相比,结肠癌组织中circNT5E表达水平显著升高,miR?506?3p表达水平显著降低(P<0.05).沉默circNT5E或过表达miR?506?3p,迁移、侵袭细胞数显著降低,细胞凋亡率显著升高,MMP?2、MMP?9、Bcl?2表达水平显著降低,Bax表达水平显著升高(P<0.05).circNT5E靶向调控miR?506?3p,抑制miR?506?3p表达逆转了沉默circNT5E表达对结肠癌HCT116细胞迁移、侵袭和凋亡的作用.结论 沉默circNT5E表达可能通过上调miR?506?3p的表达抑制结肠癌HCT 116细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡.

目的 探讨环状RNA NT5E(circNT5E)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移侵袭的影响,并探讨其机制是否与调控miR-377-3p表达有关.方法 将人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)分为对照(Con)组(正常培养的细胞)、ox-LDL组(50μg/ml ox-LDL)、ox-LDL+si-NC组(转染小干扰RNA阴性对照,50μg/ml ox-LDL)、ox-LDL+si-circNT5E组(转染si-circNT5E,50μg/ml ox-LDL)、ox-LDL+miR-NC组(转染miR-NC,50μg/ml ox-LDL)、ox-LDL+miR-377-3p组(转染miR-377-3p模拟物,50μg/ml ox-LDL)、ox-LDL+si-circNT5E+anti-miR-NC组(转染si-circNT5E和anti-miR-NC,50μg/ml ox-LDL)、ox-LDL+si-circNT5E+anti-miR-377-3p组(转染si-circNT5E和anti-miR-377-3p,50μg/ml ox-LDL).实时定量PCR(RT-qPCR)检测circNT5E和miR-377-3p表达;细胞计数法、Transwell实验检测细胞活力、迁移和侵袭细胞数.双荧光素酶报告实验和RT-qPCR确定circNT5E对miR-377-3p的靶向作用.结果 ox-LDL处理的HASMCs中circNT5E表达量、细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著升高(P<0.05),miR-377-3p表达量显著降低(P<0.05).干扰circNT5E表达或过表达miR-377-3p可减弱ox-LDL对HASMCs增殖、迁移和侵袭的促进作用(P<0.05).circNT5E直接结合miR-377-3p,干扰circNT5E促进miR-377-3p表达,而过表达circNT5E抑制miR-377-3p表达(P<0.05).抑制miR-377-3p表达可逆转干扰circNT5E对ox-LDL诱导的HASMCs增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05).结论 干扰circNT5E表达可抑制ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移侵袭,其机制与上调miR-374a-3p表达有关.