背景与目的 已有的研究证明环状RNA(circular RNAs,circRNAs)在多种肿瘤发生发展中起重要作用,circUBAP2是一种促癌的circRNA,但是其在肺癌中的作用和机制尚不明确.本研究旨在探讨circular RNA UBAP2(circUBAP2)对人肺癌A549细胞体外增殖和侵袭能力的影响并初步探讨其机制.方法 应用CCK-8法检测circUBAP2表达沉默对A549细胞生长的抑制作用,采用流式细胞仪技术检测circUBAP2表达沉默对A549细胞周期和细胞失巢凋亡的影响,Transwell实验检测circUBAP2表达沉默对A549细胞侵袭能力的影响,Western blot和Real-time PCR检测CDK6、cyclin D 1、p27、c-IAP1、Bcl-2、Survivin、Bax、FAK、Rac1、MMP2的表达变化以及JNK和ERK1/2的活性,荧光素酶报告技术检测circUBAP2直接靶基因.结果 CCK-8实验结果显示circUBAP2表达沉默后,A549细胞株增殖能力受抑制;流式细胞结果显示,circUBAP2表达沉默后,细胞周期停滞在G0期/G1期,且细胞凋亡率显著增加;Transwell实验结果显示,细胞体外侵袭能力明显受到抑制.Westemblot和Real-time PCR结果显示,circUBAP2表达沉默后.CDK6、cyclin D1、c-IAP1、Bcl-2、Survivin、FAK、Rac1、MMP2等基因的表达水平显著下降,而P27和Bax的表达显著上升,而且JNK、ERK1/2的活性也受到明显的抑制,circUBAP2直接靶基因为miR-339-5p、miR-96-3p和miR-135b-3p.结论 circUBAP2在肺癌的体外增殖和侵袭中发挥重要的作用,抑制其表达,有望成为肺癌分子靶向治疗的新靶点.

Numerous circular RNAs (circRNAs) have been identified as vital regulators in various cancers.The newly reported circular RNA ubiquitin-associated protein 2 (circUBAP2) is a critical player in cell growth and metastasis in various types of cancers,although its role in colorectal cancer (CRC) has yet to be fully elucidated.We find that circUBAP2 is upregulated in CRC tissues and cell lines to induce autophagy both in vitro and in vivo.The effects of circUBAP2 on migration,invasion,and proliferation may be partially related to autophagy.Mechanistically,we uncover that circUBAP2 can directly interact with miR-582-5p and subsequently act as a microRNA sponge to regulate the expression of the miR-582-5p target gene forkhead box protein O1 (FOXO1) and downstream signaling molecules,which collectively advance the progression and metastasis of CRC.These results suggest that circUBAP2 acts as an oncogene via a novel circUBAP2/miR-582-5p/FOXO1 axis,providing a potential biomarker and therapeutic target for CRC management.

目的:分析组织环状RNA UBAP2(circUBAP2)与非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断和致癌作用相关性.方法:收集2013年1月至2019年10月于本院行原发性肺癌根治性切除术的208例NSCLC患者的肿瘤组织标本和癌旁正常组织(距离手术切缘≥5 cm)标本.随机选择3对标本采用高通量测序技术(RNA-seq)检测组织标本中circRNAs差异性表达谱.采用实时荧光定量PCR法检测组织中circUBAP2相对表达量,采用Cox风险比例回归模型及Kaplan-Meier生存曲线分析circUBAP2表达对患者生存预后的预测价值.结果:经RNA-seq确定circUBAP2在NSCLC组织及其癌旁正常组织中存在差异性表达.在包含208例样本的整体研究中,NSCLC组织circUBAP2表达显著高于在癌旁正常组织(P＜0.001),且N1/2分期、癌胚抗原(CEA)水平≥6.6 ng·ml-1、肿瘤最大直径＜4.5 cm的NSCLC组织中circUBAP2表达水平更高(P＜0.05).Kaplan-Meier生存曲线显示,NSCLC组织circUBAP2高表达者及低表达者中位总生存期分别为17.50(9.65～63.85)个月和 58.55(16.25～67.90)个月(Log-rankx2=16.709,P＜0.001).单因素和多因素 Cox 回归分析显示,血清CEA水平和NSCLC组织中circUBAP2表达是患者总生存期的独立预后因子(P＜0.001).结论:circUBAP2可作为NSCLC诊断和预后的生物标志物之一.

目的:探索circUBAP2靶向miR-2467-3p对肝癌Huh-7细胞增殖和凋亡的影响.方法:qRT-PCR测定43例肝癌组织中circUBAP2和miR-2467-3p表达.在肝癌Huh-7细胞中转染si-NC(si-NC组)、si-circUBAP2(si-circUBAP2组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-2467-3p模拟物(miR-2467-3p组),或共转染si-circUBAP2+anti-miR-NC(si-circUBAP2+anti-miR-NC组)、 si-circUBAP2+anti-2467-3p(si-circUBAP2+anti-2467-3p组),CCK-8和平板克隆实验测定细胞活性与克隆形成,Western blot测定cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡.双荧光素酶报告实验确定circUBAP2与miR-2467-3p的靶向关系.结果:43例肝癌组织中circUBAP2表达比癌旁组织升高,miR-2467-3p表达比癌旁组织减少(P<0.05).circ-UBAP2和miR-2467-3p表达与肝癌患者病理级别、FIGO分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05).干扰circUBAP2表达,Huh-7细胞活性和克隆形成数降低,cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达和凋亡率升高(P<0.05).circUBAP2靶向调控miR-2467-3p表达.miR-2467-3p过表达提高肝癌Huh-7细胞cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达和凋亡率,降低细胞活性和克隆形成数(P<0.05).下调miR-2467-3p表达逆转了干扰circUBAP2表达对肝癌Huh-7细胞增殖和凋亡的作用.结论:干扰circUBAP2表达通过靶向miR-2467-3p促进肝癌Huh-7细胞凋亡并抑制其增殖.

目的 探讨环状RNA UBAP2(circUBAP2)、环状RNA VRK1(circVRK1)在子痫前期(PE)患者血清中的表达水平及其与妊娠结局的关系.方法 选取2019 年 10 月至2022 年 8 月于石家庄市第四医院分娩的 134 例PE患者作为PE组,另选取同期分娩的 134 例健康孕妇作为健康组.比较PE组、健康组血清circUBAP2、circVRK1 表达水平及不良妊娠结局发生率.依据PE患者妊娠结局,将其分为妊娠良好组(n =94)和妊娠不良组(n =40);比较血清circUBAP2、circVRK1 表达水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circUBAP2、circVRK1 预测PE 患者妊娠结局的价值;采用Logistic 回归分析PE患者妊娠结局的影响因素.结果 PE 组患者血清 circUBAP2 表达水平低于健康组(P＜0.05),circVRK1 表达水平及总不良妊娠结局发生率高于健康组(P＜0.05).妊娠不良组PE患者收缩压、重度PE占比、血清circVRK1 表达水平高于妊娠良好组(P＜0.05).血清circUBAP2、circVRK1 预测PE患者妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为 0.869、0.686,截断值分别为 0.39、2.50,灵敏度分别为 77.5%、70.0%,特异度分别为 84.0%、63.8%.重度PE、低表达circUBAP2、高表达circVRK1 与PE患者妊娠不良结局密切相关(P＜0.05).结论 PE患者血清circUBAP2 表达水平较低,circVRK1 表达水平较高,与PE患者妊娠结局密切相关,且circUBAP2 或可成为临床预测PE患者妊娠结局的辅助指标.