目的 了解临床分离的纹带棒状杆菌对抗菌药物的敏感性及其感染或定植患者的临床特征.方法 收集福建医科大学附属泉州第一医院2020年7月—2022年9月临床分离纹带棒状杆菌72株,采用肉汤微量稀释法检测细菌对18种抗菌药物的敏感性.PCR扩增检测喹诺酮类耐药决定区相关基因gyrA并进行测序以分析氨基酸突变位点,PCR扩增核糖体甲基化酶基因ermX和氨基糖苷修饰酶基因aphA1并进行测序分析.病史资料分析纹带棒状杆菌感染或定植患者的临床特征.结果 药敏试验结果显示,所有菌株对万古霉素、利奈唑胺和达托霉素均100％敏感,对头孢曲松、环丙沙星及莫西沙星均100％耐药,对青霉素(87.5％)、头孢吡肟(95.8％)、美罗培南(95.8％)、甲氧苄啶-磺胺甲唑(90.3％)、红霉素(98.6％)和克林霉素(98.6％)的耐药率较高,对庆大霉素(25.0％)、四环素(30.6％)和利福平(23.6％)耐药率较低.PCR及DNA测序结果显示,3株纹带棒状杆菌发生gyrA基因单点突变(Ser87Val),67株发生双突变(Ser87Phe、Asp91Ala或Ser87Tyr、Asp91Ala),2株发生三位点突变(Ser87Phe、Ala88Pro和Asp91Ala),其中三位点突变是本研究首次发现的突变模式.所有的纹带棒状杆菌均检出ermX基因,aphA1基因检出率为43.1％.病史资料结果显示,72株纹带棒状杆菌主要分离自ICU(占65.2％),标本来源以下呼吸道标本为主(占91.6％),患者平均年龄(68.0±15.3)岁,感染和定植患者比例分别占72.2％(52/72)和27.8％(20/72),两组患者在住院时长≥28 d、合并脑出血、意识障碍及病情恶化方面差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 该院临床分离的纹带棒状杆菌均为多重耐药菌,感染患者预后相对较差.

目的 揭示我国临床分离的纹带棒状杆菌分子分型及耐药性,为制定纹带棒状杆菌感染防治措施提供依据.方法 采用多中心横断面研究方法,收集广东、唐山、北京地区各一家三级甲等医院在2017年10月-2018年1月间从临床标本中分离的197株纹带棒状杆菌.用微量肉汤法检测最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);聚合酶链式反应检测菌株的氨基糖苷修饰酶基因[aph(3″)-Ⅰb、aph(6)-Ⅰd、aac(6′)-Ⅰb、aadA、aph(3′)-Ⅲa以及AC(6′)-Ⅰe-APH(2″)-Ⅰa、核糖体甲基化酶基因(ermX)、核糖体保护蛋白基因(tetW)、外输泵蛋白基因(tetL)以及碳青霉烯酶基因(blaIMP、blaVIM、blaOXA-48、blaNDM和blaKPC),目的产物经测序和BLAST比对并确定其基因型;采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对菌株进行分子分型,用Bio Numerics 软件对所有实验菌株的PFGE图谱进行聚类分析.结果 99.5％的被测菌株至少对一种抗生素表现耐药;庆大霉素耐药菌株中耐药基因aph(3″)-Ⅰb、aph(6)-Ⅰd、aac(6′)-Ⅰb和aadA检出率分别为89.3％(67/75)、84％(63/75)、57.3％(43/75)和4％(3/75);红霉素以及克林霉素耐药菌株中耐药基因ermX的检出率均为88.3％(153/173);四环素和多西环素耐药菌株中耐药基因tetW和tetL的检出率分别95.5％(105/110)、97.2％(70/72)和100％(110/110)、100％(72/72).197株临床分离纹带棒状杆菌共分为82个型别,每个型别分别包含1～27株菌,其中11个型别包含的菌株数大于5株,广东的菌株优势型别为CSS01.CN0058;唐山的菌株优势型别为CSS01.CN0035、CSS01.CN0051、CSS01.CN0052和CSS01.CN0048;北京的菌株优势型别为CSS01.CN0058、CSS01.CN0070、CSS01.CN0108和CSS01.CN0015.结论 我国纹带棒状杆菌临床分离株耐药情况严峻,而且存在多重耐药菌株的院内传播,需要开展更大范围的系统监测为制定控制措施提供实验依据.

分析我国山东地区临床分离的纹带棒状杆菌对常用药物的敏感性,并对其耐药机制进行探讨.收集该省某三甲医院临床样本,用哥伦比亚血平板培养基对纹带棒状杆菌进行分离培养,用微量肉汤稀释法检测12种常用抗生素对纹带棒状杆菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC).采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对耐药菌株的耐药基因[aph(3")-Ⅰb、aph(6)-Ⅰd、aac(6')-Ⅰb,tetW,ermX,gy rA]进行扩增、测序比对,以探讨相关的耐药机制.通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)对耐药基因ermX、tetW进行定量分析,采用公式2-ΔΔCt计算基因相对表达量差异倍数.结果显示,共分离出纹带棒状杆菌83株,且均为多重耐药菌.对万古霉素、利奈唑胺表现为完全敏感;对红霉素、环丙沙星、克林霉素表现出完全耐药,对四环素的耐药率为86.7％(72/83),对庆大霉素的耐药率为38.6％(32/83);ermX基因的检出率为100％(83/83),tetW基因的检出率为88.0％(73/83),aph(3")-Ⅰb基因的检出率为36.1％(30/83),aph(6)-Ⅰd基因的检出率为37.3％(31/83),aac(6')-Ⅰb基因的检出率为15.7％(13/83).ermX和tetW基因的相对表达量均有所变化,但变化不明显.内在型耐药(cMLS)是菌株对红霉素耐药的潜在机制.结果提示,本研究调查医院的纹带棒状杆菌耐药严重,耐药谱较为广泛,须引起医院和实验室的重视.

目的 了解东莞地区痤疮患者痤疮丙酸杆菌对大环内酯-林可酰胺类耐药的基因分布情况,探讨其耐药机制.方法 分离、培养、鉴定痤疮丙酸杆菌后经药敏实验选取大环内酯类-林可酰胺类抗生素耐药菌株53株(单一耐药13株,多重耐药40株)和敏感菌株4株,进行全基因组鸟枪法重测序,与痤疮丙酸杆菌标准株ATCC 6919进行对照,分析本地区痤疮丙酸杆菌中耐药基因情况.结果 敏感菌株均无23S rRNA基因点突变或携带ermX耐药基因;单一耐药(克拉霉素或阿奇霉素)均无携带ermX耐药基因,但3株对克拉霉素低、中度耐药的菌株在23S rRNA基因287、555、287\514位点存在突变;40株多重耐药菌株中,12株23S rRNA基因发生2058点突变(10株由A→G突变,2株由A→T突变),26株携带ermX耐药基因,且携带ermX耐药基因与发生2058点突变的菌株不存在交叉重叠,剩余2株未发现点突变或携带ermX耐药基因.结论 东莞地区痤疮患者痤疮丙酸杆菌对大环内酯-林可酰胺类多重耐药的主要基因型为携带ermX耐药基因(65％)和23S rRNA基因2058点突变(30％).此外,观察到23S rRNA其他位点突变,不排除与耐药相关,如287点突变可能与克拉霉素耐药有关.