目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)外源性microRNA-1297(miR-1297)对抑郁大鼠海马神经元损伤的作用和机制。方法:获得并鉴定BMSCs及其外泌体，通过注射皮质酮建立抑郁症大鼠模型，然后注射BMSCs衍生的外泌体，测定大鼠血清、海马组织和神经元中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、TNF-α和IL-1β的含量，RT-qPCR检测miR-1297在海马组织和神经元中的表达，建立大鼠海马神经元的损伤模型，以探讨BMSCs衍生的外泌体和miR-1297在神经元凋亡和增殖中的作用，并通过双荧光素酶报告基因鉴定miR-1297与结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)的靶向关系。结果:在抑郁大鼠的海马组织中，miR-1297表达较低，而CTGF表达升高，源自BMSCs的外泌体可通过上调miR-1297的水平抑制CTGF的表达，从而抑制抑郁大鼠海马组织中的神经元细胞凋亡，同时上调SOD的水平，并降低炎症损伤，最终改善抑郁大鼠行为功能。结论:在抑郁大鼠中，miR-1297低表达，而CTGF高表达。BMSCs衍生的外泌体通过上调miR-1297抑制CTGF表达，从而改善抑郁症大鼠的海马神经元损伤。

目的:探讨miR-1297 是否可以通过靶向高迁移率组A1(HMGA1)调控胃癌的迁移和侵袭.方法:通过逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定了胃癌组织(n=30)和邻近正常组织中miR-1297 和HMGA1 的表达水平.体外培养胃腺癌 SGC-7901 细胞系和人正常胃粘膜上皮细胞 GES-1.将SGC-7901 细胞分为空白组、阴性对照组、miR-1297 mimics 组、miR-1297 inhibitor 和 miR-1297 in-hibitor+HMGA1 siRNA组.采用Transwell法检测SGC-7901 细胞的迁移和侵袭情况.Western blot检测蛋白水平的变化.荧光素酶报告基因法检测miR-1297 特异性靶基因.结果:miR-1297 在胃癌组织和SGC-7901 细胞中表达下调,HMGA1 mRNA水平同时升高(P<0.001),并且 miR-1297 与 HMGA1 mR-NA表达均呈负相关关系(P<0.05).与空白组和阴性对照组相比,miR-1297 mimics 组可抑制细胞在体外的迁移和侵袭能力(P<0.05).此外,miR-1297 通过靶向 HMGA1 的 3'-UTR 下调 HMGA1.与空白和阴性对照相比,转染miR-1297 inhibitor下调miR-1297 表达后细胞迁移和侵袭能力显著增加(P<0.05),同时转染HMGA1 siRNA(miR-1297 inhibitor+HMGA1 siRNA组)后这种促进能力被逆转(P<0.05).结论:miR-1297 通过靶向 HMGA1 抑制 SGC-7901 细胞的迁移和侵袭,提示 miR-1297/HMGA1轴为胃癌提供了一种新的前瞻性治疗策略.

研究柴胡-白芍含药血浆通过微小RNA-1297(microRNA-1297,miR-1297)/第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)信号轴对肝癌细胞HepG2的影响及作用机制.通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测miR-1297、PTEN mRNA在肝癌细胞株中的表达,双荧光素酶报告实验验证miR-1297与PTEN的靶向关系.将HepG2肝癌细胞分为空白血浆组、含药血浆组、miR-1297 inhibitor组、miR-NC组、miR-1297 inhibitor+含药血浆组.细胞计数试剂(CCK-8)法检测细胞增殖,筛选含药血浆最佳干预浓度及时间.细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,碘化丙啶(PI)染色法检测细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平.RT-qPCR检测miR-1297、PTEN、蛋白激酶B(Akt)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)基因表达.蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测PTEN、PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达.结果显示,miR-1297 在HepG2细胞中表达水平最高,选取HepG2细胞进行后续实验.双荧光素酶报告实验显示miR-1297可与PTEN mRNA 3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'UTR)结合.柴胡-白芍含药血浆可以抑制HepG2细胞增殖,最佳干预质量分数及时间为20％、72 h.与空白血浆组相比,含药血浆组、miR-1297 inhibitor组及miR-1297 inhibitor+含药血浆组均能抑制HepG2细胞增殖、侵袭及迁移,可以提高G0/G,期细胞比例,降低S期细胞比例,提高细胞凋亡率.柴胡-白芍含药血浆可以降低HepG2细胞 miRNA-1297、PI3K、Akt mRNA 表达,提高 PTEN mRNA 表达;可以下调 p-PI3K、p-Akt、Bcl-2 蛋白表达;上调 PTEN、caspase-3、caspase-9、Bax的蛋白表达.综上,柴胡、白芍可以抑制HepG2肝癌细胞miR-1297的表达,上调PTEN表达,负调控PI3K/Akt信号通路,从而抑制HepG2细胞增殖并诱导凋亡.

MircoRNA是一种基因表达的调节剂,其表达的改变导致癌基因的激活或肿瘤抑制基因的失活.星形细胞上调基因-1(AEG-1)被认为是一种癌基因,具有调节各种人类癌症中的细胞增殖、转移、转化、血管生成和放化疗抗性等,已经在乳腺癌、肝癌、前列腺等多种癌细胞中发现过表达,且与肿瘤进展相关的PI3K-AKT、NF-κB、MAPK和Wnt多种信号通路中发挥作用.miR-1297是一种具有肿瘤抑制作用的mircoRNA,其抑制或过表达影响与肿瘤增殖、侵袭有关的AEG-1、PTEN、Meg3等基因.

目的:探讨高强度聚焦超声波 (high intensity focused ultrasound, HIFU) 通过miR-1297/PTEN分子轴抑制胰腺癌细胞增殖和迁移的作用机制.方法:HIFU作用于体外培养的胰腺癌PANC-1细胞1、2和3 s, 采用CCK-8法、Transwell小室法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分别检测HIFU对PANC-1细胞增殖、迁移和凋亡的影响;用qPCR和Western blotting法分别检测HIFU对PANC-1细胞miR-1297和PTEN表达的影响, 用双荧光素酶报告基因验证miR-1297与PTEN的靶向关系.通过转染miR-1297 inhibitor和PTEN-siRNA, 采用Western blotting法检测HIFU对Akt磷酸化的影响.结果:随着HIFU作用时间的延长, 对胰腺癌PANC-1细胞增殖和迁移能力的抑制作用不断增强, 并促进细胞凋亡 (均P<0.01), 抑制PANC-1细胞中miR-1297的表达和促进PTEN的表达 (均P<0.05或P<0.01);同时, mi R-1297靶向作用PTEN并下调其表达水平.HIFU显著抑制Akt的磷酸化水平 (P<0.05或P<0.01) .结论:HIFU通过下调miR-1297抑制PTEN的表达并阻断Akt信号通路, 进而抑制胰腺癌发生发展的进程.

目的 该研究旨在探讨miR-1297在肝细胞癌中的表达水平,及其对肝细胞癌癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 分析109对肝癌组织和配对的癌旁组织中miR-1297的表达情况.从上述队列患者的生存资料中分析miR-1297的表达与肝癌患者预后的关系.应用qRT-PCR技术检测肝细胞癌中miR-1297上调表达的机制.应用CCK8试验测定miR-1297在肝细胞癌发生发展中的作用.用Annexin V/丙碘化物染色检测HCC细胞凋亡.用蛋白质免疫印迹分析法研究与BH3结构域凋亡诱导蛋白(BID)的表达.结果 相对癌旁正常组织和人正常肝细胞,miR-1297在肝癌组织和肝癌细胞中表达上升.Kaplan-Meier分析提示癌组织中高表达miR-1297的肝癌患者预后较差.在SMMC-7721和HepG2转染miR-1297表达抑制剂可抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡.生物信息学分析提示BID为miR-1297直接调控靶基因;荧光素酶报告基因检测提示miR-1297可与BID mRNA 3'UTR结合;蛋白质印迹分析证实miR-1297可抑制肝癌细胞BID蛋白的表达.进一步研究提示,抑制miR-1297表达显著提高线粒体中tBID和细胞色素C的表达水平.拯救实验证实在肝癌细胞中miR-1297通过靶向BID蛋白抑制肝癌细胞凋亡.结论 证实miR-1297通过靶向BID促进肝癌的进展,提示其可能是肝细胞癌患者潜在的预测预后的临床标志物和治疗靶点.

目的 探讨微小RNA-1297(miR-1297)对胃癌细胞侵袭迁移和Notch/zeb1信号通路的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测正常胃黏膜细胞GES-1和胃癌细胞株AGS、MKN45、HGC27及SGC7901中miR-1297的表达水平;选取miR-1297表达量最低的胃癌细胞分别转染miR-1297模拟物(miR-1297组)和阴性对照(miR-NC组),QPCR检测各组的miR-1297表达水平,划痕实验和Transwell小室实验分别检测迁移和侵袭能力,Western blotting检测上皮间质转化过程及Notch/zeb1信号通路中相关蛋白的表达.结果 GES-1细胞中miR-1297表达水平为1.01±0.05,高于AGS、MKN45、HGC27和SGC7901细胞的0.44±0.03、0.54±0.05、0.61±0.06和0.51±0.08,差异有统计学意义(P＜0.05),选取AGS细胞进行后续实验.miR-1297组的miR-1297表达水平较miR-NC组升高(2.77±0.33)倍(P=0.018).转染48 h后miR-1297组的划痕愈合率为(32.1±4.3)％,低于miR-NC组的(68.7±5.1)％,miR-1297组的侵袭细胞数目为(27±2)个,低于miR-NC组的(52±4)个,以上差异均有统计学意义(P＜0.05).Western blotting结果显示,与miR-NC组比较,miR-1297组E-钙黏蛋白水平升高(P＜0.05),而N-钙黏蛋白、波形蛋白、Notch和zeb1水平均降低(P＜0.05).结论 胃癌细胞中miR-1297水平降低.上调miR-1297表达可抑制胃癌细胞的迁移侵袭能力,可能与抑制Notch/zeb1信号通路有关.

目的:探讨miR-1297对乳腺癌细胞恶性生物学行为的调控作用及其潜在机制.方法:选用2016年5月至2018年5月乐山市人民医院甲乳外科手术切除的20例乳腺癌组织和癌旁组织标本以及乳腺癌细胞系MCF-7、SW626、HCC1937和人乳腺上皮细胞MCF-10A,用qPCR检测乳腺癌组织和细胞系中miR-1297的表达水平.实验分为对照组、miR-1297 inhibitor组、TET甲基胞嘧啶双加氧酶3(TET3)过表达组及同时过表达TET3和miR-1297组,用CCK-8、Transwell实验检测MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力,用WB检测MCF-7细胞中TET3和EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)的表达水平.用双荧光素酶报告基因验证miR-1297与TET3的靶向关系.结果:miR-1297在乳腺癌组织和细胞系中均高表达(P<0.01或P<0.05).敲降miR-1297后,MCF-7细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT均明显受到抑制(P<0.05或P<0.01).转染pcDNA3.1-TET3后,MCF-7细胞TET3的表达水平显著上调(P<0.05);同时过表达TET3和miR-1297能够逆转MCF-7细胞中TET3的表达水平及TET3对MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用.双荧光素酶报告基因结果显示,miR-1297靶向结合TET3的3'UTR,miR-1297靶向下调TET3从而促进MCF-7细胞的恶性生物学行为.结论:miR-1297在乳腺癌组织和细胞中高表达,其通过靶向下调TET3的表达水平促进MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和EMT等恶性生物学行为.

目的:探讨小分子RNA-1297(miR-1297)的异位表达对肝细胞癌细胞的增殖地抑制并增强细胞凋亡的作用.方法:收集40例肝细胞癌患者手术后切除的癌组织和癌旁组织标本.通过定量PCR检测组织标本中miR-1297的表达,并分析miR-1297的表达与临床病理学指标的关系.分别培养肝癌细胞株Hep3B、HepG2及正常肝细胞株HL-7702,48 h后使用定量PCR检测3种细胞中miR-1297及果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)的表达水平.通过转染增加或抑制Hep3B和HepG2细胞中miR-1297的表达,然后使用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果:在人肝细胞癌组织中miR-1297的表达水平低于癌旁正常组织(P<0.05),而EZH2高于癌旁正常组织(P<0.05);miR-1297的过表达使EZH2蛋白的表达水平降低(P<0.05);miR-1297的过表达抑制细胞增殖并增强肝细胞癌中的细胞凋亡(P<0.05);EZH2的敲减抑制肝细胞癌细胞的体外增殖和生长(P<0.05).结论:这些发现提供了miR-1297在抑制肝细胞癌细胞增殖和通过靶向EZH2增强细胞凋亡中起关键作用的证据,并且强烈表明外源性miR-1297可能在治疗肝细胞癌中具有治疗价值.

目的 miR-1297在胃癌进展中扮演癌基因的角色,其具体机制尚不明确.本研究旨在探讨miR-1297靶向调控星形细胞上调基因-1 (astrocyte elevated gene-1,AEG-1)对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 运用生物信息学软件预测miR-1297的下游靶基因,采用双荧光素酶实验检测miR-1297和AEG-1的靶向关系.将体外培养的MKN-45细胞分为mimics NC组(转染miR-1297 mimics阴性对照)、miR-1297 mimics组、inhibitor NC组(转染inhibitor mimics阴性对照)和miR-1297 inhibitor组,MTT法检测各组细胞增殖活力,Transwell小室实验检测细胞侵袭,RT-qPCR和蛋白质印迹分别检测各组细胞中AEG-1、基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP-9)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA和蛋白的表达.结果 双荧光素酶实验结果显示,在野生型3'UTR中,空白对照组荧光素酶活力均值为0.98±0.01,mimics NC组为0.97±0.02,miR-1297 mimics组为0.56±0.03,组间均值差异有统计学意义,F=836.800,P＜0.001;两两多重比较,mimics NC组与miR-1297 mimics组荧光素酶的活力值差异有统计学意义,P＜0.001;说明miR-1297可以与AEG-1 3'UTR结合.miR-1297 mimics组细胞的增殖活力和侵袭能力较mimics NC组均降低,均P=0.001;而miR-1297 inhibitor组增殖活力和侵袭能力较inhibitor NC组均升高,均P＜0.001.RT-qPCR结果表明,与mimics NC组相比,miR-1297 mimics组AEG-1 (P=0.001)和MMP-9 (P=0.002) mRNA表达降低,而E-cadherin mRNA表达(P=0.005)升高;与inhibitor NC组相比,miR-1297 inhibitor组AEG-1 (P=0.001)和MMP-9(P=0.003)mRNA表达升高,而E-cadherin mRNA表达降低,P=0.012.蛋白质印迹结果表明,AEG-1、MMP-9和E-cadherin蛋白表达与mRNA表达一致.结论 miR-1297通过结合到AEG-1 mRNA的3'UTR促进AEG-1的降解,从而下调MMP-9和上调E-cadherin的活性,抑制胃癌细胞增殖和侵袭.