目的:探讨创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p水平及其与预后的关系。方法:选取2018年5月至2020年8月在山西医科大学第一医院就诊的124例创伤性脑损伤患者作为研究对象，根据患病后6个月患者的格拉斯哥预后评分(GOS)，将其分为预后良好组( n＝75)和预后不良组( n＝49)。用实时荧光定量PCR法检测高压氧治疗前(T1)及高压氧治疗1个月后(T2)，患者血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的表达水平；通过受试者工作特征(ROC)曲线和Logistic回归分析评估这3种指标对创伤性脑损伤患者高压氧治疗预后的评价效能及其与预后的关系。 结果:预后良好组患者的格拉斯哥昏迷评分(GCS)高于预后不良组，发病至开始治疗时间短于预后不良组，差异均有统计学意义( P<0.05)。预后良好组患者T1和T2时间点miR-3195、T2时间点miR-328-5p、T1和T2时间点miR-6867-5p相对表达量均低于同期预后不良组( P<0.05)。2组患者T2时间点miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的相对表达量均低于T1时间点( P<0.05)。预后良好组的miR-6867-5p相对表达量降低程度高于预后不良组( P<0.05)。T2时间点miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的ROC曲线下面积(AUC)大于T1时间点，差异均有统计学意义( P<0.05)。高GCS是创伤性脑损伤预后的独立保护因素( P<0.05)，发病至开始治疗时间过长、T2时间点患者miR-3195和miR-6867-5p高表达是创伤性脑损伤预后的独立危险因素( P<0.05)。 结论:创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195和miR-6867-5p水平与预后密切相关，而miR-328-5p水平与预后无关。

目的 探讨miR-3195 通过调控Wnt/β-catenin信号通路对肺癌细胞生长和转移的影响.方法 采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺癌细胞H1299、A549、NCI-H446 中miR-3195 表达水平.将NCI-H446 细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-3195 组(转染 miR-3195)、miR-3195+FH535 组(转染miR-3195+20 μmol/L通路抑制剂FH535).qRT-PCR检测miR-3195 表达水平;细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞增殖水平;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western印迹检测细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK)4、细胞增殖核抗原(Ki)67、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达.结果 肺癌细胞H1299、A549、NCI-H446 中miR-3195 表达水平较正常肺上皮细胞BEAS-2B明显降低(P<0.05).miR-3195 组OD(48、72 h)值、迁移细胞数、侵袭细胞数、CDK4、Ki67、MP-2、MMP-9、Wnt3a、c-Myc、β-catenin蛋白表达明显低于miR-NC组(P<0.05).miR-3195+FH535 组OD(24、48、72 h)值、迁移细胞数、侵袭细胞数、CDK4、Ki67、MP-2、MMP-9、Wnt3a、c-Myc、β-catenin蛋白表达明显低于miR-3195 组(P<0.05).结论 miR-3195 可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭.

9的:探讨miR-3195对喉癌Hep2细胞增殖的影响及其分子机制.方法:选取2008年1月至2012年8月期间在南华大学教学医院郴州市第一人民医院耳鼻喉科收治的29例喉癌患者的喉癌组织及其相应的癌旁组织标本,采用qPCR检测miR-3195在喉癌和癌旁组织中的表达;构建miR-3195在喉癌Hep-2细胞中稳定高表达的细胞株,采用MTT法观察miR-3195稳定高表达组和对照组的增殖情况;建立裸鼠移植瘤模型,观察miR-3195稳定高表达的人喉癌细胞株Hep-2在裸鼠体内增殖的情况.利用生物信息学预测miR-3195的靶基因,构建TBX1 3'UTR的荧光素酶载体,双荧光素酶检测系统检测其荧光素酶活性;Western blotting检测稳定高表达miR-3195组和对照组细胞株的TBX1蛋白表达水平.结果:miR-3195在喉癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P＜0.01);miR-3195上调可抑制Hep-2细胞的增殖(P＜0.01),且可明显抑制裸鼠移植瘤瘤体的生长(P＜0.05);双荧光素酶报告基因检测结果表明miR-3195可能与TBX1靶向结合(P＜0.05),同时Western blotting法验证了miR-3195能够抑制TBX1蛋白的表达(P＜0.05).结论:miR-3195对Hep2细胞有明显的增殖抑制作用,其分子机制可能与负性调控TBX1的表达有关.

目的 研究乳腺癌患者化疗期间并发肺部感染血清微小RNA(miRNA)表达谱差异.方法 选取2018年1月-2020年4月在南阳医学高等专科学校第一附属医院放疗科接受化疗且化疗期间发生肺部感染的乳腺癌患者102例,纳入肺部感染组,另随机选取49例同期在医院接受化疗期间且未发生感染性疾病,年龄与肺部感染组相匹配的乳腺癌患者纳入未感染组;应用Solexa平台测序分析两组血清miRNA表达谱变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法验证血清特异性miRNA;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清特异性miRNA对乳腺癌患者化疗期间并发肺部感染的预测价值.结果 较未感染组,肺部感染组有19个miRNA表达上调,24个miRNA表达下调,其中表达倍数上调或下调2倍以上miRNA 7个,分别为has-miR-18b-3p、has-miR-146a、has-miR-155、has-miR-125b、has-miR-3195、has-miR-53、has-miR-16-5p;qRT-PCR 法结果与高通量测序结果一致,高通量测序结果有效;7个差异化表达miRNA中,miR-18b-3p预测乳腺癌化疗期间肺部感染的曲线下面积值(AUC)最高,以2.351为miR-18b-3p相对表达量cut-off,其预测乳腺癌化疗期间肺部感染的敏感度、特异度分别为92.16％、100.00％.结论 乳腺癌患者化疗期间,并发肺部感染患者与未感染患者的血清miRNA表达谱存在特异性变化,其中特异性miR-18b-3p可作为此类患者化疗期间肺部感染的风险预测因子.

目的:探讨LncRNA-NKILA靶向miR-3195对口腔癌细胞活性及血管生成的作用机制.方法:通过qRT-PCR方法检测LncRNA-NKILA在人正常口腔上皮细胞及人口腔鳞癌细胞中表达水平.按照随机数字表法分为空质粒组(SCC25细胞株+pcDNA)、NEAT1组(SCC25细胞株+pcDNA-NKILA)、NC-组(SCC25细胞株+miR-3195-NC-mimics);miR-3195组(SCC25细胞株+miR-3195-mimics)、联合1组(SCC25细胞株+pcDNA-NKILA+miR-3195-NC-mimics)及联合2组(SCC25细胞株+pcDNA-NKI-LA+miR-3195-mimics).采用CCK-8方法检测细胞增殖;流式细胞仪检测凋亡率,免疫印迹检测细胞VEGF及VEGF-C蛋白;荧光素酶方法检测LncRNA-NKILA对miR-3195调控作用.结果:SCC25细胞株转染pcDNA-NKILA使细胞增殖降低,凋亡增加,VEGF及VEGF-C蛋白降低,与空质粒组比较存在差异(P<0.05);与NC组相比,miR-3195组SCC25细胞株增殖降低,凋亡率升高,VEGF及VEGF-C蛋白降低(P<0.05),与联合1组相比,联合2组SCC25细胞株增殖降低,凋亡率升高,VEGF及VEGF-C蛋白降低(P<0.05);荧光素酶实验显示miR-3195是LncRNA-NKILA靶基因.结论:LncRNA-NKILA可通过调控miR-3195表达抑制口腔癌细胞增殖,促进其凋亡,研究机制可能抑制VEGF表达相关.

目的 研究水通道蛋白1(AQP1)、微小RNA-3195(miR-3195)、PINCH-1在喉癌中的表达及作用机制.方法 选取2019年5月至2020年11月收治的81例喉癌患者,对患者癌组织、癌旁组织标本进行免疫组化染色,荧光定量PCR检测AQP1、miR-3195、PINCH-1表达,对比不同病理特征喉癌组织中AQP1、miR-3195、PINCH-1表达情况,分析AQP1、miR-3195、PINCH-1表达在喉癌组织中的相关性.结果 喉癌患者癌组织中AQP1、PINCH-1表达高于癌旁组织,miR-3195表达低于癌旁组织(P<0.05).中低分化程度患者AQP1、PINCH-1表达高于高分化程度患者,miR-3195表达低于高分化程度患者(P<0.05);肿瘤浸润深度为T1～T2期患者AQP1、PINCH-1表达低于T3～T4期患者,miR-3195表达高于T3～T4期患者(P<0.05);TMN分期为Ⅰ～Ⅱ期患者AQP1、PINCH-1表达低于Ⅲ～Ⅳ患者,miR-3195表达高于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05),淋巴结转移患者AQP1、PINCH-1表达高于淋巴结未转移患者,miR-3195表达低于淋巴结未转移患者(P<0.05).AQP1、miR-3195、PINCH-1联合检测对喉癌的预测价值优于单一检测.喉癌组织中AQP1、miR-3195呈负相关(r=-0.476,P=0.001);AQP1、PINCH-1呈负相关(r=-0.645,P=0.001);miR-3195、PINCH-1呈正相关(r=0.523,P=0.001).结论 AQP1、miR-3195、PINCH-1在喉癌中的表达出现异常,且AQP1、miR-3195、PINCH-1表达变化与喉癌患者分化程度、肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移情况相关,三者表达之间具有一定相关性,共同参与喉癌的发展过程.