目的:探讨微RNA（miR）-221、miR-182-5p及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对肺炎支原体（MP）感染患儿气道高反应性（AHR）的预测价值。方法:选取2020年1月至2022年12月我院儿科收治的328例MP感染患儿为研究对象，并按患儿是否伴发AHR分成AHR组（ n=118）和非AHR组（ n=210）。检测两组的miR-221、miR-182-5p及TNF-α水平，并获取相关临床资料，分析MP感染患儿发生AHR的危险因素，受试者工作特征曲线（ROC）评估miR-221、miR-182-5p及TNF-α对MP感染患儿发生AHR的预测价值。 结果:Logistic分析显示，病程、家族哮喘史、FEV1、FVC、miR-221、miR-182-5p及TNF-α水平均是MP感染患儿发生AHR的独立危险因素（ P<0.05）。ROC曲线显示，miR-221、miR-182-5p及TNF-α水平单独及联合预测MP感染患儿发生AHR的AUC分别为0.756、0.861、0.618、0.899，三者联合预测MP感染患儿发生AHR的AUC高于单独预测（ P<0.05）。 结论:miR-221、miR-182-5p及TNF-α是MP感染患儿发生AHR的独立危险因素，miR-221、miR-182-5p及TNF-α水平对MP感染患儿发生AHR均具有一定预测价值，三者联合预测时价值更高。

目的:探讨创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p水平及其与预后的关系。方法:选取2018年5月至2020年8月在山西医科大学第一医院就诊的124例创伤性脑损伤患者作为研究对象，根据患病后6个月患者的格拉斯哥预后评分(GOS)，将其分为预后良好组( n＝75)和预后不良组( n＝49)。用实时荧光定量PCR法检测高压氧治疗前(T1)及高压氧治疗1个月后(T2)，患者血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的表达水平；通过受试者工作特征(ROC)曲线和Logistic回归分析评估这3种指标对创伤性脑损伤患者高压氧治疗预后的评价效能及其与预后的关系。 结果:预后良好组患者的格拉斯哥昏迷评分(GCS)高于预后不良组，发病至开始治疗时间短于预后不良组，差异均有统计学意义( P<0.05)。预后良好组患者T1和T2时间点miR-3195、T2时间点miR-328-5p、T1和T2时间点miR-6867-5p相对表达量均低于同期预后不良组( P<0.05)。2组患者T2时间点miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的相对表达量均低于T1时间点( P<0.05)。预后良好组的miR-6867-5p相对表达量降低程度高于预后不良组( P<0.05)。T2时间点miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p的ROC曲线下面积(AUC)大于T1时间点，差异均有统计学意义( P<0.05)。高GCS是创伤性脑损伤预后的独立保护因素( P<0.05)，发病至开始治疗时间过长、T2时间点患者miR-3195和miR-6867-5p高表达是创伤性脑损伤预后的独立危险因素( P<0.05)。 结论:创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195和miR-6867-5p水平与预后密切相关，而miR-328-5p水平与预后无关。

目的:构建2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患者血浆microRNA(miRNA)差异表达谱，探讨miRNA作为T2DM诊疗靶标的可能性。方法:采用miRNA芯片技术检测T2DM患者血浆中miRNA差异表达情况，用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)进行验证，对目标miRNA进行生物信息学分析。结果:T2DM患者血浆中122个miRNAs呈差异表达( FC>2， P<0.05)，经多源交集筛选得到差异表达miRNAs 14个，其中上调5个，下调9个。RT-qPCR结果显示，血浆中hsa-miR-185-5p及hsa-miR-328-5p在病例组高表达，差异有统计学意义( P<0.05)。生物信息学分析结果提示，这些miRNAs可能通过胰岛素分泌及PI3K-AKT信号通路途径参与T2DM发生发展过程。 结论:T2DM患者血浆中hsa-miR-185-5p及hsa-miR-328-5p呈差异表达，可能与T2DM发病密切相关。

目的 了解广州管圆线虫感染后大鼠脑组织转录组的表达水平.方法 将32只SD大鼠随机分为对照组(12只)和感染组(20只),感染组每只大鼠经灌胃感染40条广州管圆线虫Ⅲ期幼虫,对照组灌胃等体积生理盐水.感染后1、7、14、21 d,对照组、感染组分别随机解剖3、5只,取脑组织制备石蜡切片,苏木精-伊红(HE)染色后观察脑组织病理变化.TRIzol法提取感染后14d大鼠脑组织RNA,逆转录为cDNA后测序.选取差异表达mRNA进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)代谢通路分析,采用STRING数据库预测差异表达mRNA靶蛋白之间的蛋白质互作(PPI)关系.利用生物信息学方法构建差异表达基因的竞争性内源性RNA(ceRNA)调控网络.采用qPCR验证表达差异的lncRNA.结果 HE染色结果显示,感染广州管圆线虫后14d,感染组大鼠脑组织出现病理变化,脑海马区神经元胞浆固缩;感染后21 d,脑膜处可见寄生虫样组织.RNA测序结果显示,感染广州管圆线虫后14d,大鼠脑组织中差异表达mRNA的数量为955个(890个上调、65个下调);差异表达lncRNA的数量为193个(122个上调、71个下调).GO富集分析结果显示,差异表达mRNA主要富集在炎症反应、免疫应答等生物过程,细胞成分主要为质膜外侧的胞外空间、细胞表面等,分子功能主要为趋化因子活性、趋化因子受体结合等;KEGG代谢通路分析结果显示,差异表达mRNA主要参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、趋化因子等信号通路.PPI分析结果显示,差异表达基因主要的靶点为趋化因子配体11、RT1-Da、丝氨酸家族E成员1等,均与免疫应答相关.ceRNA结果显示,显著富集的miRNA如mir-466b-3p、mir-1956、mir-207和mir-328a-5p等与免疫应答、细胞凋亡、血管生成等过程有关.qPCR结果显示,感染广州管圆线虫后,感染组大鼠H19的相对转录水平逐渐升高,在感染后21 d达到峰值,为15.074±3.366,高于对照组的 1.000±0.113(t=13.190,P＜0.05);RT1-CE6、LOC100910973 和 lncR-ncf1 的相对转录水平在感染后 14 d 达到峰值,分别为9.702±1.408、6.683±1.299和7.733±0.717,均高于对照组的 1.003±0.039、1.001±0.156和0.999±0.076(t=20.760、13.830、28.810,均 P＜0.01);AABR07030796.1 的相对转录水平在感染后 14 d 开始上升,至感染后21 d达到峰值,分别为4.485±0.236和5.068±1.608,均高于对照组的1.000±0.159和1.001±0.256(t=7.049、8.229,均 P＜0.01).感染广州管圆线虫后 14 d,大鼠脑组织中 H19、RT1-CE6、LOC100910973、lncR-ncf1和AABR07030796.1的qPCR结果和RNA测序结果均显示上调,表达趋势一致.结论 广州管圆线虫感染后大鼠脑组织转录组中获得955个差异表达mRNA和193个差异表达lncRNA,主要富集在炎症反应、免疫应答等生物过程.

目的:筛选针刺内迎香穴治疗变应性鼻炎(AR)大鼠血浆外泌体中差异表达的miRNA,并对其进行生物信息学分析,探讨针刺内迎香穴治疗AR的可能作用机制.方法:将30只SPF级SD大鼠随机分为空白组(Ko组)、模型组(Mu组)和针刺组(Zh组),每组各10只.模型组和针刺组采用卵清蛋白腹腔注射及鼻黏膜刺激法建立变应性鼻炎大鼠模型,造模后对针刺组大鼠予针刺内迎香穴进行干预,每周2次,连续3周.HE染色观察鼻黏膜病理形态改变;超速离心法提取大鼠血浆外泌体,透射电镜(TEM)和粒径分析(NTA)检测外泌体形态和粒径浓度;高通量测序以P＜0.05的标准筛选大鼠血浆外泌体中显著差异表达的miRNA;利用miRanda和Targetscan得出差异表达miRNA靶基因,进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.结果:针刺作用关键miRNA共有10个,其中5个上调,5个下调,共得出7 408个靶基因,涉及1 130个生物过程、158个细胞组分、166个分子功能,KEGG信号通路有31条(P＜0.05).结论:针刺内迎香穴可明显改善AR大鼠鼻黏膜组织炎性细胞浸润情况,其机制可能与通过调节 rno-miR-92a-3p、rno-let-7d-3p、rno-miR-328a-3p、rno-miR-223-3p、rno-miR-23a-3p、rno-miR-451-5p、novel_314、rno-miR-144-5p、rno-miR-23b-3p及rno-miR-144-3p的表达,进而调控MAPK信号通路有关.

目的 探讨呼出气冷凝物(EBC)中微小RNA(miRNA)作为诊断哮喘患儿生物标志物的诊断价值.方法 选取2021年3月至2022年12月华北石油管理局总医院收治的7～12岁哮喘患儿80例作为哮喘组,并选取同期同年龄段的健康志愿者80例作为对照组.检测2组受试者EBC中11种相关miRNA的表达水平.应用主成分分析法和因子分析法对miRNAs进行聚类分析.采用受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)分析miR-133-3p、miR-328-3p、miR-21-5p、miR-155-5p在哮喘患儿中的诊断意义.结果 哮喘组EBC中miR-21-5p和 miR-133-3p的相对表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),而 miR-328-3p和miR-155-5p的相对表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).根据对照组和哮喘组EBC中miR-133-3p、miR-328-3p、miR-21-5p、miR-155-5p的相对表达水平可以形成两个独立亚群,即体检健康者和哮喘患儿.因子分析法发现miR-21-5p、miR-155-5p可以聚成一个亚类(因子载荷分别为0.93和0.90),miR-133-3p、miR-328-3p聚成一个亚类(因子载荷分别为0.86和0.80).哮喘患儿与健康儿童的miR-133-3p、miR-328-3p、miR-21-5p、miR-155-5p 的灵敏度分别为 93.77％、92.41％、95.23％、92.57％,特异度分别为 94.01％、91.07％、91.48％、91.35％.miR-133-3p、miR-328-3p、miR-21-5p、miR-155-5p 联合对哮喘患儿的诊断 灵敏度为 97.50％,特异度为 92.50％,准确度为 95.00％.结论 EBC 中 miR-133-3p、miR-328-3p、miR-21-5p、miR-155-5p可作为诊断哮喘患儿的潜在标志.

目的 探究多西环素对慢性间歇缺氧(CIH)所致大鼠心房重构的相关干预机制.方法 45只雄性SD大鼠随机分为对照组、慢性间歇缺氧组(模型组)及多西环素干预组(干预组),每组各15只.模型组大鼠每日接受间歇缺氧6h,持续30 d,干预组大鼠在间歇缺氧的基础上给予多西环素进行干预.行超声心动图检查之后,每组随机挑选5只进行体外心脏电生理学实验,剩余10只大鼠留取心房组织进行病理学及分子生物学实验.Masson染色观察大鼠心房肌组织纤维化程度,实时荧光定量聚合酶联反应和Western blot用于检测心房组织中微小RNA(miR)-1、miR-21、miR-29b、miR-30、miR-133a、miR-328、转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达水平的变化.结果 与对照组比较,模型组大鼠左心房胶原分数和心房颤动(AF)诱发率明显增加[(6.40±0.84)％vs (1.50±0.23)％和(36.0±10.8)％vs(24.0±14.3)％,P＜0.05],心房组织miR-1、miR-21、miR-133a、miR-328、TGF-β1及CTGF的表达水平明显升高.与模型组比较,干预组左心房胶原分数明显降低[(2.84±0.69)％vs(6.40±0.84)％,P＜0.05],AF诱发率有所改善,但差异无统计学意义(P＞0.05),miR-21、miR-133a、TGF-β1/β肌动蛋白(β-actin)及CTGF/β-actin的表达水平明显改善.结论 CIH可导致大鼠心房的结构重构和电重构,而miR-1、miR-21、miR-133a、miR-328、TGF-β1及CTGF表达水平的升高在心房重构中具有重要作用,多西环素可能通过干预miR-133a、TGF-β1、CTGF信号通路进而改善CIH导致的心房重构.

目的:通过基因芯片筛选并分析健康成年人与急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者、稳定型心绞痛(SA)患者外周血外泌体中microRNA的表达差异,寻找临床诊断和治疗冠心病的新靶点.方法:入选STE-MI患者、SA患者和健康成年人各3例,采集受试者静脉血,通过超高速离心法提取血清中的外泌体,运用基因芯片技术对外泌体中的microRNA进行测序.两两对比,从中筛选出差异性表达的microRNA,对差异性表达的microRNA的靶基因进行GO功能富集分析和KEGG Pathway富集分析.结果:STEMI组、SA组和健康组外周血中外泌体所含有的microRNA表达有明显差异.SA组与健康组对比,miR-5195 3p、miR-328、miR 130a-3p上调表达差异较明显[FC (abs)＞2];SA组与STEMI组对比,miR-483-3p下调表达差异较明显[FC (abs)＞2];STEMI组与健康组对比,miR-4787-3p、miR-423-5p、miR 151b上调表达差异较明显FC(abs) ＞2],miR-140-3p、miR-29a-3p、miR-765、miR-939 5p下调表达较明显[FC(abs)＞ 2].结论:STEMI患者、SA患者和健康成年人外周血中外泌体所含有的microRNA表达有显著差异,其中部分特异性的microRNA与心血管疾病的发生发展有着密切的关系,可以作为冠心病诊断和治疗的新靶标.

目的:探讨脑钠肽(BNP)联合miR-328基因对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌损伤的影响.方法:按照随机数字表将50只大鼠分为5组,假手术组(Sham组,开胸后只穿线,不结扎)、MIRI模型组(I/R组,建立MIRI模型)、BNP组(建立MIRI模型前静脉给予BNP 0.01μg/kg)、miR 328组(建立MIRI模型前静脉给予miR-328 antagomir 200μl)和BNP+ miR 328组(建立MIRI模型前静脉给予BNP和miR-328 antagomir,量同前),每组各10只.于再灌注结束后,获取心脏穿刺血液及心脏组织.实时荧光定量PCR(qRT PCR)检测Sham组、I/R组和miR-328组心肌组织miR-328 mRNA表达水平;TTC+伊文思蓝双染色法测定各组心肌梗死面积;ELISA法测定血清肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;硫代巴比妥酸(TBA)法及邻苯三酚法分别测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)法测定心肌细胞凋亡率;Western blotting检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和核因子活化B细胞κ轻链增强子p65(NF-κB p65)蛋白表达水平.结果:I/R组miR-328 mRNA表达显著高于Sham组和miR 328组(P＜0.05).I/R组心肌梗死面积、CK-MB水平、TNF-α和MDA含量、细胞凋亡率、Bax和NFκB p65蛋白表达水平均显著高于Sham组,IL-10含量、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均显著低于Sham组(P＜0.05),而BNP组和miR 328组肌梗死面积、CK-MB水平、TNF-α和MDA含量、细胞凋亡率、Bax和NF-κB p65蛋白表达均显著低于I/R组,高于BNP+miR 328组,IL-10含量、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均显著高于I/R组,低于BNP+ miR-328组(P＜0.05).结论:BNP及miR-328 antagomir均可降低炎症反应、氧化损伤及心肌细胞凋亡率,从而对MIRI起保护作用,而联合使用效果更明显,机制可能与其下调NF-κB p65信号通路有关.

目的 探讨miR-328-5p对胃癌细胞迁移和侵袭的作用及其分子机制.方法 将30只小鼠按照随机数字表法分为胃癌组和正常组,每组15只,采用N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)化学诱导法构建小鼠胃癌模型,采用RT-PCR法检测两组小鼠胃组织中miR-328-5p、脊椎蛋白2(SPON2)相对表达量;Western blot法检测两组小鼠胃组织中酪氨酸蛋白激酶(Src)、磷酸化Src (p-Src)、局部黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(p-FAK)蛋白表达水平.将胃癌细胞系SGC7901分为miR-328-5p组、miR-con组、NC组共3组,采用RT-PCR法检测3组细胞miR-328-5p、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)相对表达量;采用Transwell小室实验检测3组细胞迁移和侵袭数.采用荧光素酶报告基因实验检测胃癌细胞miR-328-5p、miR-con+SPON2基因野生型(WT)和突变型(MUT)的荧光素酶相对活力值.结果 与正常组比较,胃癌组胃组织中miR-328-5p相对表达量明显降低, SPON2相对表达量明显升高(均P＜0.05);与正常组比较,胃癌组胃组织中p-FAK、p-Src蛋白表达水平均明显升高(均P＜0.05).与NC、miR-con组比较,miR-328-5p组miR-328-5p相对表达量明显升高,同时Vimentin、MMP-9相对表达量均明显降低(均P＜0.05);与NC、miR-con组比较,miR-328-5p组细胞迁移数和侵袭数均明显降低(均P＜0.05).与miR-328-5p+SPON2 WT组比较,miR-con+SPON2 WT组、miR-con+SPON2 MUT组、miR-328-5p+SPON2 MUT组荧光素酶相对活力值均明显为高(均P＜0.05).结论 miR-328-5p在胃癌组织中呈低表达,过表达miR-328-5p可抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力;miR-328-5p直接靶向SPON2基因3'UTR序列,调控其转录表达,并抑制其下游FAK/Src信号活化及其下游Vimentin、MMP-9的表达.