目的:探究重楼皂苷Ⅱ对胶质瘤增殖，侵袭及耐药性的作用及机制。方法:CCk-8法检测不同浓度重楼皂苷Ⅱ对胶质瘤细胞系T98G和LN18增殖的影响。Transwell小室实验检测不同浓度重楼皂苷Ⅱ对胶质瘤细胞系T98G和LN18侵袭能力的影响。Western印迹法检测E-cadherin、Snail和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）表达。结果:重楼皂苷Ⅱ能抑制胶质瘤细胞系T98G和LN18的增殖，且随着浓度的增加和时间的延长抑制作用更强。T98G 24、48和72 h的IC 50分别为（5.82±0.32）、（3.57±0.07）、（1.48±0.35）μmol/L。LN18 24、48和72 h的IC 50分别为（6.83±0.11）、（4.28±0.29）、（2.66±0.22）μmol/L。T98G和LN18分别以2、4和6 μmol/L重楼皂苷Ⅱ处理24 h后，侵袭细胞面积占小室面积的百分比明显低于T98G和LN18以0 μmol/L重楼皂苷Ⅱ处理24 h后的百分比，差异具有统计学意义（ P<0.05）。Western印迹实验检测发现与未经重楼皂苷Ⅱ处理的胶质瘤细胞相比，T98G与LN18中E-cadherin的表达较高（ F=85.56， P<0.05； F=60.80， P<0.05），Snail的表达较低（ F=25.34， P<0.05； F=48.28， P<0.05）。不同浓度替莫唑胺与重楼皂苷Ⅱ联合使用时，药物相互作用系数（CDI）均<1，Western印迹检测发现与未经重楼皂苷Ⅱ处理的胶质瘤细胞相比，T98G与LN18中MGMT的表达受抑制（ F=40.38， P<0.05； F=48.44， P<0.05）。 结论:重楼皂苷Ⅱ能抑制胶质瘤的增殖、侵袭并提高对替莫唑胺的敏感性。

本研究旨在探究重楼皂苷Ⅶ（PPⅦ）对弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞株U2932和SUDHL-4的增殖、凋亡和细胞周期的影响。实验将DLBCL细胞株分为对照组和PPⅦ组，并使用MTT法、流式细胞术和Western blot法进行实验。结果显示，与对照组相比，PPⅦ显著抑制了U2932和SUDHL-4细胞的增殖（ P<0.05）。细胞凋亡实验表明，0.5和1 μmol/L的PPⅦ处理使得两种细胞的凋亡率显著增加（ P<0.05），并且凋亡相关蛋白的表达上调，而Bcl-2蛋白水平显著降低（ P<0.05）。细胞周期实验显示，PPⅦ处理使得G0/G1期细胞增加（ P<0.05），G2/M期细胞减少（ P<0.05），且Cyclin D1、CDK4、CDK6和Survivin蛋白的表达量明显下调（ P<0.05）。综上所述，PPⅦ通过抑制DLBCL细胞的增殖、促进细胞凋亡以及阻滞细胞于G0/G1期，发挥了抗淋巴瘤的作用。

肺癌是最常见的恶性肿瘤,其发病机制复杂、恶性程度高,严重威胁了患者的生命健康.p53信号通路是影响肺癌进程的重要通路,被众多研究者视为肺癌靶向治疗的潜在靶点之一.近年来,已有较多研究深入探讨了中药调控p53信号通路干预肺癌的可行性.基于此,本文系统总结了中药调控p53信号通路干预肺癌的作用机制研究进展,发现清金得生片、调气消积汤、补肺通络解毒方、健脾补肾方及益气扶正解毒方等中药复方及制剂可通过激活p53信号通路,促进肺癌细胞自噬及凋亡,抑制肺癌细胞生长及转移,增强机体免疫功能,发挥抑癌作用;拟人参皂苷Rh2、柴胡皂苷D、重楼皂苷Ⅶ、石斛碱、槐定碱、藤黄酸、雷公藤甲素及雷公藤甲素丁二酸单酯YJ-4等中药单体可通过激活p53信号通路,促进肺癌细胞凋亡,抑制肺癌细胞增殖,调控肺癌细胞周期,发挥抑癌作用.

目的 探讨重楼皂苷Ⅰ(Polyphyllin Ⅰ,PPI)对人肝癌细胞HCCLM3增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究.方法 CCK8方法检测PPI对HCCLM3细胞活力抑制作用;克隆形成实验观察PPI和Sorafenib(Sora)对HCCLM3细胞增殖能力影响;细胞划痕实验验证PPI和Sora对HCCLM3细胞迁移能力影响;Transwell实验观察PPI和Sora对HCCLM3细胞侵袭能力影响;Western Blot实验检测PPI和Sora对HCCLM3肝癌细胞MMP2、MMP9蛋白以PI3K/AKT信号通路标志蛋白影响.结果 CCK8实验结果显示,与对照组比较,不同浓度的PPI对HCCLM3细胞活力有明显的抑制作用,且呈时间和剂量依赖性(P＜0.05);克隆结果表明,与空白对照组比较,PPI和Sora对HCCLM3细胞增殖能力有明显抑制作用,PPI联合Sora组抑制作用最明显(P＜0.01);细胞划痕实验与Transwell结果显示,PPI和Sora对HCCLM3细胞迁移和侵袭能力也具有抑制作用,联合组给药组效果更好(P＜0.01);Western Blot实验结果表明PPI和Sora对HCCLM3细胞转移标志蛋白有明显抑制作用,Sora联合PPI组的抑制效果更好(P＜0.01).结论 PPI可通过调控PI3K/Akt信号通路影响HCCLM3细胞的增殖、侵袭和迁移能力.

恶性肿瘤已成为威胁全球健康的重大难题之一.化疗和靶向治疗是其重要的药物治疗手段,但由于药物不良反应和耐药性严重影响患者的治疗依从性、生活质量和治疗效果.越来越多的研究表明,中草药是探索新型抗癌疗法的天然宝库,具有很高的医用价值.清热解毒法是中医治疗恶性肿瘤的基本法则之一.清热解毒类中草药重楼,其性微寒,味苦,有小毒,归足厥阴肝经,具有消肿止痛、清热解毒、凉肝定惊之功效.重楼主要适用于疔疮痈肿、咽喉肿痛、蛇虫咬伤、跌打损伤以及惊风抽搐等症.重楼皂苷Ⅰ是中草药重楼的有效活性成分之一,其化学结构为C44H70O16.大量实验表明,重楼皂苷V能通过抑制肿瘤细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡自噬、逆转肿瘤耐药、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤EMT、调节肿瘤微环境等途径抑制多种恶性肿瘤细胞生长.查阅国内外关于重楼皂苷Ⅰ抗肿瘤作用及机制的相关文献,对其进行归纳总结,为重楼皂苷Ⅰ抗肿瘤作用机制深入研究及抗肿瘤新药研发提供相应参考.

前列腺癌(Prostate cancer,PCa)已成为严重威胁全球中老年男性健康的疾病之一,是最常见的中老年男性恶性肿瘤之一,占男性肿瘤的十分之一.研究发现中医药在干预抗前列腺癌发生过程中起着不可忽视的作用,综述近年来关于中医药治疗前列腺癌现代机制研究进展.通过从前列腺癌的中医病因病机、相关通路机制如(磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶 AKT/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路(Phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase/rapamycin target protein,PI3K/AKT/mTOR)、核转录因子-κB 信号通路(Nuclear transcription factor-κB)、Notch 信号通路、分泌型糖蛋白(Wnt)/β-链蛋白(β-catenin)信号通路(Ecretory glycoprotein/β-catenin,Wnt/β-catenin)、转化生长因子-β/Smads(Transforming growth factor-β/Smads,TGF-β/Smads)等信号通路及雄激素受体(Androgen receptors,AR))、中药有效成分[姜黄素(Curcumin)槲皮素(Quercetin)、和厚朴酚(Honokiol)、重楼皂苷Ⅰ(Polyphyllin Ⅰ)]、单味中药(龙葵、白花蛇舌草、灵芝、薏苡仁)和中药复方(TCM-1、CFF-1、周氏芪凌方、西黄丸)对前列腺癌的干预等方面归纳整理,展现出中医药治疗前列腺癌的独特优势,以期为中医药抗前列腺癌的基础研究与临床实践的进一步探索提供依据.

目的 从磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路探讨重楼皂苷Ⅰ预防给药对心肌缺血再灌注损伤(MI/IR)大鼠的干预机制.方法 将购买的72只SPF级SD大鼠按照随机数字法分为假手术组、模型组、阿司匹林组、重楼皂苷Ⅰ低、中和高剂量组,每组12只.分组后即给予相应药物干预2周,2周后构建MI/IR模型.模型构建成功24 h后先采用动物彩色多普勒超声仪检测心脏功能,后处死大鼠收集相关组织采用HE染色观察心肌病理学、TTC法检测心肌梗死面积,试剂盒检测心功能指标[乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和谷草转氨酶(AST),抗氧化指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)],TUNNEL染色检测心肌细胞凋亡特点,Western blot检测心肌PI3K、AKT、B细胞淋巴瘤/因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白表达.结果 假手术组心肌纤维排列整齐、无水肿,模型组有心肌纤维断裂,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组和阿司匹林组明显改善心肌纤维断裂情况.与假手术组相比,模型组大鼠心肌梗死面积、LVEDP、LDH、CK-MB、AST和 MDA明显升高(P＜0.05),LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax、SOD和GSH明显降低(P＜0.05);相较于模型组,阿司匹林组和重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组干预后,心肌梗死面积、LVEDP、LDH、CK-MB、AST 和 MDA 明显降低(P＜0.05),LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax、SOD和GSH则明显升高(P＜0.05).Tunnel染色可见,假手术组几乎没有心肌细胞凋亡,而模型组呈现出明显的大量的细胞凋亡;与模型组相比,阿司匹林组和重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组凋亡情况明显好转.此外,与假手术组相比,模型组大鼠心肌PI3K、AKT和Bcl-2蛋白表达均明显降低,Bax明显升高(均P＜0.05);相较于模型组,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组以及阿司匹林组PI3K、AKT和Bcl-2蛋白表达均明显升高,Bax蛋白表达明显降低(均P＜0.05).结论 重楼皂苷Ⅰ对心肌缺血再灌注损伤有一定的预防作用,其作用机理可能与其能够调节PI3K/AKT信号通路有关.

目的 建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by a single marker,QAMS)与 HPLC 指纹图谱及化学计量分析相结合的方法对滇重楼及其近缘种的质量进行评价.方法 建立滇重楼及其近缘种的指纹图谱并进行相似度分析、聚类分析(cluster analysis,CA)以及主成分分析(principal component analysis,PCA).以重楼皂苷Ⅶ为内标,建立重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅲ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷H、重楼皂苷D、伪原薯蓣皂苷的相对校正因子,并考察QAMS的可行性.色谱条件:采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(4.6 mm × 250.0 mm,5 μm);乙腈(A)和水(B)为流动相进行梯度洗脱;流速0.8 mL/min;柱温30℃;检测波长203 nm;进样量5 μL.结果 建立了不同种重楼样品的指纹图谱,相似度分析显示不同种重楼样品的相似度介于0.646～0.913,表明不同种重楼间的化学成分及含量差异性较大;以重楼皂苷Ⅶ为内标,所建立的滇重楼QAMS含量测定方法,与外标法(external standard method,ESM)得到的结果进行比较无显著差异,确定了 QAMS在含量测定中的可行性,将QAMS应用于滇重楼近缘种的含量测定,只有长柱重楼的全部样品(CZCL01～04)和TCCL03符合《中华人民共和国药典》的质控标准;进一步以重楼样品中的8个皂苷类成分的峰面积作为变量进行聚类分析和主成分分析,聚类分析结果显示滇重楼及其近缘种样品可以聚为4类,长柱重楼、大理重楼和腾冲重楼均可自成一类,其余种重楼无法进行区分.主成分分析中46批重楼样品大体可以分为5类,大理重楼、长柱重楼、腾冲重楼各为一类,大部分滇重楼为一类,毛重楼、矮重楼、独龙重楼样品在主成分分析中无分类趋势.结论 QAMS与指纹图谱及化学计量分析相结合的方法可以完成对滇重楼及其近缘种中8种皂苷类成分的同时快速定量.并对其质量进行评价.实验建立的分析方法准确可行,可以在保护中药资源、节省时间的前提下对滇重楼及其近缘种样品的质量进行综合评价.

目的 探讨重楼皂苷Ⅵ通过调控小核核糖核蛋白D1(SNRPD1)抑制肝癌细胞增殖的作用机制.方法 ①21只雄性裸鼠,采用皮下注射人肝癌Huh7细胞建立裸鼠肝癌移植瘤模型.裸鼠随机分为模型组(药物溶剂)、5 mg/kg重楼皂苷Ⅵ组、10 mg/kg重楼皂苷Ⅵ组,每组7只.连续腹腔注射给予相应干预10 d,观察各组裸鼠瘤体体积变化.②将人肝癌Huh7和JHH7细胞分为对照组和重楼皂苷Ⅵ组,采用重楼皂苷Ⅵ(0～15 μmol/L)给予相应干预后,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期情况,Western blot法和实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测SNRPD1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白和基因的表达情况.采用分子对接技术预测重楼皂苷Ⅵ和SNRPD1蛋白的潜在靶向结合情况.结果 ①与模型组比较,10 mg/kg重楼皂苷Ⅵ能抑制Huh7细胞裸鼠移植瘤生长(P＜0.05).②与对照组比较,重楼皂苷Ⅵ能抑制人肝癌Huh7和JHH7细胞的增殖(P＜0.05)、细胞克隆形成(P＜0.05)及诱导细胞周期的阻滞(P＜0.05).分子对接结果显示,重楼皂苷Ⅵ潜在靶向SNRPD1蛋白;Western blot和RT-qPCR结果显示,与对照组比较,重楼皂苷Ⅵ可以下调SNRPD1的蛋白表达水平(P＜0.05),但不能下调SNRPD1 mRNA表达水平(P＞0.05).与对照组比较,重楼皂苷Ⅵ能下调SNRPD1的下游细胞周期蛋白Cyclin D1和CDK4的表达水平(P＜0.05).结论 重楼皂苷Ⅵ可能通过调控SNRPD1发挥抗肝癌作用.

重楼是清热解毒传统中药.重楼皂苷是重楼最主要的抗肿瘤活性成分,包括50多种化合物,其中具有抗肿瘤作用的成分为重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅱ、Ⅶ等,对于治疗多种癌症效果显著,如肝癌、结肠癌、脑瘤、大肠癌、食管癌、肺癌、鼻咽癌等.这些成分主要是异螺甾烷醇型甾体皂苷类成分,以重楼皂苷Ⅰ含量最多,其次有重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷、重楼皂苷A、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷H、重楼皂苷E等.近年来,重楼皂苷抗肿瘤作用逐渐被发现并应用到临床中,但重楼皂苷不良反应也有报道,如重楼皂苷Ⅰ对肝脏的毒性损伤等.本文对重楼中的皂苷类成分进行分类并综述异螺甾烷醇型皂苷抗肿瘤作用机制的最新研究进展,以总结重楼皂苷抗肿瘤作用的活性成分及作用机制,为进一步研究重楼皂苷抗肿瘤作用及安全用药提供参考.