目的:观察线粒体辅酶Q（MitoQ）在脂多糖（LPS）诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞线粒体依赖性凋亡中的保护作用及分子机制。方法:体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞株A549，采用不同浓度LPS处理细胞，构建急性肺损伤（ALI）模型，根据半数抑制浓度（IC 50）得出LPS最佳刺激浓度；采用不同浓度MitoQ对细胞进行预处理，确定MitoQ最佳干预浓度。将细胞分为4组：空白对照组使用正常培养基；LPS组在正常培养基中加入10 mg/L的LPS刺激细胞24 h；MitoQ+LPS组用1 μmol/L的MitoQ预处理细胞60 min，然后用含10 mg/L LPS的培养基处理细胞24 h；MitoQ+磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）选择性抑制剂LY294002+LPS组用1 μmol/L的MitoQ和20 μmol/L的LY294002预处理细胞60 min，然后用含10 mg/L LPS的培养基处理细胞24 h。采用细胞增殖与毒性检测试剂盒（CCK-8）检测细胞活性；采用流式细胞仪和原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测细胞凋亡率；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2及PI3K/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（Akt）通路蛋白PI3K的表达和Akt磷酸化水平。 结果:根据抑制率曲线计算得岀LPS对A549细胞的IC 50为11.06 mg/L，故选择10 mg/L作为LPS的刺激浓度。随着MitoQ预处理浓度增加，经10 mg/L的LPS刺激后，细胞活性呈先上升后下降趋势。根据细胞活性曲线计算得岀MitoQ对细胞的最适浓度为1 μmol/L。MitoQ预处理可减弱LPS诱导的线粒体依赖性凋亡，表现为细胞凋亡率较LPS组明显降低〔流式细胞仪：（8.73±0.25）%比（18.10±0.70）%，TUNEL：（12.30±0.82）%比（21.43±0.86）%，均 P<0.05〕，Bax表达显著下降（Bax/β-actin：0.58±0.03比1.06±0.10， P<0.05），Bcl-2表达显著上升（Bcl-2/β-actin：1.03±0.06比0.53±0.07， P<0.05），且PI3K表达及Akt磷酸化水平显著升高〔PI3K蛋白（PI3K/β-actin）：1.20±0.02比0.96±0.04，磷酸化Akt（p-Akt）蛋白（p-Akt/t-Akt）：1.22±0.08比0.92±0.04，均 P<0.05〕。LY294002预处理可抑制MitoQ对细胞的抗凋亡作用，表现为凋亡率较MitoQ+LPS组显著增加〔流式细胞仪：（14.50±0.57）%比（8.73±0.25）%，TUNEL：（16.50±0.53）%比（12.30±0.82）%，均 P<0.05〕，Bax表达显著上升（Bax/β-actin：0.95±0.03比0.58±0.03， P<0.05），Bcl-2显著下降（Bcl-2/β-actin：0.62±0.03比1.03±0.06， P<0.05），同时PI3K表达及Akt磷酸化水平均显著降低〔PI3K蛋白（PI3K/β-actin）：0.90±0.05比1.20±0.02，p-Akt蛋白（p-Akt/t-Akt）：0.89±0.02比1.22±0.08，均 P<0.05〕。 结论:MitoQ可通过激活PI3K/Akt通路改善LPS诱导的A549细胞线粒体依赖性凋亡，为治疗LPS诱导的ALI提供了新的思路。

目的:研究Apelin-13对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder，PTSD)模型小鼠行为学的影响及其神经机制。方法:32只SPF级雄性C57BL/6J小鼠，6周龄，采用随机数字表法分为4组(每组 n＝8)：对照组、模型组、生理盐水组、Apelin-13组。采用单一连续刺激(single-prolonged stress，SPS)法制备PTSD模型，生理盐水组和Apelin-13组小鼠在PTSD造模后分别给予侧脑室微量注射0.9%氯化钠溶液(2 μL)和Apelin-13(1.5μg/μL，2 μL)。采用旷场实验、高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验评估小鼠的行为学改变，采用苏木素-伊红染色观察海马的形态结构，采用Western blot检测海马磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI3K)、磷酸化PI3K(phosphorylated-PI3K，p-PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated-Akt，p-Akt)、叉头框蛋白O3a(forkhead box O3a，FoxO3a)及磷酸化FoxO3a(phosphorylated-FoxO3a，p-FoxO3a)、自噬相关蛋白包括微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3)和SQSTM1蛋白(sequestosome 1，p62)的表达。采用SPSS 26.0进行数据分析，水迷宫4 d重复学习训练的逃避潜伏期数据采用重复测量方差分析，其他数据多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验和Tamhane检验。 结果:(1)旷场实验结果显示，4组小鼠在中央区活动路程和停留时间均差异有统计学意义( F＝15.37，9.63，均 P<0.05)。模型组小鼠中央区活动路程[(0.06±0.03)m]和停留时间[(2.48±1.02)s]均少于对照组[(0.19±0.05)m，(15.00±8.91)s](均 P<0.05)。Apelin-13组小鼠的中央区活动路程[(0.12±0.04)m]和停留时间[(13.56±7.64)s]均高于模型组[(0.06±0.03)m，(2.48±1.02)s]和生理盐水组[(0.06±0.02)m，(2.82±1.52)s](均 P<0.05)。高架十字迷宫结果显示，4组小鼠进入开放臂的次数和停留时间均差异有统计学意义( F＝10.74，19.12，均 P<0.05)。模型组小鼠进入开放臂的次数[(4.50±2.51)次]和停留时间[(26.95±17.48)s]均少于对照组[(13.75±4.71)次，(103.75±42.43)s]和Apelin-13组[(10.00±5.18)次，(55.98±19.49)s](均 P<0.05)。Morris水迷宫结果显示，在4 d的学习训练中，4组小鼠逃避潜伏期的时间和组别交互作用不显著( F＝1.15， P＝0.34)，但时间主效应和组别主效应显著( F＝131.65，16.98，均 P<0.05)。第2～4天，模型组小鼠的逃避潜伏期长于对照组和Apelin-13组(均 P<0.05)；Apelin-13组小鼠穿越原平台次数和靶象限停留时间均多于模型组和生理盐水组(均 P<0.05)。(2)HE染色结果显示，模型组和生理盐水组小鼠海马CA1区及CA3区神经元排列疏松紊乱，神经元肿胀呈透明空泡化；对照组和Apelin-13组小鼠神经元排列较为致密整齐。(3)Western blot结果显示，4组间的p-PI3K、p-Akt、p-FoxO3a、p62蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比率均差异有统计学意义( F＝21.37，37.35，20.71，13.26，37.65，均 P<0.05)。Apelin-13组小鼠p-PI3K、p-Akt、p-FoxO3a和p62蛋白水平[(0.92±0.07)，(0.90±0.09)，(0.89±0.13)，(1.03±0.08)]均高于模型组[(0.59±0.04)，(0.50±0.07)，(0.49±0.11)，(0.68±0.04)]和生理盐水组[(0.61±0.06)，(0.50±0.08)，(0.53±0.11)，(0.70±0.05)](均 P<0.05)，Apelin-13组小鼠LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比率(0.60±0.06)低于模型组(0.92±0.10)和生理盐水组(0.99±0.05)(均 P<0.05)。 结论:Apelin-13可以改善PTSD小鼠焦虑样行为，提高空间学习记忆能力，其机制可能与上调PI3K/Akt/FoxO3a自噬通路有关。

目的:观察Ⅱ型多磷酸肌醇4-磷酸酶(INPP4B)在人甲状腺乳头状癌组织及其癌旁正常组织的表达，观察INPP4B表达对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响，探讨其调节机制。方法:采用定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测2019年1月至2019年12月期间30例甲状腺乳头状癌患者癌组织及其癌旁正常组织中INPP4B的表达水平。在甲状腺乳头状癌细胞系IHH4细胞中敲减INPP4B表达，采用系列体外试验检查INPP4B表达水平改变对IHH4细胞功能的影响。计量资料用两独立性 t检验，并进行Mann-Whitney U检验非参数分析。 结果:RT-PCR结果显示，在30例甲状腺乳头状癌组织中，有22例INPP4B mRNA水平明显升高，癌组织中INPP4B的高表达率为73.3%(22/30)，显著高于癌旁正常组织(3.3%，1/30)( P<0.01)。Western blot结果显示，在30例甲状腺乳头状癌组织中21例INPP4B蛋白呈上调表达，与RT-PCR检测结果符合率为95.5%。在IHH4细胞中敲减INPP4B表达可上调上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达3.61倍( χ2＝33.800， P<0.05)；下调磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)表达0.24倍( χ2＝14.300， P<0.05)、下调血清/糖皮质激素调节激酶3(SGK3)表达0.18倍( χ2＝19.400， P<0.05)、下调卷曲蛋白(Twist)表达0.31倍( χ2＝8.700， P<0.05)和下调波形蛋白(Vimentin)表达0.25倍( χ2＝15.800， P<0.05)；但敲减INPP4B表达对磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达影响很小，仅下调0.96倍( χ2＝0.000， P>0.05)。噻唑蓝(MTT)增殖试验表明，敲减INPP4B表达可显著抑制IHH4细胞的增殖能力。细胞克隆形成试验结果显示，与对照组[(138±11)个]比较，敲减INPP4B表达组[(76±9)个]的体外集落数量显著减少，差异有统计学意义( t＝9.692， P<0.05)。刮痕愈合试验结果表明，敲减INPP4B表达组和对照组的IHH4细胞刮痕愈合率分别为(33.48±0.05)%和(93.29±0.07)%，差异有统计学意义( t＝68.582， P<0.01)。Transwell试验结果显示，敲减INPP4B表达组和对照组的IHH4细胞迁移细胞数分别为8(4，16)个和129(94，186)个，差异有统计学意义( U＝0， P<0.01)。 结论:INPP4B在甲状腺乳头状癌组织中呈高表达，提示其可能对甲状腺癌的发生发展有重要作用；体外细胞水平敲减INPP4B表达能够抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭能力，提示INPP4B在甲状腺乳头状癌中起促癌作用。

目的:观察Ⅱ型肌醇多磷酸4-磷酸酶（INPP4B）在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达并探讨其临床意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测2014年至2016年间200例PTC患者癌组织及其相应的癌旁正常组织中INPP4B的表达，分析其与患者临床病理特征的关系。计量资料采用Person χ2检验分析。 结果:INPP4B在Ⅰ/Ⅱ期的癌组织和癌旁正常组织中均呈低水平表达，癌组织INPP4B低表达率高于癌旁组织[99.2%（128/129）比100%（129/129）， P<0.050]；在Ⅲ/Ⅳ期的癌组织中呈高水平表达，INPP4B高表达率显著高于癌旁正常组织[98.5%（70/71）比0%（0/71）， P<0.05]及Ⅰ/Ⅱ期的癌组织[98.5%（70/71）比0.8%（1/129）， P<0.05]。INPP4B高表达与PTC患者性别（ P<0.05）、病灶数量（ P<0.05）、局部侵犯（ P<0.05）、淋巴结转移（ P<0.05）和病理分期（ P<0.05）显著相关。 结论:INPP4B在早期PTC发生过程中起抑癌作用；随着肿瘤进展，INPP4B表达上调，在晚期PTC发挥促癌作用。

目的 通过网络药理学和实验验证和探究槲皮素(quercetin)治疗阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)的作用机制.方法 通过TCMSP、Swiss Target Prediction和Uniprot数据库筛选槲皮素对应的作用靶点.通过TCMIP V2.0、TCMSP、TTD、DrugBank、CTD和DisGeNET数据库得到与AD发病机制相关的靶点,并与槲皮素作用靶点进行映射,将得到的交集靶点作为槲皮素治疗AD的靶点.通过String数据库、CytoNCA和MCODE插件对槲皮素治疗AD的靶点进行各蛋白之间的相互作用研究,作用强的靶点为槲皮素治疗AD的关键靶点.将槲皮素治疗AD的靶点通过Cytoscape3.8.2软件的ClueGO插件和DAVID数据库进行GO和KEGG信号通路富集分析.用蛋白印迹法(Western blotting)和实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluo-rescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)对预测的通路进行初步验证.结果 筛选出与槲皮素作用的靶点有230个,与442个AD疾病靶点重合的靶点有43个,该靶点涉及多个生物学过程和54条信号通路.通过聚类分析和网络拓扑参数,得到槲皮素治疗AD的6个关键靶点,包括糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3 β,GSK3β)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、淀粉样 βA4 蛋白(amyloid βA4 protein,APP)、磷脂酰肌醇 3-激酶调节亚单位α(phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit α,PIK3R1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、胰岛素样生长因子 Ⅱ(insulin-like growth factor Ⅱ,IGF2)和转化生长因子β1(transforming growth factor beta-1,TGFβ1);细胞实验结果表明,槲皮素可提高AD细胞模型中的蛋白激酶B(protein kinase B,AKT),GSK-3βmRNA水平,与调控AKT/GSK-3β通路的磷酸化有关.结论 槲皮素可增强损伤神经细胞的稳定性、改善细胞膜的通透性,从而稳定细胞内环境.该作用可能与槲皮素提高AD细胞模型中的AKT、GSK-3β等mRNA水平,调控AKT/GSK-3β通路的磷酸化有关.

目的 探讨Ⅱ型多磷酸肌醇4-磷酸酶(INPP4B)及蛋白激酶B(Akt)在食管鳞癌组织中表达的临床意义及其相关性.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测32例食管癌患者的癌组织及相应的癌旁组织中(距癌组织>5 cm)中INPP4B mRNA的表达情况,并分析其与食管癌临床病理特征之间的关系.采用免疫组织化学SP法检测70例食管癌组织及20例正常食管上皮组织中INPP4B、Akt蛋白的表达情况,并分析与食管癌临床病理特征的关系及其之间的相关性.结果 与癌旁组织相比,32例食管癌组织中INPP4B mRNA表达水平上调的比例为65.5％(P<0.05).INPP4B mRNA的表达水平与食管癌患者的年龄、性别、肿瘤直径、有无淋巴结转移及TNM分期均无相关性(P>0.05).在70例食管癌组织中及20例正常食管上皮组织中,INPP4B蛋白的阳性表达率显著高于正常食管组织(67.1％vs 40.0％,P<0.05),Akt蛋白的阳性表达率显著高于正常食管组织(72.8％vs 25.0％,P<0.05).INPP4B蛋白的表达水平与食管癌患者的年龄、性别及临床病理特征无明显相关(均P>0.05);Akt蛋白的表达水平与肿瘤直径、分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期均有关(均P<0.05).INPP4B与Akt蛋白表达呈正相关(r=0.531,P=0.000).结论 INPP4B在食管鳞癌组织中的表达上调,INPP4B可能通过激活Akt的活化从而在食管癌中起着癌基因的作用,其可能成为食管癌靶向治疗的一个新的靶点.

目的 癌细胞转移是造成乳腺癌患者死亡的最主要原因之一,Ⅱ型多磷酸肌醇4-磷酸酶(inositol polyphosphate 4-phosphatasetype Ⅱ,INPP4B)是一种新发现的、具有抑癌作用的脂质磷酸酶,β-catenin是Wnt信号通路的关键因子,许多人类恶性肿瘤的发生被认为与异常激活的Wnt/β-catenin通路相关.本研究分析INPP4B和β-catenin蛋白在乳腺癌组织中的表达,并探讨其临床意义.方法 收集2014-01-10-2015-12-12沧州市中心医院病理科乳腺癌组织标本248例和同期乳腺良性病变组织标本25例,通过免疫组化法检测INPP4B和β-catenin蛋白,分析INPP4B蛋白表达与临床病理特征和β-catenin蛋白异位表达的关系.结果 248例乳腺癌组织中INPP4B阳性表达率为29.45％(73/248),低于正常乳腺组织84.00％(208/248)的阳性表达率,差异有统计学意义,P＜0.05;β-catenin蛋白在乳腺癌组织中的异位表达率为69.35％(172/248),高于正常乳腺组织的异位表达,差异有统计学意义,P＜0.05;INPP4B蛋白阳性表达率与患者年龄(t=0.430,P=0.573)、肿瘤直径(t=1.548,P=0.216)、ER(t=0.015,P=0.507)、PR(t=0.687,P=0.486)和HER2(t=0.531,P=0.481)等无关联,与乳腺癌TNM分期(t=8.364,P=0.029)以及组织学分级(t=8.107,P=0.018)呈正相关,与β-catenin蛋白异位表达呈负相关(t=-0.908,P=0.000 8);INPP4B和Ecadherin蛋白随乳腺癌TNM分期升高而降低,而Wnt1和Ki-67蛋白则随乳腺癌TNM分期升高而升高.结论 INPP4B蛋白在乳腺癌组织中表达下调,而β-catenin在乳腺癌组织中异位表达上调,两者表达呈负相关,提示INPP4B可能通过wnt/β-catenin信号通路参与乳腺癌的发生发展.

目的:探讨参苓白术散通过调节肠上皮细胞自噬对5％葡聚糖硫酸钠(DSS)所致小鼠炎症性肠病(IBD)的改善作用.方法:84只BALB/c小鼠随机分为7组,每组12只.除正常组之外,5％ DSS自由饮用7d诱导急性炎症性肠病,治疗组分别给予参苓白术散高、中、低剂量(12,6,3 g·kg-1·d-1),美沙拉嗪(2 g·kg-1·d-1),自噬诱导剂雷帕霉素(4 mg·kg-1·d-1)灌胃.苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠结肠组织的病理形态学变化;透射电镜检测肠上皮细胞自噬体形成情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ,磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),泛素结合蛋白-1 (p62),Beclin1磷酸化,ULK1,4EBP蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组小鼠结肠黏膜上皮细胞广泛缺失,腺体大多数不完整,呈结肠炎改变,LC3-Ⅱ含量明显降低(P＜0.05),自噬不明显,而自噬水平增加,结肠组织中自噬通路蛋白PI3K,mTOR,p-p62磷酸化程度及ULK1蛋白表达明显升高(P＜0.05),Beclin1磷酸化程度及4EBP蛋白表达明显降低(P＜0.05);与模型组比较,参苓白术散中、高剂量组,美沙拉嗪组及雷帕霉素组结肠组织明显改善,LC3-Ⅱ含量均明显升高(P＜0.05),参苓白术散高、中、低剂量组,美沙拉嗪组及其对应的抑制剂组可明显抑制PI3K,mTOR,p-p62磷酸化,降低ULK1蛋白表达,促进Beclin1磷酸化及升高4EBP蛋白表达(P＜0.05).结论:参苓白术散抗DSS诱导的IBD的作用与调节肠上皮细胞自噬通路蛋白PI3K,mTOR,p62的磷酸化有关.

目的:研究肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Sp)诱导人肺上皮细胞自噬发生的现象及其机制.方法:常规培养人肺上皮A549细胞与野生型Sp;将GFP-LC3真核载体转染A549细胞,分为实验组(Sp,MOI=30∶1)、阴性对照组[渥曼青霉素(wortmannin,WT),2μmol/L 2 h,自噬抑制剂]、阳性对照组[雷帕霉素(rapamycin,Rapa),1 mmol/L 10 h,mTOR抑制剂]和参照组(WT和Sp共同处理),各组处理时间均为1、2、3和4h;荧光显微镜观察各组自噬点形成,透射电镜观察各组细胞自噬体结构,Western blot检测各组微管相关蛋白轻链-Ⅰ/Ⅱ(microtuble-associated protein light chain 3-Ⅰ/Ⅱ,LC3-Ⅰ/Ⅱ)、磷酸化UNC-51-K激酶1 (phosphorylated UNC-51-like kinase1,P-ULK1)和螯体1(sequestosome 1,P62)的表达;将溶血素表达载体RFP-PLY(red fluorescent protein-pneumolysin)、GFP-LC3或(和)RFP-PLY转染/共转染A549细胞,Western blot检测各组磷酸肌醇3-激酶-Ⅰ/Ⅲ(phosphoinositide 3-kinase-Ⅰ/Ⅲ,PI3K-Ⅰ/Ⅲ)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、Beclin-1蛋白(Beclin 1 protein,Be-clin-1)和哺乳动物雷帕霉素靶(mammalian target of rapamycin,mTOR)的表达.结果:处理A549细胞3h后,与阴性对照组(WT)相比,Sp感染后,自噬点明显增多(t=41.313,P=0.001),电镜观察到典型的自噬体结构,LC3-Ⅱ蛋白表达明显上调(t=121.592,P=0.000);A549细胞转染RFP-PLY处理3h后,与阴性对照组(WT)相比,Sp感染同样观察到明显的自噬现象,PI3K-Ⅰ、Akt蛋白和mTOR表达下调(tPI3K-Ⅰ=16.544,PPI3K-Ⅰ=0.004;tAkt=22.679,PAkt=0.002;tmTOR=19.503,PTOR=0.003),而PI3K-Ⅲ和Beclin-1 水平无明显差异(tPI3K-Ⅲ=3.572,PPI3K-Ⅲ=0.070;tBeclin-Ⅰ=0.799,PBeclin-Ⅰ=0.508).结论:野生型Sp诱导A549细胞自噬可能通过PI3K-Ⅰ/Akt/mTOR信号途径.

背景 冠心病血瘀证是一个"血瘀证前期"→"亚血瘀证期"→"心血瘀阻证期"流动的过程,心肌细胞能量代谢贯穿始终,而以往对能量代谢的研究局限于病程中的某个阶段,且在缺乏对冠心病血瘀证起始、转归整个过程进行研究时,这种孤立存在、缺乏联系的病理学现象并不能诠释心肌能量代谢的特点.因此,探究冠心病血瘀证形成过程中能量代谢改变尤为重要.目的 分析冠心病血瘀证形成过程中心肌细胞能量代谢酶作用及其机制.方法 本实验时间为2019年10—12月.采用简单随机抽样法将30只健康雄性SD大鼠分为空白对照组6只(A组)和模型大鼠24只.A组给予普通饲料喂养,模型大鼠高脂饲料喂养7 d后进行维生素D3灌胃(30万U/kg),4 d后再予以维生素D3灌胃(20万U/kg),继续高脂饲料喂养21 d后,死亡4只大鼠,从剩余20只大鼠中随机选择6只为血瘀证前期组(B组);剩余14只大鼠继续高脂饲料喂养30 d后死亡2只,从剩余12只大鼠中随机选择6只为亚血瘀证期组(C组);余6只大鼠继续高脂饲料喂养的同时予以皮下多点注射异丙肾上腺素(5 mg/kg),连续注射3 d,1周后记录标准Ⅱ导联心电图,以ST段出现上抬或明显压低(≥0.1 mV)确定成模,为血瘀证期组(D组).观察并记录各组大鼠一般情况、血脂指标〔包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平〕、腹主动脉及心肌组织HE染色结果、心电图、线粒体超微结构、心肌组织能量代谢酶〔三磷酸腺苷(ATP)、一磷酸腺苷(AMP)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、酯酰辅酶A合成酶(ACS)、肉毒碱脂酰转移酶(CACT)〕水平.结果 B组大鼠体质量减轻,反应渐迟钝,精神倦怠,毛色枯槁无光泽;C组大鼠体质量明显减轻,精神萎靡,蜷缩相拥,活动量少;D组大鼠精神欠佳,易惊,触之狂躁,毛色枯槁无光泽,爪甲紫暗.B组大鼠TC、LDL-C、HDL-C水平高于A组,TG水平低于A组(P<0.05);C组大鼠TC、LDL-C、HDL-C水平高于A、B组,TG水平低于A组(P<0.05);D组大鼠HDL-C水平低于A、B、C组,TC、LDL-C水平低于B、C组,TG水平高于B、C组(P<0.05).大鼠腹主动脉HE染色结果:B组大鼠动脉内膜出现损伤,内皮细胞肿胀,内膜下及中膜出现明显钙化现象,弹性纤维层被破坏;C组大鼠动脉中膜完全钙化,中膜斑块脱落导致典型的空腔结构;D组大鼠动脉内膜结构破坏,内弹性膜崩解断裂,内、中、外膜三层结构不清晰.大鼠心肌组织HE染色结果:B、C、D组心肌纤维萎缩断裂,胞质呈不规则粗颗粒状,心肌间质水肿,胶原纤维增生.B组大鼠心电图示P波规律出现,P-R间期及R-R间期大致相同,QRS波波形规律,无宽大畸形;C组大鼠心电图示窦性心律,P波规律出现,P-R间期及R-R间期大致相同,QRS波波形规律,J点无明显改变;D组大鼠心电图未见明显P波,R-R间期大致相同,ST段明显压低,T波低平(>0.1 mV).B组大鼠线粒体肿胀,部分线粒体嵴结构出现溶解;C组大鼠线粒体嵴结构大部分出现溶解、空泡形成,线粒体出现明显移位、浓缩;D组大鼠线粒体排列紊乱、多数线粒体嵴结构断裂甚至模糊不清.B组大鼠心肌组织AMP、Ca2+-Mg2+-ATP酶、ACS、CACT水平低于A组(P<0.05);C组大鼠心肌组织ATP、AMP、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶水平低于A组,ATP水平低于B组,ACS水平高于B组(P<0.05);D组大鼠心肌组织ATP、Na+-K+-ATP酶水平低于A、B组,AMP、ACS水平高于B组,ATP水平低于C组,AMP、Ca2+-Mg2+-ATP酶水平高于C组(P<0.05).结论 心肌细胞能量代谢酶参与冠心病血瘀证形成的整个过程.参与代谢相关的酶类中ATP与AMP水平变化最为关键,这将是腺苷活化蛋白激酶(AMPK)通路发挥应激性心肌保护作用的重要信号,同时AMPK通路的激活很可能是触发心肌细胞能量代谢其他酶类变化的上游效应分子.