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三氯异氰尿酸脱黑色素对免疫组织化学检测的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨三氯异氰尿酸脱黑色素对免疫组织化学检测的影响。方法:对40例含黑色素的病例,分别采用3种不同氧化剂(三氯异氰尿酸、高锰酸钾和过氧化氢溶液)对Ki-67、S-100蛋白、HMB45、Melan A、SOX10、β-catenin免疫组织化学染色后漂白,比较3种方法的染色合格率和漂白时间。通过无色素的对照组织验证各抗体DAB信号在三氯异氰尿酸漂白的耐受时间。结果:8%三氯异氰尿酸溶液为最佳反应浓度。8%三氯异氰尿酸漂白在Ki-67、S-100蛋白、SOX10、HMB45、Melan A、β-catenin免疫组织化学染色后(尤其是在中、高色素含量的标本)漂白合格率明显高于0.5%高锰酸钾和10%过氧化氢,差异有统计学意义( P<0.01)。8%三氯异氰尿酸的漂白时间(<20 min)短于0.5%高锰酸钾(约40 min)和10%过氧化氢(24 h)。8%三氯异氰尿酸对各种定位的免疫组织化学抗体的DAB信号均无影响且耐受时间长(20~78 h)。 结论:8%三氯异氰尿酸的DAB后漂白可以作为富含黑色素组织免疫组织化学检测的漂白方法。
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编辑人员丨6天前
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探讨适用于HE染色、免疫组织化学染色和分子检测的最佳脱色素方法
编辑人员丨6天前
目的:探索适用于HE染色、免疫组织化学染色和分子检测的最佳脱色素方法。方法:收集2018年1月至2022年3月福建省肿瘤医院病理科38例富含黑色素的黑色素瘤石蜡标本,制成组织芯片,分别采用水浴过氧化氢法、双重氧化脱色素法、改良高锰酸钾法、三氯异氰尿酸法脱黑色素后行HE染色。之后将切片分成2个队列,第1个队列分别采用上述4种方法脱色素后再行免疫组织化学染色(SOX10、Ki-67、HMB45和Melan A);第2个队列先行同样指标的免疫组织化学染色后再分别采用上述4种方法脱色素。另收集其中色素含量较高的17例石蜡标本,采用上述4种方法脱黑色素后提取DNA,进行DNA浓度及质量的测定。比较分析不同脱色素方法的脱色素能力,以及对HE和免疫组织化学染色的效果、DNA浓度和质量的影响。结果:在脱黑色素能力方面,改良高锰酸钾法和水浴过氧化氢法脱色素效果最好,均仅5.26%(2/38)有少量色素残留;其次是三氯异氰尿酸法,10.53%(4/38)有大量色素残留;最差的是双重氧化脱色素法,15.79%(6/38)有大量色素残留。在HE染色方面,水浴过氧化氢法脱色素后染色好的比例达92.11%,优于其他3种方法。在免疫组织化学染色方面,改良高锰酸钾法、双重氧化脱色素法和三氯异氰尿酸法,先免疫组织化学染色后脱色素的染色评分均值分别为20.84、26.63和35.02,均优于先脱色素后免疫组织化学的染色评分均值(8.70、15.41和21.22);水浴过氧化氢法,先脱色素后免疫组织化学的染色评分均值为33.57,优于先免疫组织化学染后脱色素的染色评分均值(19.96)。HMB45、Melan A和Ki-67这3个指标采用先免疫组织化学染色后三氯异氰尿酸脱色素的染色评分分别为36.45、33.79和36.24,效果最佳;SOX10采用先水浴过氧化氢法脱色素后免疫组织化学染色的评分为34.39,效果最佳。在DNA浓度及质量方面,采用双重氧化脱色素法、改良高锰酸钾法及三氯异氰尿酸法脱色素后,DNA降解严重;而水浴过氧化氢法脱色素后提取的DNA平均浓度为59.59 μg/L,显著高于未经脱色素处理的平均DNA浓度(30.3 μg/L, P=0.001);DNA的吸光度值 A260/ A280均在1.8~2.0之间, A260/ A230 16例在2.0以上,而未经脱色素处理提取的DNA中8例 A260/ A280<1.8,16例 A260/ A230<2.0。 结论:对富含黑色素的黑色素瘤组织进行HE染色和分子检测时,宜选用水浴过氧化氢法脱色素;免疫组织化学染色后采用三氯异氰尿酸法脱色素,色素残留少,染色效果佳,且方便快捷。同一种脱色素方法对不同的抗体染色效果不同,可根据要检测的抗体选择最佳的脱色素方法。
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编辑人员丨6天前
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三氯异氰尿酸通过诱导氧化应激和铁死亡抑制精原细胞增殖
编辑人员丨2024/7/20
目的 探索三氯异氰尿酸(TCCA)对小鼠睾丸精原细胞GC-1氧化应激和DNA甲基化的影响.方法 以TCCA 0(细胞对照),97,194和387 μmol·L-1处理GC-1细胞24 h;CCK-8法检测细胞存活率;Hoechst 33342染色检测各组细胞形态和凋亡率;流式法检测细胞周期;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞凋亡相关基因Bax和Fas、氧化应激相关基因线粒体超氧化物歧化酶(SOD2)、铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)、DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)和DNA甲基转移酶3L(DNMT3L)mRNA表达水平;Griess法测定GC-1细胞一氧化氮(NO)含量,比色法测定丙二醛(MDA)水平;DCFH-DA荧光探针法测定GC-1细胞活性氧(ROS)水平,DNTB比色法测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量,WST-8法测定还原型辅酶Ⅱ(NADPH)含量.结果 与细胞对照组相比,TCCA 194和387 μmol·L-1组细胞存活率降低(P<0.01),出现细胞核固缩及核碎裂,细胞凋亡率显著增加(P<0.01),细胞被阻滞在G2/M期(P<0.05);TCCA 387 μmol·L-1组细胞NO和MDA含量增加(P<0.01),ROS水平升高(P<0.01),GSH和NADPH含量降低(P<0.01),SOD2,GPX4,Nrf2,SLC7A11和DHODH mRNA表达减少(P<0.05,P<0.01);Bax,Fas,DNMT3L和DNMT3A mRNA表达增加(P<0.05,P<0.01).结论 TCCA可降低GC-1细胞存活率,抑制细胞增殖,引起细胞凋亡.其机制可能与其破坏抗氧化系统、增强氧化应激、诱导铁死亡及干扰GC-1细胞甲基化有关.
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编辑人员丨2024/7/20
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5家医院67例消毒负效应案例分析
编辑人员丨2023/8/6
目的 了解医疗机构消毒负效应发生情况,为医院合理使用消毒产品提供建议,减少消毒负效应的发生.方法 选择北京、上海、湖南、黑龙江4个省市的5家三级医院,开展了为期1年的消毒产品负效应的监测,监测对象为接触消毒剂、消毒灭菌器械及可能消毒灭菌因子残留的所有医务工作者、患者、环境物品及医疗器械,对获得的消毒负效应案例按产品主要成分、接触途径和损害特征等进行统计分析.结果 经过1年的监测,共发现67例消毒负效应案例,其中人员消毒负效应54例,年龄主要集中于20~50岁,男女比例为1:2.4,主要损害表现为皮肤黏膜的刺激及过敏反应,发生率前3位主要成分为葡萄糖酸洗必泰+乙醇、三氯异氰尿酸和醋酸氯已定.共发现物品消毒负效应13例,主要损害表现为结构腐蚀,其中含氯消毒剂所占比例最高.结论 医院应增强对消毒负效应的重视程度,了解不同种类消毒产品对人员、器械及环境物品的损害特征,加强个人防护,严格按照产品操作规程开展消毒灭菌工作.
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编辑人员丨2023/8/6
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三氯异氰尿酸应用研究现状及进展
编辑人员丨2023/8/6
三氯异氰尿酸是异氰尿酸的含氯衍生物,有效氯含量高,作用时间长,具有强力的杀菌效果,对水中大部分细菌繁殖体、真菌、病毒芽孢都具有杀灭作用. 目前该消毒剂已被广泛用于医疗卫生、餐饮服务及水体的消毒. 本文对三氯异氰尿酸的理化特性、消毒应用研究进展及毒理学安全风险综述如下.
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编辑人员丨2023/8/6
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两种消毒方法对烧伤患者使用悬浮床滤单终末消毒效果的比较研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 比较2种消毒方法对悬浮床滤单的终末消毒效果.方法 选择2016年1-8月期间60张使用后需进行终末消毒的悬浮床滤单,采用随机数字表法,将滤单分为观察组及对照组,每组各30张.观察组应用老肯牌臭氧床单元消毒机进行二次消毒,消毒时间均为30 min,输出臭氧浓度均≥6 000 mg/m3,产生浓度均为300 mg/m3.对照组采用2 000 mg/L有效氯消毒剂浸泡30 min.比较2组滤单消毒前后菌落数,针对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、白色念珠菌及其他条件致病菌的杀菌效果,滤单破损率.对数据行t检验、Wilcoxon及Mann-Whitney U秩和检验、x 2检验或Fisher确切概率法检验.结果 消毒前后,组间比较差异无统计学意义(t=0.315、Z=-0.334,P>0.05).消毒后,观察组、对照组滤单菌落数分别为(1.7±1.5)、(1.9±1.4)集落形成单位(CFU)/cm2,达到消毒标准(<5 CFU/cm2),且均明显低于消毒前(Z=-6.681、-6.683,P<0.01).组内消毒前后杀菌效果比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).2组间消毒前后杀菌效果比较,差异无统计学意义(P>0.05).观察组及对照组滤单破损率分别为3.33% (1/30)和26.67% (8/30),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 应用臭氧床单元消毒机及有效氯消毒剂浸泡的消毒方法进行滤单终末消毒效果均达到国家卫生部消毒标准,但应用有效氯消毒剂消毒造成滤单的破损率较高,故推荐应用臭氧消毒机进行滤单消毒.
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编辑人员丨2023/8/6
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游泳池水中氰尿酸含量及其对氯化消毒效果影响的研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 了解游泳池水中氰尿酸含量水平及其对水的氯化消毒效果的影响程度.方法 采用理化分析和杀菌实验方法,对昆山市21家游泳场所以三氯异氰尿酸消毒后的水质进行检测.结果 游泳场所水中氰尿酸浓度范围为2 mg/L~ 79 mg/L,中位数为20.0 mg/L.当氰尿酸浓度达到10 mg/L时,水中余氯在0.2 mg/L ~0.6 mg/L区间对水中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭效果开始产生影响,氰尿酸浓度越高,影响越明显.结论 游泳池水中氰尿酸含量≥10 mg/L对氯化消毒的效果会产生影响,应制定合理标准,控制游泳池水中氰尿酸含量.
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编辑人员丨2023/8/6
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三氯异氰尿酸对临床分离多药耐药菌悬液定量杀菌试验研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察三氯异氰尿酸对多药耐药菌(MDRO)的杀灭效果,为临床合理选用消毒剂提供参考.方法 观察三氯异氰尿酸对泛耐药鲍氏不动杆菌(XDRAB)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐药铜绿假单胞菌(MDR-PA)、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)及耐碳青霉烯类大肠埃希氏菌(CRECO)五种临床分离常见耐药菌的抗性实验,并对三氯异氰尿酸消毒效果进行临床评价.结果 悬液定量杀菌试验结果显示浓度≥250 mg/L的三氯异氰尿酸消毒液作用时间≥5 min,可对XDRAB、MRSA、MDRPA、CRKP、CRECO均达到良好的杀灭效果;重症监护病房(ICU)临床评价结果表明,浓度≥500 mg/L的三氯异氰尿酸消毒液可对操作按钮及病床达到合格的消毒水平.结论 推荐临床使用浓度为500 mg/L的三氯异氰尿酸消毒液进行医院环境高度风险区域物体表面擦拭消毒.
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编辑人员丨2023/8/6
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医疗环境表面分离革兰阴性非发酵杆菌对消毒剂抗性的研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 了解医院环境表面分离的革兰阴性非发酵杆菌对消毒剂的抗性情况,为科学选择消毒剂提供依据.方法 采用肉汤稀释法对医院环境物体表面分离出的革兰阴性非发酵杆菌的消毒剂抗性进行测定.结果 从医院物体表面176份标本中分离出15株革兰阴性非发酵杆菌,检出率8.52%,主要来自重症监护病房(ICU).检出部位居前3位的是治疗操作台面、电脑键盘和ICU床栏.三氯异氰尿酸对15株非发酵杆菌的MIC值为有效氯250~500 mg/L,标准菌株为500 mg/L;MBC值为250~1000 mg/L,标准菌株为1000 mg/L.复合季铵盐对15株菌的MIC值为0.98~15.62 mg/L,标准菌株为15.62 mg/L;MBC值为1.95~31.25 mg/L,标准菌株为250 mg/L.结论 医院环境物体表面分离的革兰阴性非发酵杆菌对含氯消毒剂和季铵盐类消毒剂抗力未见升高现象,这些消毒剂在医院环境使用消毒效果可得到保证.
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编辑人员丨2023/8/6
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鼠伤寒沙门菌对抗生素和消毒剂耐药性研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 检测302株食品源、动物源和人源鼠伤寒沙门菌(Salmonella enterica Typhimurium)对抗生素和消毒剂的耐药表型,测定消毒剂耐药基因型,并分析鼠伤寒沙门菌对抗生素和消毒剂耐药的相关性.方法 纸片扩散法测定鼠伤寒沙门菌对16种抗生素的耐药性,微量肉汤稀释法测定4种消毒剂的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentrations,MICs),聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测消毒剂的耐药基因.结果 鼠伤寒沙门菌分离株中96.03% (290/302)至少对一种抗生素有耐药性,79.80% (241/302)是多重耐药(multidrug resistant,MDR)菌株.分离株对链霉素的耐药率最高(78.81%,238/302),其次是磺胺复合物(78.15%,236/302)、四环素(75.50%,228/302)、氨苄青霉素(71.85%,217/302),所有分离株均对头孢吡肟和亚胺培南敏感.食品源鼠伤寒沙门菌对磺胺复合物、四环素、氨苄西林、萘啶酸和庆大霉素的耐药率均高于动物源和人源鼠伤寒沙门菌,差异有统计学意义(P<0.05);动物源鼠伤寒沙门菌对环丙沙星和氧氟沙星的耐药率高于食品源和人源鼠伤寒沙门菌,差异有统计学意义(P<0.05);人源鼠伤寒沙门菌对头孢噻肟和头孢他啶的耐药率高于食品源和动物源分离株.消毒剂苯扎氯铵、三氯生、三氯异氰尿酸和聚维酮碘对鼠伤寒沙门菌分离株的MICs范围分别为2~64、0.031 25~1、32~1 024和256~>1 024 mg/L.食品源与动物源鼠伤寒沙门菌对苯扎氯铵、三氯生和聚维酮碘的耐药率高于人源鼠伤寒沙门菌,差异有统计学意义(P<0.05).分离株中消毒剂耐药基因qacE△1、sugE(P)和qacE检出率分别为56.95%(172/302)、20.53%(62/302)和2.65% (8/302),qacE△1基因与鼠伤寒沙门菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、氟喹诺酮类、磺胺类、氯霉素类和喹诺酮类的耐药性显著相关(P<0.01).结论 鼠伤寒沙门菌对抗生素耐药普遍,多重耐药率较高,并表现对消毒剂的耐药,鼠伤寒沙门菌对抗生素和消毒剂耐药存在相关性.
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编辑人员丨2023/8/5
