目的:通过蛋白质组学对噪声性隐性听力损失机制进行初步探索。方法:于2022年10月，按照单纯随机抽样的方法将64只SPF级雄性C57BL/6J小鼠分为对照组和噪声暴露组，每组32只。噪声暴露组在声压级100 dB、2 000~16 000 Hz宽频噪声下暴露2 h，构建小鼠隐性听力损失模型。采用听性脑干反应（ABR）测试小鼠噪声暴露后第7天的听力阈值变化情况，免疫荧光观察基底膜毛细胞损伤情况，4D-Label-free定量蛋白组学鉴定并分析各组小鼠内耳差异表达蛋白质，并用蛋白印迹（Western blotting）法进行验证，采用方差分析和 t检验对结果进行统计分析。 结果:噪声暴露后第7天，短声（click）、8 000 Hz声刺激时两组小鼠听力阈值差异均无统计学意义（ P>0.05），16 000 Hz声刺激时噪声暴露组小鼠听力阈值明显高于对照组（ P<0.05）；共聚焦免疫荧光显示噪声暴露组小鼠耳蜗组织基底膜毛细胞排列整齐，但中回和底回突触前膜C末端结合蛋白2抗体（CtBP2）相对表达均明显少于对照组（ P<0.05）。GO富集分析显示，差异表达蛋白功能主要集中在膜电位调节、配体门控通道活性、配体门控离子通道活性等。KEGG通路富集分析发现，差异表达蛋白明显富集的通路包括磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）信号通路、NOD样受体信号通路、钙信号通路等。Western blotting结果显示，噪声暴露组小鼠肌醇1，4，5-三磷酸受体3型（Itpr3）表达量升高，溶脂载体家族38成员2（2Slc38a2）表达量降低（ P<0.05）。 结论:在构建的小鼠噪声性隐性听力损失模型中，通过蛋白质组学分析、筛选并验证差异表达蛋白Itpr3和Slc38a2，初步证实以Itpr3和Slc38a2为代表的谷氨酸能突触相关通路可能参与了隐性听力损失的发生。

配体门控离子通道是一大类重要的膜蛋白.嘌呤能配体门控离子通道(P2X)受体和酸敏感离子通道(ASIC)是三聚体配体门控离子通道的代表成员.P2X受体胞内区域的结构差异可影响脱敏过程,胞内区域的侧窗可作为离子渗透到细胞内的潜在路径并对离子选择性有决定作用,胞内区域众多氨基酸残基的磷酸化参与调节离子通道的活性.此外,胞内区域与N-甲基-D-天冬氨酸受体、γ-氨基丁酸受体、5-羟色胺受体和N型乙酰胆碱受体等其他配体门控离子通道存在相互作用并介导突触可塑性等病理生理过程.ASIC胞内区域的构象变化会暴露胞内信号分子的结合位点并促进代谢信号转导,胞内区域的氨基酸Val16、Ser17、Ile18、Gln19和Ala20可以调节通道上膜表达并参与门控过程,胞内区域的PDZ结构域可与多种细胞内蛋白质如骨架蛋白CIPP和p11相互作用从而参与对受体的调控,胞内区域羧基端和氨基端的众多磷酸化位点参与了对受体的调控.此外,胞内区域参与了疼痛、缺血性脑卒中、精神疾病、神经退行性疾病等多种病理生理过程.本文综述了P2X受体和ASIC胞内区域的结构以及在调节离子通道的门控特性和病理生理功能中的作用,以期为三聚体配体门控离子通道的药物研发提供新思路.

痛风是嘌呤代谢障碍和/或尿酸排泄减少使血尿酸持续升高而导致尿酸盐结晶(monoso-dium urate,MSU)析出并沉积在关节或关节周围组织中引起关节肿痛的炎症性疾病,其主要的临床表现为反复发作的急性痛风性关节炎.一般认为,MSU刺激IL-1β分泌引起关节肿痛是痛风的主要发病机制,但该机制不能解释为何多数高尿酸血症患者不出现痛风发作.

P2X受体(P2X receptor,P2XR)家族是三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)配体门控的非选择性阳离子通道.目前已经克隆出的哺乳动物P2XR有7种,分别为P2X1～7,并且其药理学特性也有了一定的研究进展.天然P2XR组装的同源或异源三聚体离子通道,可以参与多种生理学功能.本文就P2XR的结构、功能及其在肺部疾病中的研究进展进行综述.

目的 通过建立稳定表达嘌呤受体P2 X配体门控离子通道7(P2X7R)的野生型或突变体型人急性白血病单核细胞株(THP-1)源性单核细胞系,分析高尿酸背景下P2X7R的Arg 307>Gln SNP基因型的功能改变.方法 慢病毒转染THP-1细胞,建立稳定表达野生型、突变体型Arg 307>Gln和空病毒型的THP-1细胞系,设置野生型、突变体型Arg 307>Gln和空病毒型3型,每型分3组,分别加入尿酸单钠盐(MSU)(M组)、MSU+三磷酸腺苷(ATP)(MA组)、空白对照组(C组).丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)分别刺激3组细胞,离心撤去PMA;M组、MA组中加入MSU孵育,之后MA组中加入ATP孵育;分别收集3组细胞上清液和细胞.ELISA法检测3组上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达水平,qRT-PCR检测3组细胞IL-1β、核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白含半胱氨酸天冬氨酸-1蛋白酶结构域(ASC)和Caspase-1 mRNA表达水平.结果 单纯加入MSU晶体后,野生型、突变体型Arg 307>Gln和空病毒型3者之间均无差异(P>0.05).加入ATP孵育后,野生型中IL-1β和NLRP3水平均高于突变体型Arg 307>Gln,差异有统计学意义(P<0.05).而ATP-P2X7R-IL-1β信号通路上ASC和Caspase-1 mRNA水平在野生型和突变体型2者之间无差异(P>0.05).结论 在高尿酸背景下,突变体型Arg 307>Gln使P2X7R功能明显下调,IL-1β和NLRP3表达水平均降低.Caspase-1、ASC可能分别在激活通路过程中被降解.