目的 以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径.方法 以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响.结果 带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73％;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100％;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58.带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT0.5mg/L中培养30d后,增殖系数亦可达44.36.2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg几+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗.复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100％.再生苗移栽成活率达95％以上.结论 建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础.

该研究以'章姬'脱毒苗带节匍匐茎段为外植体,以MS为基本培养基,进行单因素预实验,选取适合'章姬'草莓生长的植物激素种类和质量浓度范围,进而通过L9(34)正交实验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响.结果表明:采用的3种基本培养基中,B5和1/2MS对抑制培养过程中的褐化现象明显优于MS,而附加20 g·L?1Na2S2O3在保证材料存活的前提下,大大降低了褐化率;去除褐化的材料在MS + 0.1 mg·L?16?BA + 0.05 mg·L?12,4?D + 0.1 mg·L?1NAA中可同步进行愈伤组织诱导和丛芽发生;丛芽增殖培养基为MS + 0.1 mg·L?16?BA + 0.1 mg·L?1NAA,30 d 后繁殖系数可达12.86;试管苗生根则在1/2MS + 1.0 g·L?1AC中进行,35 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率92.50%.再生苗移栽成活率在95%以上.该研究建立了'章姬'草莓体外高效快速繁殖体系,对短期内为'章姬'草莓栽培提供大量种性稳定、质量优良的种苗具有重要意义,同时为其他草莓品种的体外快繁提供了技术参考.

以金佛山兰子房、柱头等为外植体,通过丛芽诱导、继代增殖和生根建立离体繁殖体系.结果表明,丛芽诱导最佳外植体为子房,最适培养基为MS+2.0 mg·L-1 ZT+0.2 mg·L-1 NAA;最佳丛芽继代培养基为MS+1.5mg·L-1 ZT+0.15 mg·L-1 NAA,1～4代平均繁殖系数为4.76倍,丛芽长势良好;最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L-1NAA+0.05 mg·L-16-BA,生根率达100％,根长为3.95 cm.试管苗移栽到金佛山自然生境,60 d后的移栽率达60％,且生长良好.

目的:建立臭参腋芽增殖和不定丛芽快速繁殖体系,筛选适宜高效的离体再生途径.方法:选取无菌实生苗高位带芽茎段为腋芽增殖材料、基茎不定休眠芽为丛芽增殖材料,采用不同种类和质量浓度的植物激素对外植体增殖及植株再生进行研究.结果:2种外植体中,基茎不定休眠芽是最理想的增殖材料,其继代增殖适宜的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L,增殖系数21.0以上;高位带芽茎段是腋芽增殖的适宜材料,在MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L培养30 d后,腋芽增殖系数为4.55;生根的适宜培养基为30％蔗糖的1/2 MS培养基,30 d后即可获得完整的再生植株,不定根发生率为90.33％;将生根苗炼苗移栽至腐殖质土壤中,成活率达到100％.结论:成功建立了臭参2种离体再生途径.

为建立新疆狭叶薰衣草(Lavandula angustifolia)的快速繁殖体系,以种子、茎、叶为外植体,对种子萌发、愈伤组织诱导、丛芽分化和生根的最适培养条件进行了研究;用水蒸气蒸馏法提取狭叶薰衣草挥发油,采用气相色谱-质谱法测定挥发油成分.结果表明,种子浸泡的适宜时间为6 h,切开种皮培养,出芽时间最少为6 d;诱导种子出芽的适宜培养基为MS+6-BA 2 mg/L;以茎为外植体诱导愈伤组织效果较好,适宜培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;诱导分化丛芽的适宜培养基为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;生根的适宜培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;盆栽薰衣草和无菌苗薰衣草的挥发油主要成分相差较大,离体培养的薰衣草的主要挥发性成分有叶绿醇、丁香油烃、氧化石竹烯等.

以崖柏(Thuja sutchuenensis)茎尖为外植体,通过丛芽诱导、继代增殖和生根建立离体繁殖体系.结果 表明,先用体积分数为75％乙醇漂洗1 min,再用质量分数为0.15％氯化汞消毒16 min,表面消毒效果最好,无菌外植体获得率为55.56％;丛芽诱导最适培养基为1/2SH+2.0 mg·L-1 Trans-ZT,丛芽诱导率达100％;最佳丛芽继代增殖培养基为1/2SH+2.0 mg·L-1 Trans-ZT+0.2 mg·L-1 NAA,1～4代平均繁殖系数为12.40(倍),丛芽长势旺盛;不定芽用100mg·L-1 IBA速蘸基部10s后转入DCR基本培养基培养,针叶型不定芽的生根率为76.67％,最长不定根达13.5 cm.

目的 优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系.方法 以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L9(34)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响.结果 在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS +NAA 0.1 mg/L+ 6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100％,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9％;试管苗经炼苗后移栽成活率90％以上.结论 研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路.

目的:建立阳春砂种子苗和分株苗的质量分级标准,规范阳春砂种苗生产流通,保障阳春砂规范化、规模化种植.方法:在全国砂仁主产区收集砂仁种子苗和分株苗,测定各种苗的株高、叶片数、丛芽数、球状茎粗、匍匐茎粗等指标,采用主成分分析和K类中心聚类法对数据进行分析并完成砂仁种苗分级.结果:阳春砂种苗可分为2个种类,每个种类2个等级.Ⅰ级种子苗:苗高≥40 cm,丛芽数≥3个;Ⅱ级种子苗:15 cm≤苗高<40 cm,1个≤丛芽数<3个;Ⅰ级分株苗:60 cm≤苗高<110 cm,5片≤叶片数<10片;Ⅱ级分株苗:110 cm≤苗高<180 cm,10片≤叶片数<20片.结论:阳春砂种苗质量分级标准适用于该药材的规范化生产.

以优质'大果'黑果枸杞(Lycium ruthenicum)幼嫩叶片经初代培养获得的愈伤组织为试材,在再生体系的不同培养阶段分别添加腐胺(Put)、精胺(Spm)及香豆素(CM)三种不同外源诱导子,研究对愈伤组织增殖、不定芽诱导增殖、壮苗生根及褐化、玻璃化("两化")的影响.结果表明:在愈伤组织继代增殖培养中,Put最佳浓度为15 mg·L-1,增殖倍数最高6.8,褐化指数降至0级;在不定芽诱导和增殖培养中,Spm能提高不定芽的分化率和增殖倍数,并能防止玻璃化苗发生和愈伤组织在分化过程中的褐变,不定芽诱导培养的最佳浓度为20 mg·L-1,分化率达68.3％,不定芽增殖培养的最佳浓度为30 mg·L-1,增殖7.2倍;在壮苗培养中,适宜浓度CM能有效降低组培苗玻璃化率,提高丛芽质量,最适浓度为15 mg·L-1,壮苗生根效果最佳,移栽成活率达94.6％.试验构建了促生长、控"两化"的植株再生技术新体系.

目的:筛选适宜的植株再生途径,建立背蛇生人工高效繁殖技术体系.方法:以背蛇生带芽茎段为外植体、以MS为基本培养基,分别考察了不同的植物激素种类和质量浓度对带芽茎段基部丛生芽的发生、增殖及生根的影响.结果:带芽茎段在MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 1.5 mg/L+KT 1.5 mg/L中培养10 d后节上腋芽开始萌发生长;30 d后基茎节处出现大量丛生芽,发生率为86％;45 d后在既有基部不定丛芽又有上部腋芽生长的簇状丛生系统,增殖系数达10.0以上.不定根的诱导则在1/2 MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 1.5 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100％;生根苗经过炼苗,移栽30 d后成活率达100％.结论:在背蛇生的体外快繁中,带芽茎段基茎丛生芽发生为最有效途径,该方式较愈伤组织间接发生不定芽效率及质量更高.该研究所建立的高效繁殖技术体系为濒危野生物种蛇背生的种质资源保护和规模化生产奠定了实验基础.