目的:基于数据挖掘方法分析近20年中药复方专利干预DN的用药及配伍规律，为临床新药的研发提供依据。方法:检索国家专利平台治疗DN的中药复方专利，运用Excel 2019软件进行药物频次、性味归经统计；利用SPSS Modeler 18.0及SPSS Statistic 26.0软件进行药物关联规则和聚类分析；采用Cytoscape 3.9.0软件构建核心药物共现复杂网络，并展现潜力新方新药的关联性。结果:共纳入中药复方专利261项，包含中药438味，高频中药有黄芪、生地黄、丹参、枸杞子等，药物类别以补虚药为主，性味以寒、甘居多，归经多属肝、肾经。常用药对有灵芝-生地黄等，常用角药有三七-当归-灵芝等。聚类药物有“三七、灵芝、当归、芡实、生地黄、枸杞子”等7组，潜力药物有“凌霄花-宽筋藤-刺楸树根-毛蜂子-黑阳参-柠条-泽泻实-断节参”等5组，通过拓扑属性分析筛选得到治疗DN的核心新方。结论:国家中药复方专利治疗DN基于本病本虚标实的病机，多运用益气健脾、滋阴补肾、活血化瘀等治法提高临床疗效，可为新药研发提供思路。

目的 考察枸杞子与菊花药对配伍对发育期豚鼠光源性近视发生及发展的影响.方法 采用三基色荧光灯照射发育期豚鼠,建立光源性近视模型,枸杞子-菊花提取物添加饲料饲养豚鼠,利用眼科A型超声测量仪检测眼轴,HE染色观察豚鼠视网膜病理损伤,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测豚鼠视网膜多巴胺(DA)及褪黑素(MT)含量,转录组学分析等方法探讨枸杞子-菊花对豚鼠光源性近视的影响.结果 造模 6 周后,与正常组相比,模型组豚鼠眼轴显著增长(P<0.01),近视模型建立成功;枸杞子-菊花提取物可有效减缓模型组豚鼠晶状体加厚、玻璃体腔加深,进而延缓整体眼轴的过度增长;模型组豚鼠视网膜组织变薄,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目显著降低,神经节细胞核稀疏,神经节细胞层空泡化明显,枸杞子-菊花提取物能保护视网膜细胞,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目增加,神经节细胞核增多;ELISA检测显示模型组豚鼠视网膜内DA、MT水平显著降低(P<0.05),中、高剂量枸杞子-菊花提取物能够有效提升模型组豚鼠视网膜及血清中DA含量(P<0.01,P<0.001);眼部转录组学分析筛选的差异基因主要富集于过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、含胶原蛋白的细胞外基质等相关途径;ELISA结果显示,高剂量枸杞子-菊花提取物能显著增加PPARγ、COL1A1 含量(P<0.01),降低SMA含量(P<0.05).结论 枸杞子-菊花药对具有延缓发育期豚鼠光源性近视发生及发展效用,保护视网膜细胞,改善人工光环境导致的DA分泌紊乱,参与调控眼部PPARγ水平,对光源性近视的防控具有积极意义,为临床合理用药和创制眼功能健康产品提供了科学依据.

基于视网膜变性(retinal degeneration diseases,RDD)小鼠模型,采用多元统计分析方法比较不同产地枸杞子的视网膜保护作用.通过腹腔注射碘酸钠(NaIO3)构建小鼠RDD小鼠模型,采用双门黑白箱和TUNEL测定评估视觉功能和视网膜细胞凋亡情况;采用眼底光学相干断层扫描(OCT)检测视网膜厚度并进行眼底照相,测定血清和眼球中氧化应激、炎症和血管生成标志物的水平.采用层次聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法判别分析进行不同产地枸杞子对小鼠RDD模型视网膜保护作用的综合比较.结果显示,不同产地枸杞子提取物均可逆转NaIO3 诱导的视觉及视网膜损伤和细胞凋亡,改善小鼠体内氧化应激水平及炎症因子和血管生成标志物的表达.基于 17 个药效学指标进行多元统计分析后发现,产于宁夏的枸杞子提取物相较于其余 4 个产地的受试样品呈现更好的RDD治疗效应.研究结果可为防治RDD的枸杞子优势产地选择提供科学依据.

目的:研究黑果枸杞多酚对二苯甲酮-3(BP-3)致雄性泌尿生殖损伤的影响及其机制.方法:分别通过CTD数据库和Swiss Target Prediction、TargetNet数据库筛选出BP-3的雄性泌尿生殖毒性靶点和黑果枸杞多酚的药理靶点;通过Venny 2.1.0工具得到BP-3与黑果枸杞多酚的交集靶点.将靶点输入STRING数据库,构建蛋白相互作用网络.在R语言中进行GO生物学过程富集分析和KEGG代谢途径富集分析.运用Cytoscape 3.8.2软件构建黑果枸杞多酚—共同靶点—通路网络.利用AutoDockvina 1.1.2软件将上述靶点分别与黑果枸杞多酚及BP-3进行分子对接.结果:筛选得到56个BP-3雄性泌尿生殖系统潜在作用靶点,296个黑果枸杞多酚的潜在药理靶点,交集靶点14个.药物代谢动力学分析得出,黑果枸杞多酚中对香豆酸、咖啡酸有较好类药性和较强肠道吸收性;GO、KEGG富集分析结果提示BP-3和黑果枸杞多酚可作用于雄性泌尿生殖系统;共同靶点—通路网络分析结果表明,PIK3R1、TP53等分子可能在黑果枸杞多酚缓解BP-3所致的雄性泌尿生殖损伤中发挥着重要作用;分子对接结果表明,BP-3和黑果枸杞多酚可通过氢键等化学键形式与PIK3R1、TP53、ESR1、PTGS2、ESR2活性位点附近的氨基酸结合,且两者与靶蛋白间均具有较强的结合能.结论:黑果枸杞多酚可以从一定程度上缓解BP-3所致的雄性泌尿生殖损伤效应,PIK3R1、TP53、ESR1、PTGS2、ESR2等靶点分子可能介导了上述拮抗效应.

分析新旧人教版教材"细胞大小与物质运输的关系"实验,指出该实验中NaOH具有腐蚀性以及琼脂块制作难度大,存在危险性和不易操作等问题,从实验材料和染料两个方面提出改进意见:用苹果、白萝卜、土豆为材料代替琼脂块,用墨水、火龙果、黑枸杞为染液代替NaOH溶液,既提高了实验的便捷性与安全性,也有利于实验的普及.

比较不同干燥方法对黑果枸杞的外观性状、口感、活性成分含量及其抗氧化活性的影响,指导黑果枸杞生产实践.分别将冷冻干燥、低温干燥和自然烘干的黑果枸杞用福林酚比色法、紫外分光光度法、消光系数法和DPPH法、FRAP法测定总多酚、原花青素、花色苷含量及抗氧化活性.结果表明,干燥方法对黑果枸杞的性状、口感、活性成分含量及抗氧化活性均产生一定程度影响.冷冻干燥后黑果枸杞外观性状及口感均佳,水分含量低,总多酚、原花青素、花色苷含量低于自然晾干者,但其清除DPPH自由基能力最强;自然晾干者外观形状及口感较差,水分含量高,但其3种活性成分含量最高,FRAP法测得的抗氧化活性最强.因此应综合考虑性状、口感、抗氧化活性及生产成本选择黑果枸杞的干燥方法.

掌握黑果枸杞在黑河流域中下游的资源种类及分布范围,为合理开发使用上述地区的黑果枸杞提供科学依据.根据黑河流域黑果枸杞的分布情况,采用线路调查、走访调查以及区采药农的方法,进行野外调查记载、采集、室内鉴定、分类研究.运用ArcGIS软件分析分布区域特点.基本掌握了黑果枸杞的种类、分布范围及蕴藏量,并对其种质资源数量有了了解.为合理开发使用黑果枸杞提供了科学依据,避免因不合理的开发利用而导致对生态环境的破坏.

目的 建立黑果枸杞中季铵型生物碱含量检测的紫外-可见分光光度测定法,利用液相色谱-质谱联用技术对黑果枸杞中含氮化合物进行成分定性分析.方法 采用紫外-分光光度仪,于524 nm波长处,以雷氏铵盐沉淀法测定总季铵型生物碱含量;色谱柱为BOS Hypersil C18(2.1 mm×150 mm,2.4μm),流动相A为0.1％甲酸水溶液,B为乙腈,梯度洗脱,流速0.3 ml/min,柱温:35℃,电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)源正离子检测条件下对黑果枸杞中含氮化合物进行成分分析.结果 甜菜碱作为对照品,取样量在981～4906μg之间,吸光度与甜菜碱取样量之间线性关系良好,Y=0.0001X-0.0055,r=0.9993.平均回收率为98.53％,RSD为1.19％(n=6);采用液相色谱-质谱联用技术分析出12种含氮化合物,其中,N(1)-二氢咖啡酰-N(12)-咖啡酰精胺和对羟基肉桂酰-二氢咖啡酰亚精胺属于首次于黑果枸杞中发现成分.结论 本文建立的季铵型生物碱含量测定方法简单、易操作、重复性良好,可用于黑果枸杞中季铵型生物碱含量测定;对黑果枸杞中含氮化合物的定性分析可为其质量控制提供参考.

分析了塔里木河上游荒漠区灌木植物叶片和土壤碳(C)、氮(N)、磷(P)含量及其化学计量特征以及二者之间的相关性,旨在阐明荒漠植被在极端环境下养分循环及限制状况,为塔里木河上游荒漠生态系统的恢复与保护提供理论依据.以塔里木河上游多枝柽柳(Tamarix ramosissma)、盐穗木(Halostachys caspica)、黑果枸杞(Lycium ruthenicum)、铃铛刺(Halimodendronhalodendron)4种荒漠灌木植物叶片和土壤为研究对象,分析植物叶片和土壤C、N、P生态化学计量特征及其相关性.结果表明:在4种不同荒漠灌木植物叶片中柽柳叶片的C含量为(484.77±59.74) mg/g,显著高于其他灌木植物(P＜0.05);铃铛刺的N含量是(14.20± 1.58) mg/g,显著高于其他灌木植物(P＜0.05);柽柳叶片的P含量为(0.54±0.16) mg/g,显著低于其他灌木植物(P＜0.05).4种灌木植物叶片C/N比值大小为黑果枸杞＞柽柳＞铃铛刺＞盐穗木,且黑果枸杞的C/N比值显著最高为(37.83±7.74) (P＜ 0.05);C/P为柽柳＞铃铛刺＞盐穗木＞黑果枸杞,盐穗木和黑果枸杞的C/P显著低于其他灌木(P＜0.05),其比值分别为(379.76±158.63)和(383.47±128.95);N/P为柽柳＞铃铛刺＞盐穗木＞黑果枸杞,柽柳的N/P比值显著最高为(22.34±4.60)(P＜0.05).4种不同荒漠灌木土壤的有机碳(soC)、全氮(TN)、全磷(TP)含量及其化学计量比特征均未表现出显著的差异.由相关性分析可知柽柳叶片仅P含量与土壤TP含量呈现出显著正相关(P＜0.05);铃铛刺叶片C含量与土壤TN、叶片P含量与土壤TN/TP均呈显著负相关(P＜0.05),而叶片C含量与土壤TN/TP呈极显著负相关(P＜0.01);盐穗木和黑果枸杞叶片化学计量特征与土壤的化学计量特征均未表现出显著相关性(P＞0.05).说明植物叶片化学计量特征并非是由土壤养分含量特征直接决定的,更多受植物自身遗传特性的影响,体现了荒漠灌木植物对极端生境的适应性.

目的 对可能参与花青素代谢调控的黑果枸杞R1-MYB转录因子基因进行克隆、生物信息学分析和不同品种、同一品种不同器官及盐胁迫条件下差异表达分析.方法 通过同源基因克隆和RACE方法得到黑果枸杞R1-MYB转录因子编码区全长,通过转录组数据获得宁夏枸杞同源基因序列.通过Prot、Param、Smart、PSORT和SOPMA进行生物信息学分析,通过MEGA 5.0构建NJ系统进化树.同时采用Real-time PCR的方法进行基因表达分析.结果 获得黑果枸杞LrMYB lR1(KY568981)及宁夏枸杞LbMYB1 R1 (KY568982)基因全长cDNA,cDNA编码区全长1 496 bp,编码区为927 bp,编码产物包含308个氨基酸,编码蛋白相对分子质量分别为33 400和33 490,理论等电点分别为7.80和7.78,属于R1-MYB转录因子,经预测其编码蛋白位于细胞核中;LrMYB 1R1和LbMYB1R1与茄科植物番茄、马铃薯、烟草中的MYB 1R 1-like蛋白具有高度相似性.LrMYB1R1的表达表现出器官和发育阶段中差异性,具有品种特异性,LrMYB 1R1的表达受盐胁迫抑制.结论 丰富了对R1类MYB转录因子的研究,为接下来的基因功能研究及利用基因工程手段提高黑果枸杞中花青素含量奠定基础.