2型糖尿病是与胰岛素功能障碍及胰岛素抵抗相关的慢性炎症过程。炎症状态下中性粒细胞释放细胞外陷阱(NETs)，该结构与糖尿病的病程发展相关联。弹性蛋白酶抑制剂(SerpinB1)作为内源性分泌蛋白可以有效地抑制该结构对胰岛细胞功能及胰岛素作用信号通路的影响，并且还有促进胰岛β细胞增殖的作用。本文旨在探讨NETs及其抑制剂SerpinB1与2型糖尿病的关系。

目的:探讨肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)在抗β 2GP1/β 2GP1复合物诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成中的作用。 方法:分离健康人外周血中性粒细胞与抗β 2GP1/β 2GP1复合物(100 μg/ml)共孵育一定时间，Western blot检测细胞PAD4表达；进一步采用PAD4抑制剂Cl-amidine(10 μmol/L)预处理中性粒细胞，Western blot检测细胞瓜氨酸化组蛋白3(CitH3)蛋白质表达，ELISA检测细胞培养上清中髓过氧化物酶(MPO)-DNA相对含量。下腔静脉狭窄法建立APS小鼠血栓模型，并通过腹腔注射Cl-amidine(50 mg/kg)进行干预，Western blot检测血浆中CitH3蛋白质表达，荧光染色法检测血浆中循环游离DNA(cf-DNA)浓度，取下腔静脉血栓称其重量，观察Cl-amidine能否抑制APS-IgG诱导的NETs和血栓形成。组间差异采用 t检验或单因素方差分析。 结果:抗β 2GP1/β 2GP1复合物能够显著下调细胞质中PAD4蛋白质表达水平[(3.67±0.32) vs (1.47±0.19)， t＝10.22， P<0.05]，并使细胞核内PAD4蛋白质含量升高[(0.57±0.19) vs (2.97±0.31)， t＝11.49， P<0.05]；Cl-amidine能显著抑制抗β 2GP1/β 2GP1复合物诱导的中性粒细胞CitH3蛋白质表达[(2.46±0.47) vs (0.46±0.13)， t＝12.24， P<0.01]，明显减少培养上清中MPO-DNA含量[(4.09±0.94) vs (2.80±0.57)， t＝4.23， P<0.05]。在体内试验中，Cl-amidine能显著抑制APS小鼠血浆中CitH3蛋白质表达[(3.97±0.56) vs (1.09±0.45)， t＝11.83， P<0.01]，明显降低APS小鼠血浆中cf-DNA浓度[(2 685.0±735.8) vs (1 784.0±577.0)， t＝3.93， P<0.05]；与对照组EAPS小鼠相比，经Cl-amidine预处理的APS小鼠血栓形成明显减小[(8.22±3.06) vs (4.89±1.90)， t＝2.27， P<0.05]。 结论:PAD4参与了抗β 2GP1/β 2GP1复合物诱导的NETs形成，其可能在APS血栓形成中发挥重要作用。

目的:探讨胆总管结石患者胆汁中性粒细胞胞外诱捕网(NET)激活水平及其临床意义。方法:纳入2021年5月至2022年10月在安徽医科大学第一附属医院消化内科行内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)的患者130例。根据病因，将患者分为胆总管结石组(90例)和非胆总管结石组(40例)，胆总管结石组进一步分为大结石组(最大径>1 cm，36例)和小结石组(最大径≤1 cm，54例)。收集130例患者术中和16例留置鼻胆管患者ERCP术后24 h胆汁样本。采用酶联免疫吸附试验测定胆汁中髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)的水平。比较胆总管结石组与非胆总管结石组、小结石组与大结石组、胆总管结石患者ERCP治疗前与治疗后的MPO、NE、CitH3水平。统计学方法采用Mann-Whitney U检验、Wilcoxon符号秩检验。 结果:胆总管结石组患者胆汁MPO、NE、CitH3分别为32.6 U/L(28.5 U/L)、30.6 ng/L(35.2 ng/L)、0.37 μg/L(0.73 μg/L)，均高于非胆总管结石组[MPO为19.9 U/L(36.4 U/L)、NE为18.2 ng/L(27.4 ng/L)、CitH3为0.10 μg/L(0.25 μg/L)]，差异均有统计学意义( Z＝2.91、3.20、3.34， P＝0.004、0.001、0.001)。大结石组患者胆汁MPO、NE、CitH3分别为47.0 U/L(49.4 U/L)、48.4 ng/L(39.5 ng/L)、0.83 μg/L(1.08 μg/L)，均高于小结石组[MPO为29.3 U/L(17.5 U/L)、NE为24.0 ng/L(25.8 ng/L)、CitH3为0.27 μg/L(0.45 μg/L)]，差异均有统计学意义( Z＝2.01、3.58、3.63， P＝0.044、<0.001、<0.001)。胆总管结石患者行ERCP治疗后的胆汁MPO[19.4 U/L(19.8 U/L)]、NE[12.7 ng/L(15.1 ng/L)]、CitH3[0.05 μg/L(0.12 μg/L)]与ERCP治疗前[MPO为33.6 U/L(36.7 U/L)、NE为22.7 ng/L(25.9 ng/L)、CitH3为0.14 μg/L(0.27 μg/L)]相比均明显降低，差异均有统计学意义( Z＝3.52、3.30、3.18，均 P<0.001)。 结论:胆总管结石患者胆汁中NET激活水平升高，ERCP术后胆汁NET激活水平降低，提示NET可能参与胆总管结石的形成过程。

大面积烧伤可诱发复杂的免疫反应，严重影响患者预后。中性粒细胞作为天然免疫的重要效应细胞，其在患者烧伤休克阶段的功能作用尚不十分清楚。该研究观察到，烧伤休克患者血液循环中的中性粒细胞计数和百分比（中性粒细胞占白细胞总数的比值）明显增加，进一步采用免疫荧光成像技术在烧伤患者或动物模型中观察到中性粒细胞的细胞核存在左移现象。通过琼脂糖迁移模型评估中性粒细胞的趋化功能，显示其趋化能力在烧伤患者早期即出现明显下降，这种下降与细菌内毒素激活P2RX1介导中性粒细胞趋化停止信号有关。进一步研究观察到，从烧伤休克患者血液中分离出来的中性粒细胞释放了更多的抗菌蛋白，但抗菌蛋白并非是通过中性粒细胞胞外诱捕网（NET）途径产生的，而主要是通过中性粒细胞脱颗粒的胞吐作用来实现的。同时，烧伤患者中性粒细胞通过产生活性氧自由基和NET进行抗菌的能力明显减弱。此外，中性粒细胞释放肝素结合蛋白及中性粒细胞表面P2RX1表达增加促进了血管渗漏的发生。因此，针对以中性粒细胞为代表的免疫系统早期干预和调节将有利于重度烧伤患者的治疗。

痛风是嘌呤生成和代谢异常导致单钠尿酸盐（MSU）结晶沉积在关节及周围组织引发的一组异质性疾病。中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）作为机体受到刺激时对抗细胞外病原体的免疫策略之一，MSU晶体诱导的NETs可激发促炎反应，而聚集的NETs（aggNETs）可以通过降解促炎细胞因子和趋化因子进而缓解急性痛风性炎症，并且NETs可以与MSU晶体结合共同参与痛风石的形成。本文概述了痛风中NETs形成的机制及在痛风不同阶段NETs发挥的作用，以期为痛风的诊治找到新的靶点。

牙周炎是由菌斑生物膜引起的牙周组织慢性感染性疾病，可导致牙龈出血、牙齿松动并最终脱落。在牙周炎的发展过程中，中性粒细胞发挥着双重作用，既可以保护牙周组织免受病原体的侵害，也可能对牙周组织产生破坏性影响。本文从呼吸爆发、中性粒细胞细胞外诱捕网、脱颗粒作用以及吞噬作用等4个方面介绍中性粒细胞在牙周炎中的保护和破坏牙周组织的双重作用机制，以期深入阐述中性粒细胞在牙周炎中的作用，有助于临床医师更好地了解牙周炎的发生和发展机制，为牙周炎的预防和治疗提供新思路。

SLE是一种可累及全身多个系统的自身免疫病，糖皮质激素和免疫抑制剂是目前治疗的主要药物，但部分患者疗效欠佳，且治疗期间感染风险大，严重影响着患者的生存及预后。近年越来越多的分子靶向药物进入了临床治疗，但效果不甚理想。研究表明异常的大鼠肉瘤蛋白（RAS）信号通路可通过促进中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的形成、影响细胞铁代谢及铁死亡、活化淋巴细胞等过程，在SLE的发生发展中发挥着潜在作用。本文就RAS信号通路在SLE发病过程中的研究进展进行综述，以期为SLE靶向治疗提供新的探索方向。

目的:通过实验研究胆道闭锁(biliary atresia，BA)患儿总胆固醇(total cholesterol，TC)对胆管损伤的影响，并探讨其免疫学机制。方法:回顾性收集2011—2020年间广州市妇女儿童医疗中心收治的118例经术中胆管造影确诊的BA患儿、80例同龄婴儿肝炎综合征(infantile hepatitis syndrome，IHS)患儿以及165例无肝病学证据且无肝功能异常的同龄正常对照(normal control，NC)儿童外周血TC含量。分析TC与胆管损伤各指标及多种与BA形成相关免疫细胞之间的关联。在体外CD177 ＋中性粒细胞与胆道上皮细胞(biliary epithelial cell，BEC)共培养体系中加入胆固醇，观察其对BEC凋亡的影响，同时观察加入胆固醇刺激后CD177 ＋中性粒细胞内相关指标的变化；根据外周血TC检测数值将BA患儿分为高胆固醇BA组、正常胆固醇BA组，通过RNA测序分析，比较高胆固醇组、正常胆固醇组BA患儿CD177 ＋中性粒细胞基因表达差异。 结果:BA患儿外周血TC含量为4.9(4.0，6.1)mmol/L，高于NC组的3.7(3.1, 4.1)mmol/L及IHS组的4.2 (3.3，5.4)mmol/L，差异有统计学意义( P<0.05)；BA患儿外周血TC含量[4.9(4.0, 6.1)mmol/L]与胆管损伤指标γ-谷氨酰转移酶(gamma-glutamyltransferase，GGT)含量[497.0(298.5，843.0)U/L]呈正相关( r＝0.401， P<0.05)，同时与直接胆红素(direct bilirubin，DBIL)、总胆汁酸(total bile acid，TBA)含量呈正相关( r＝0.338， P<0.05； r＝0.235， P<0.05)；在肝脏组织胆管细胞凋亡数量比例层面，高胆固醇BA组为0.724±0.146，正常胆固醇BA组为0.232±0.141，NC组(患儿年龄相近门静脉海棉样变儿童)为0.242±0.228，高胆固醇BA组与其余两组间差异有统计学意义( P<0.05)；BA患儿外周血TC含量[4.4(3.1，5.5)mmol/L]与外周血CD177 ＋中性粒细胞比例[(26.5±6.4)%]呈正相关( r＝0.503， P<0.05)，与外周血单核细胞[1.0(0.8，1.2)×10 9/L]、中性粒细胞[(3.2±1.4)×10 9/L]无相关性( P>0.05); BA患儿外周血TC含量[(4.7±1.6)mmol/L]与外周血T细胞数量(4 952.1±1 985.0)个/μL呈正相关( r＝0.488， P<0.05)，与外周血B细胞971.0(664.8，1 636.1)个/μL无相关性( P>0.05)；与正常胆固醇BA组相比，高胆固醇BA组线粒体氧化磷酸化相关基因( CYBB、 CALR、 MT- CYB、 MT- ND5、 MT- ND1)表达显著上调，差异有统计学意义( P<0.05)；在胆固醇刺激下，CD177 ＋中性粒细胞中代表线粒体氧化磷酸化的指标TOMM20及DNA 8-OHdG的平均荧光强度分别为73.47±6.36、159.07±10.17，较刺激前差异有统计学意义( P<0.05)，而CD177 ＋中性粒细胞胞外诱捕网指标MPO和H2B分别为60.51±4.26、157.46±9.40，较刺激前差异有统计学意义( P<0.05)；同时在CD177 ＋中性粒细胞与BEC共培养体系中，加入胆固醇刺激后BEC细胞活率较刺激前差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:胆道闭锁中胆固醇可上调CD177 ＋中性粒细胞线粒体氧化磷酸化水平，促进胞外诱捕网的释放，引起胆管损伤。

目的:观察外周5-羟色胺（5-HT）诱导中性粒细胞胞外诱捕网（NET）的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响。方法:选择6~8周龄野生型（WT型）和Tph1基因敲除（Tph1 KO）C57小鼠，按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1 KO小鼠假手术组、Tph1 KO小鼠脓毒症组。假手术组小鼠接受假手术处理（仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺，然后关腹）；脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症模型。术后12 h处死小鼠，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）含量；同时收集小鼠肺组织标本，光镜下观察肺组织病理学改变，采用免疫荧光显微镜观察小鼠肺组织中NET生成情况。 结果:病理学结果提示：假手术组小鼠肺组织结构完好，未见渗出；而脓毒症组小鼠肺泡结构破坏，肺泡腔内可见明显渗出，肺泡壁增厚并伴有大量炎性细胞浸润，且WT小鼠脓毒症组肺损伤程度较Tph1 KO小鼠脓毒症组严重。ELISA结果显示：不同品系假手术组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量比较差异无统计学意义；而脓毒症组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量均较假手术组明显升高〔WT小鼠：TNF-α（μg/L）为158.20±28.46比14.00±3.28，IL-6（μg/L）为304.98±21.78比57.70±12.30；Tph1 KO小鼠：TNF-α（μg/L）为85.88±20.13比14.95±1.53，IL-6（μg/L）为169.50±45.61比55.05±12.68，均 P<0.01〕，且WT小鼠脓毒症组上述指标水平均明显高于Tph1 KO小鼠脓毒症组〔TNF-α（μg/L）：158.20±28.46比85.88±20.13，IL-6（μg /L）：304.98±21.78比169.50±45.61，均 P<0.01〕。免疫荧光染色显示：假手术组小鼠肺脏中均检测到极少量的NET生成；而脓毒症组小鼠肺组织中均检测到大量的NET生成，明显高于假手术组〔WT小鼠：（34.75±7.27）%比（1.75±0.96）%，Tph1 KO小鼠：（14.25±5.74）%比（2.50±1.29）%，均 P<0.01〕，且WT小鼠脓毒症组小鼠肺脏组织中NET生成量较Tph1 KO小鼠脓毒症组明显增多〔（34.75±7.27）%比（14.25±5.74）%， P<0.01〕。 结论:脓毒症时，小鼠肺组织中炎性因子产生增加导致肺损伤，其机制与外周5-HT介导的肺组织中NET的生成增加有关；抑制外周血中5-HT的产生可有效减少肺组织中NET生成，从而减轻肺损伤。

SLE是一种多系统自身免疫病，其患者的外周血单核细胞制备物中富集有低密度粒细胞（LDGs）。LDGs是一种特殊的中性粒细胞亚群，其表型与功能都与中性粒细胞存在差异，但二者均可形成中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）并发生自身死亡，即NETosis。LDGs和异常的NETosis通过增加Ⅰ型IFN合成、激活补体系统、产生炎性细胞因子等导致SLE患者多器官功能障碍。靶向LDGs与NETosis的药物有望为SLE的临床治疗提供新的前景。