2型糖尿病是与胰岛素功能障碍及胰岛素抵抗相关的慢性炎症过程。炎症状态下中性粒细胞释放细胞外陷阱(NETs)，该结构与糖尿病的病程发展相关联。弹性蛋白酶抑制剂(SerpinB1)作为内源性分泌蛋白可以有效地抑制该结构对胰岛细胞功能及胰岛素作用信号通路的影响，并且还有促进胰岛β细胞增殖的作用。本文旨在探讨NETs及其抑制剂SerpinB1与2型糖尿病的关系。

脓毒症是感染引起的危及生命的器官功能障碍的临床综合征。感染发生时，作为机体免疫系统的首道防线，中性粒细胞最先被募集到感染部位，通过释放中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）来捕获和杀灭病原体，但大量的NE释放会累及周围正常组织，诱发器官功能损伤或衰竭。NE抑制剂可抑制NE活性，减轻炎症反应，可能成为治疗脓毒症的一种有前途的药物。当前，多种NE抑制剂相继被研发和报道，但针对其特征尚无系统概论，并且针对NE及其相关抑制剂在脓毒症中的作用与潜在机制尚无深入讨论，本文就此进行综述，以期阐述NE及其抑制剂在脓毒症中的作用。

研究妊娠期糖尿病（GDM）患者血清中人软骨糖蛋白39（YKL-40）、弹性蛋白酶抑制剂（SerpinB1）、血清促代谢因子（Betatrophin）的表达及其与胰岛素抵抗的关系。研究发现GDM患者血清中YKL-40、SerpinB1、betatrophin的表达与胰岛素抵抗呈现出显著的相关性，可为临床诊断提供科学依据。

目的 克隆获得水蛭Hirudo nipponia 弹性蛋白酶抑制剂(guamerin)基因HnGUA,并对其进行生物信息学分析、蛋白原核表达、时空表达模式等研究,以期为揭示水蛭抗凝类小分子物质生物合成途径、分子调控机理机制奠定基础.方法 以日本医蛭为研究对象,基于前期转录组数据,采用cDNA末端快速扩增方法(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)获取HnGUA基因全长,并进行生物信息学分析;构建原核表达载体pET32a-HnGUA,并转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,诱导重组蛋白的表达;通过实时荧光定量检测了水蛭不同吸食阶段4个组织的HnGUA基因表达模式.结果 HnGUA基因cDNA全长507 bp(GenBank登录号OP490295),开放阅读框(Open reading frame,ORF)231 bp,编码76个氨基酸,蛋白分子量和理论等电点分别为8.17 kDa和4.44,包含一段长19个氨基酸的信号肽序列.多重比对分析结果显示,HnGUA蛋白与其他蛭类抑制剂基因编码蛋白具有较高的同源性.原核表达分析结果显示,构建的pET32a-HnGUA载体能在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,SDS-PAGE结果显示,诱导的重组表达蛋白相对分子质量在6 kDa左右,与预测大小一致.实时荧光定量PCR结果表明,HnGUA基因存在时空表达差异,其主要在皮肤和嗉囊组织中表达.结论 该研究首次在日本医蛭中克隆得到HnGUA基因,使其重组蛋白在大肠杆菌中成功表达,并且进一步研究了该基因的时空表达模式,为后续深入研究该基因功能奠定基础,同时对于不依赖于水蛭药材直接生产活性成分,加快实现中药现代化进程具有重要的理论和实践意义.

中性粒细胞弹性蛋白酶是中性粒细胞嗜天青颗粒中的主要蛋白酶,在抵御感染中发挥重要作用.然而,大量释放的中性粒细胞弹性蛋白酶可能导致过度炎症反应,加剧肺组织损伤,诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的发展.西维来司他钠作为一种特异性中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂,在缓解中性粒细胞弹性蛋白酶诱发的病理过程中具有明显的潜力,并在临床急性呼吸窘迫综合征的治疗中受到广泛的关注.本文将深入探讨中性粒细胞弹性蛋白酶的生物学特性及其在急性呼吸窘迫综合征病理生理中的作用机制,以及西维来司他钠在急性呼吸窘迫综合征临床管理中的应用,为深入理解该药物在急性呼吸窘迫综合征治疗中的作用机制提供重要线索.

目的:探索中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对中性粒细胞炎性募集的影响.方法:采用外源性弹性蛋白酶抑制剂西维来司钠盐预处理小鼠骨髓来源的中性粒细胞,通过腹膜炎过继性迁移、细胞体外趋化、流动室黏附、免疫荧光染色、细胞伸展等实验,检测NE的抑制对中性粒细胞体内炎性募集、体外趋化、牢固黏附、细胞极化与伸展能力的影响;利用流式细胞术及鲁米诺化学发光系统检测NE的抑制对中性粒细胞吞噬及活性氧(ROS)释放能力的影响.结果:西维来司钠盐预处理显著减弱了中性粒细胞体内炎性募集(P<0.001);减弱了中性粒细胞在体外趋化过程中对催化剂方向性的感知(P<0.05),减慢了趋化速率(P<0.05),降低了趋化距离(P<0.05);减少了中性粒细胞在炎性内皮细胞表面形成牢固黏附的能力(P<0.000 1),抑制了中性粒细胞对细菌的吞噬能力(P<0.01);但对中性粒细胞的伸展、极化及ROS的释放均无显著影响.结论:NE的抑制显著损害了中性粒细胞在体内外的炎性募集级联反应及吞噬作用,但对中性粒细胞的伸展、极化、ROS释放等功能无显著影响.

目的 探讨高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制.方法 青年SD大鼠(24周)和高龄SD大鼠(104周)各5只,小动物超声检测心功能,采用改良Weigert弹力纤维染色、免疫组织化学、免疫荧光和Western blotting,分别检测心室肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维及蛋白、弹性纤维及蛋白、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达变化.结果 高龄大鼠心室肌间质Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白丰富,包绕心肌细胞周围,与青年大鼠相比,高龄大鼠心室肌间质胶原蛋白含量明显增多(P＜0.05).高龄大鼠心室肌间质弹性纤维分布广泛,与青年大鼠比较,高龄大鼠心室肌间质弹性纤维数量和弹性蛋白水平均明显减少(P＜0.05).高龄大鼠心室肌MMP-2和MMP-9水平增高,且与弹性蛋白水平呈相互消长关系.高龄大鼠心室肌TIMP-2水平随年龄增加而降低.结论 高龄大鼠心室肌间质胶原纤维数量和弹性纤维数量存在相互消长的关系.随年龄的增长大鼠心室肌间质TIMP-2和弹性纤维含量减少,同时胶原纤维与弹性纤维比例失调.

为全面了解人中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂(human neutrophil elastase inhibitor,HNEI)的研究现状和临床应用前景,查阅2011年及以后发现的HNEI及人中性粒细胞弹性蛋白酶(human neutrophil elastase,HNE)参与肺部外疾病的文献,并进行归纳整理.结果发现,2011年以来出现了许多选择性高、抑制作用强的HNEI.HNE参与许多疾病的发生,除过去报道较多的传染性和炎症性肺部疾病外,还与局部缺血再灌注损伤、类风湿性关节炎、自身免疫性糖尿病、肾炎、癌症的发生发展等疾病有关.开发高效低毒的HNE抑制剂已成为治疗相关疾病的重要方向.

动脉粥样硬化(AS)是一个复杂的慢性炎症过程.AS所致的冠心病已成为最常见的一种疾病,严重威胁人类健康.α1-抗胰蛋白酶(A1AT)作为一种丝氨酸蛋白酶及中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂,具有抑制炎症反应及免疫反应的作用.血浆A1AT水平是AS及冠心病的一个独立危险因素,炎症和免疫反应在AS及冠心病各个阶段起重要作用,A1AT可能通过抑制AS过程中的炎症、免疫反应及VSMCs凋亡,延缓斑块向不稳定斑块进展,发挥抗AS作用.

目的 观察中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)抑制剂对高血压性脑出血(HICH)患者实施穿刺引流术后氧化应激和炎性介质的影响及对神经功能的保护作用.方法 选择2016年1月至2017年6月收治的146例HICH患者为研究对象,根据随机数字分为观察组(75例)和对照组(71例).对照组患者行软通道穿刺引流术后予常规临床治疗;观察组患者通过微量泵静脉注射NE抑制剂西维来司钠注射液0.20 mg/(kg·h),连续用药7 d.术前与术后3 d、7 d,检测两组患者的氧化应激指标与血清炎性因子指标;术后7d评估神经功能缺损评分.结果 术后3d、7d,观察组的血清丙二醛水平显著低于对照组,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平均显著高于对照组.术后3 d、7 d,观察组多形核白细胞比例、肿瘤坏死因子、白介素(IL)-6、IL-8、超敏C反应蛋白均显著低于对照组(均P<0.05).术后7 d,观察组的NIHSS评分低于对照组(8.3±2.2 vs 9.2±1.9),差异有统计学意义(P<0.05);总有效率高于对照组(88.0%vs 78.9%),但差异无统计学意义(P>0.05).结论 HICH术后加用NE抑制剂能明显抑制机体氧化应激反应和炎性反应,有助于患者术后神经功能的改善.