目的:探讨乌梅提取物对纳米细菌致肾结石大鼠Tamm-Horsfall(THP)蛋白表达的影响。方法:将45只SD雄性大鼠随机分为空白组、对照组和实验组各15只。对照组和实验组尾静脉注射纳米细菌混悬液1 mL制备大鼠肾结石模型，对照组大鼠尾静脉注射等量生理盐水。实验大鼠于第2天灌胃1 mL乌梅提取物进行干预，空白组和对照组灌胃等量生理盐水。连续干预4周后，用代谢笼收集24 h尿液。检测尿液pH、Ca 2＋、柠檬酸(CA)和草酸(Oxa)的含量；采用ELISA试剂盒测定尿液中THP蛋白表达量；取肾脏组织HE染色，观察组织的病理变化以及肾组织中的钙盐结晶形态和结晶量，并进行钙盐结晶量化评分。 结果:与空白组相比，对照组肾脏组织中钙盐结晶积分显著升高( P<0.05)，尿液中pH值和CA水平显著下降( P<0.05)，Ca 2＋、Oxa水平和THP表达升高( P<0.05)；与对照组相比，实验组肾脏组织中钙盐结晶积分显著下降( P<0.05)，尿液中pH值和CA水平显著升高( P<0.05)，Ca 2＋、Oxa水平和THP表达下降( P<0.05)，HE染色显示肾小管内可见晶体沉积减少。 结论:乌梅提取物通过降低纳米细菌致肾结石大鼠THP蛋白表达和自身聚合，抑制肾脏组织中草酸钙结晶的形成。

探索加味二妙颗粒安慰剂的制备工艺并开展模拟效果评价,为加味二妙颗粒临床试验提供合格的安慰剂样品,也为中药颗粒剂型安慰剂的制备与质量评价提供参考.在加味二妙颗粒综合分析结果的基础上利用正交试验进行其安慰剂制备的味道模拟和颜色模拟小试,并通过初步人工评价确定安慰剂处方:糊精 10 g,党参浸膏 5.0 g,苦瓜提取物 1.6 g,乌梅提取物0.3 g,甜菊糖苷 0.1 g,蔗糖八乙酸酯 0.004 g,靛蓝 0.004 g,柠檬黄 0.003 1 g,日落黄 0.001 8 g,乔木苦茶粉 0.001 8 g,焦糖0.001 3 g.根据安慰剂处方进行中试.对安慰剂的模拟效果进行独立性、对比性人工评价及电子鼻、电子舌客观化检测,结果显示此安慰剂处方在独立性人工评价中错误率较高,在对比性人工评价中与加味二妙颗粒得分差距不大,相似度为 99.61%;电子鼻检测安慰剂处方与加味二妙颗粒气味相似度为 99.19%,电子舌检测结果显示两者口味差距不大,相似性较高.因此,加味二妙颗粒安慰剂模拟效果较好,与加味二妙颗粒相似度高,应用于临床试验时不易破盲.此研究为中药颗粒剂型安慰剂的制备及质量评价提供了参考,对促进中药颗粒剂型安慰剂生产的规模化,推动中药安慰剂的临床应用,提高中药疗效的说服力及认可度起到一定的积极作用.

目的 探究慢痞消12味中药对胃癌前病变(PLGC)大鼠特征菌嗜黏蛋白阿克曼菌(Akk)、大肠杆菌(E.coli)和粪肠球菌(E.fa)增殖的调控作用及其药效规律.方法 分别经镜检、基因组测序分析,对三株菌进行形态、基因特征鉴定;采用比浊法检测不同浓度慢痞消12味中药提取物对三株菌增殖的影响;采用聚类分析各味中药对三株菌调节作用的药效规律.结果 经镜检及基因组学测序,鉴定三株菌质量合格.白术、丹参、甘草、玫瑰花、砂仁、太子参和玉竹能明显促进Akk增殖;白术、丹参、玫瑰花、乌梅、香橼、玉竹和紫苏梗能明显抑制E.coli增殖;甘草、玫瑰花、砂仁、太子参、乌梅、香橼、玉竹和紫苏梗能明显抑制E.fa增殖.12味中药对三株菌的调节作用聚类分析结果分为三类,具有理气活血、祛瘀解毒的祛邪作用的是:紫苏梗、香橼、延胡索、白花蛇舌草、玫瑰花、丹参、砂仁;具有益气和中、养阴生津的扶正作用的是:玉竹、太子参、甘草、乌梅;具有补气燥湿和中,即扶正祛邪的作用的是白术.结论 慢痞消组方中药对PLGC特征菌具有一定的调控作用,即促进益生菌Akk增殖、抑制致病菌E.coli及E.fa增殖,与中药药效特点存在相关性.

目的:探讨蚕梅方(由僵蚕、乌梅组成)提取物对AOM/DSS诱发小鼠腺瘤性肠息肉的防治作用.方法:以C57BL/6小鼠为研究对象,随机分为正常组、模型组、阳性对照组(阿司匹林组)、蚕梅低剂量组(0.65 g/ml)、蚕梅高剂量组(2.6 g/ml).除正常组外,其余各种采用AOM/DSS诱发小鼠结直肠腺瘤性息肉模型,并于造模过程中各药物组予相应的药物灌胃干预.实验结束,比较各组结直肠腺瘤个数及抑瘤率,并以免疫组化法检测结肠黏膜细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平;应用ELISA检测小鼠血浆白介素-6(IL-6)表达水平.结果:经93 d灌胃给药,阳性对照组、蚕梅高剂量组、蚕梅低剂量组腺瘤抑制率分别为14.49％、70.45％、8.78％,与阳性对照组比较蚕梅高剂量组有显著抑制腺瘤作用(P＜0.05),且蚕梅高剂量组能显著降低Cyclin D1阳性发生率(P＜0.05);与正常组比较,模型组和阳性对照组IL-6高表达,蚕梅方低剂量组和高剂量组可显著下调IL-6表达(P＜0.05).结论:蚕梅方提取物能显著降低AOM/DSS小鼠腺瘤性息肉的发生率,且有明显的量效关系;其作用机制可能与抑制Cyclin D1、显著下调IL-6表达有关.

目的 考察不同样品前处理方法对气相色谱-质谱法(gas chromatography and mass spectrometry,GC-MS)分析药材中脂肪酸成分的影响,为样品前处理条件选择提供实验依据.方法 用H2 SO4-CH3 OH(1:10)溶液分别对蔷薇科5种果实类药材(木瓜、乌梅、山楂、覆盆子和金樱子)粉末进行直接甲酯化和乙醇提取物甲酯化,运用GC-MS方法检测各供试品中脂肪酸并加以比较.结果 直接甲酯化检测到脂肪酸成分数目较多,可测到从C2-C24脂肪酸;提取后再甲酯化,则检测到的脂肪酸成分随着提取溶剂极性改变而发生相应变化,提取溶剂极性偏大时有利于苹果酸、柠檬酸等短链小分子脂肪酸检测,极性偏小时有利于油酸、亚油酸等长链脂肪酸检测.结论 不同样品前处理方法对脂肪酸的检测结果存在差异;在相同的分析条件下,采用药材粉末直接甲酯化,可较全面地了解所含脂肪酸种类的信息;提取后再甲酯化,测得的脂肪酸种类减少,检测成分与提取溶剂极性大小相关.

目的 本研究分析乌梅提取物对肾结石大鼠肾功能及中性粒细胞明胶酶相关脂质载运蛋白/单核细胞趋化因子蛋白1(NGAL/MCP-1)水平的影响,为相关药物研发及治疗提供参考.方法 清洁级SD大鼠随机分为4组:对照组、模型组、乌梅提取物组和mTOR抑制剂雷帕霉素组.除对照组尾静脉注射生理盐水外,其余各组大鼠采用尾静脉注射纳米细菌复制肾结石模型,对照组和模型组给予羧甲基纤维素钠灌胃治疗,乌梅提取物组(20 mg/kg)和mTOR抑制剂雷帕霉素组(10 mg/kg)大鼠给予对应药物治疗.分析各组大鼠尿液中24 h尿生化指标[尿酸(UA)和尿柠檬酸(CA)]及肾脏NGAL/MCP-1和mTOR蛋白表达变化.结果 与对照组相比,模型组大鼠血清CA及UA水平明显升高(P<0.05),肾组织NGAL、MCP-1、AKT及mTOR蛋白的表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,雷帕霉素组及乌梅提取物组大鼠血清CA及UA水平明显降低,肾组织NGAL、MCP-1、AKT及mTOR蛋白的表达水平明显降低(P<0.05).结论 乌梅提取物对肾结石大鼠肾功能及NGAL/MCP-1和AKT/mTOR水平的异常有明显的恢复作用.

目的 建立UPLC法测定不同海拔和不同采收期乌梅Prunus mume(Sieb.) Sieb.et Zucc.中枸橼酸和苹果酸的含有量.方法 乌梅80％甲醇提取物的分析采用ACQUITY HSS C1s色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.8 μm);流动相乙腈-0.2％磷酸水,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;检测波长210 nm;柱温35℃.结果 枸橼酸、苹果酸分别在0.516～1.596、0.496～ 1.627 μg/mL范围内线性关系良好(R2≥0.999 6);平均加样回收率分别为100.36％、100.39％,RSD 1.43％、1.54％.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于乌梅的质量控制.

目的 观察乌梅提取物对特发性高钙尿大鼠肾结石形成和肾功能的影响及作用机制.方法 2018年1—12月于西南医科大学临床医学院中心实验室进行实验.选择健康雄性SD大鼠12只作为对照组,雄性特发性高尿钙大鼠24只并按随机数字表法分为模型组12只和干预组12只,模型组给予生理盐水,干预组予乌梅提取物干预.28 d后比较3组大鼠血清肾功能指标及肾脏组织草酸钙结晶量评分、炎性反应及氧化应激指标、BMP2通路基因表达的差异.结果 模型组大鼠肾脏组织草酸钙结晶量评分、SCr、BUN、IL-1β、HMGB-1、CCL-2、MCP-1、MDA、8-OHDG的含量及BMP2、MSX2、RUNX2、Osx的mRNA表达水平明显高于对照组(t/P=11.009/0.000、12.592/0.000、11.822/0.000、7.845/0.000、10.085/0.000、9.063/0.000、12.850/0.000、21.664/0.000、13.676/0.000、9.058/0.000、10.611/0.000、8.300/0.000、7.544/0.000),肾脏组织T-AOC的含量明显低于对照组(t/P=5.591/0.000);干预组大鼠肾脏组织草酸钙结晶量评分、SCr、BUN、IL-1β、HMGB-1、CCL-2、MCP-1、MDA、8-OHDG的含量及BMP2、MSX2、RUNX2、Osx的mRNA表达水平明显低于模型组(t/P=5.697/0.000、5.261/0.000、5.813/0.000、3.859/0.001、7.019/0.000、6.544/0.000、8.063/0.000、14.183/0.000、8.172/0.000、4.607/0.001、6.795/0.000、3.149/0.004、4.089/0.001),肾脏组织中T-AOC的含量明显高于模型组(t/P=4.350/0.000).结论 乌梅提取物对特发性高钙尿大鼠肾结石形成及肾功能均具有改善作用,抑制炎性反应、氧化应激反应及BMP2通路是相关的分子机制.

在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)进展的过程中,Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein3,NLRP3)炎症小体活化与DN肾损伤密切相关.其特征是组分蛋白——NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protien,ASC)、胱冬肽酶(caspase)-1前体表达水平和结合水平的改变以及下游的效应蛋白-caspase-1,白介素(interleukin,IL)-1β,IL-18表达水平的升高,此外,还有相关炎症介质的释放.NLRP3炎症小体活化的分子调控机制涉及多条信号通路的激活,如活性氧(reactive oxygen species,ROS)/硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)通路、核因子(nuclear factor,NF-κB)通路、核转录因子E-2相关因子-2(nuclear factor erythroid-related factor 2,Nrf2)通路、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)通路以及丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路等.更为重要的是,激酶类的调节因子,如未有丝分裂曲霉相关蛋白激酶7(never in mitosis aspergillus-related kinase 7,Nek7)在上游可与NLRP3靶向结合而直接激活NLRP3炎症小体.一些中药提取物(槲皮素、姜黄素、千金藤素、胡椒碱以及红景天苷)和中药经典复方(乌梅丸)等可以通过多种途径干预NLPR3炎症小体而改善DN炎症性肾损伤.因此,基于NLRP3炎症小体活化的分子调控机制而精准揭示抗炎性中药或中药复方延缓DN进展的作用靶点是今后的发展方向之一.

目的 体外测定15种中药乙醇提取物与吡嗪酰胺的联合抗牛结核杆菌活性.方法 采用热回流提取法制备15种中药材的醇提物,采用改良罗氏培养基绝对浓度法测定样本对牛结核杆菌的抑菌活性.结果吡嗪酰胺的最小抑菌浓度为120μg/ml,桑白皮、桂枝、乌梅、茯苓、大黄、当归、柴胡、木香和莪术乙醇提取物分别与吡嗪酰胺存在联合抗牛结核杆菌作用,车前子、地黄、苦杏仁、京三棱、苍术和赤芍各自的乙醇提取物与吡嗪酰胺联用不存在联合抗牛结核杆菌作用.结论 吡嗪酰胺是缩短结核治疗时间的关键药物,桑白皮、桂枝、乌梅等9种中药的乙醇提取物能增强吡嗪酰胺的抗结核杆菌作用,为研发抗结核药物提供了新的思路.