目的 建立加味二妙颗粒指纹图谱以及多成分含量测定方法,为其质量控制提供参考.方法 采用HPLC-Q-TOF/MS分析加味二妙颗粒中的化学成分.色谱柱为Wondasil C18 Superb(250 mm×4.6 mm,5 μm)柱,流动相为乙腈-体积分数0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,对10 批加味二妙颗粒进行指纹图谱和4 种指标性成分含量测定.结果 HPLC-Q-TOF/MS技术共鉴定出加味二妙颗粒中144 个化合物,指纹图谱中标定了15 个共有峰,并通过对照品比对指认出(R,S)-告依春、去乙酰车叶草苷酸甲酯、盐酸黄柏碱、橙皮苷等9 个峰,加味二妙颗粒指纹图谱的相似度均>0.95;测定(R,S)-告依春、落新妇苷、橙皮苷和小檗碱 4 个指标性成分含量,质量分数分别为 0.021 1～0.056 8 mg·g-1、0.200 9～0.552 3 mg·g-1、0.274 1～0.719 1 mg·g-1、0.237 1～0.704 9 mg·g-1.结论 建立的加味二妙颗粒指纹图谱和多成分含量测定方法能够全面反映加味二妙颗粒的质量特征,亦为建立其制剂质量标准提供了依据.

我国宫颈癌每年的新发病例和死亡病例仍在上升,人乳头瘤病毒的持续感染是其发生发展的重要危险因素,且临床目前没有治疗人乳头瘤病毒的特效药.近年来,中药制剂对子宫颈人乳头瘤病毒感染及其相关癌前病变的治疗成为研究热点.任青玲教授以湿邪为切入点,阐述持续性人乳头瘤病毒感染多因脾虚失运,湿邪内停,久而酿毒所致,治法以健脾除湿为基础,兼以祛湿解毒,辅以雷火灸外治,因势利导,使邪祛则正安.现将任师临证经验总结如下,并附医案一则,为治疗持续性人乳头瘤病毒感染提供中医药思路.

探索加味二妙颗粒安慰剂的制备工艺并开展模拟效果评价,为加味二妙颗粒临床试验提供合格的安慰剂样品,也为中药颗粒剂型安慰剂的制备与质量评价提供参考.在加味二妙颗粒综合分析结果的基础上利用正交试验进行其安慰剂制备的味道模拟和颜色模拟小试,并通过初步人工评价确定安慰剂处方:糊精 10 g,党参浸膏 5.0 g,苦瓜提取物 1.6 g,乌梅提取物0.3 g,甜菊糖苷 0.1 g,蔗糖八乙酸酯 0.004 g,靛蓝 0.004 g,柠檬黄 0.003 1 g,日落黄 0.001 8 g,乔木苦茶粉 0.001 8 g,焦糖0.001 3 g.根据安慰剂处方进行中试.对安慰剂的模拟效果进行独立性、对比性人工评价及电子鼻、电子舌客观化检测,结果显示此安慰剂处方在独立性人工评价中错误率较高,在对比性人工评价中与加味二妙颗粒得分差距不大,相似度为 99.61%;电子鼻检测安慰剂处方与加味二妙颗粒气味相似度为 99.19%,电子舌检测结果显示两者口味差距不大,相似性较高.因此,加味二妙颗粒安慰剂模拟效果较好,与加味二妙颗粒相似度高,应用于临床试验时不易破盲.此研究为中药颗粒剂型安慰剂的制备及质量评价提供了参考,对促进中药颗粒剂型安慰剂生产的规模化,推动中药安慰剂的临床应用,提高中药疗效的说服力及认可度起到一定的积极作用.

目的:观察加味二妙颗粒联合尤靖安治疗HPV伴CIN Ⅰ持续感染临床疗效.方法:将60例HPV持续感染伴CIN Ⅰ的患者随机分为治疗组、对照组,每组30例.治疗组采用加味二妙颗粒联合尤靖安治疗,对照组仅予尤靖安.以3个月为1个疗程,两组均治疗2个疗程,观察HPV转阴率、CIN Ⅰ逆转率、中医证候积分变化及临床疗效情况.结果:①治疗组HPV转阴26例,对照组HPV转阴19例,两组HPV转阴率比较有显著的统计学差异,治疗组的HPV转阴率明显高于对照组.②治疗组CIN Ⅰ逆转27例,对照组CIN Ⅰ逆转20例,治疗组CIN Ⅰ的逆转率明显高于对照组.③按中医证候积分比较:两组治疗前后积分均明显减少,治疗后组间比较,治疗组明显优于对照组(P＜0.05).④治疗组、对照组总有效率为93.33％、73.33％,治疗组临床疗效优于对照组(P＜0.05).结论:加味二妙颗粒联合尤靖安对于治疗湿热下注型HPV伴CIN Ⅰ持续感染的患者有较好临床疗效,能有效清除持续感染的HPV并且有效逆转CIN Ⅰ,在改善中医临床证候方面有一定优势.

目的 考察和优选加味二妙颗粒最佳提取工艺.方法 采用Agilent 1100高效液相色谱仪测定盐酸小檗碱、黄柏碱、橙皮苷的含量,以水提取得膏率,盐酸小檗碱、黄柏碱、橙皮苷转移率的综合评分为指标,在单因素试验的基础上进行正交试验,优选加味二妙颗粒最佳提取工艺.结果 加味二妙颗粒最佳提取工艺为:物料比15 ml/g,提取4次,每次60 min,其中提取次数有显著性影响.结论 验证试验结果表明,优选的工艺有效成分转移率相对较高,稳定、可行,为加味二妙颗粒的工业化生产提供参考依据.

目的:比较加味二妙颗粒剂与传统汤剂中7个化学成分的含量,建立该颗粒剂与汤剂的指纹图谱并进行物质基础一致性评价.方法:在前期研究基础上,通过已建立的含量测定与指纹图谱方法对加味二妙颗粒剂与传统汤剂中黄柏碱,盐酸小檗碱,盐酸药根碱,(R,S)-告依春,落新妇苷,橙皮苷和白术内酯Ⅲ的含量进行测定,以盐酸小檗碱为参照峰,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)对加味二妙颗粒剂与传统汤剂进行相似度分析,采用主成分分析(PCA)对颗粒剂与汤剂的相对峰面积进行差异性分析并进行拆方煎煮,从定性角度考察拆方对加味二妙传统汤剂指纹图谱的影响.结果:加味二妙颗粒剂与传统汤剂中落新妇苷、盐酸药根碱、白术内酯Ⅲ的含量相差不大,且颗粒剂中黄柏碱、盐酸小檗碱、橙皮苷和(R,S)-告依春的含量高于传统汤剂.加味二妙颗粒剂确定了20个共有峰,传统汤剂确定了19个共有峰,颗粒剂与汤剂整体物质基础无明显变化,PCA结果表明加味二妙颗粒剂与传统汤剂的相对峰面积有一定差异,各拆方煎煮色谱图无新化合物产生.结论:建立的指纹图谱体现了加味二妙颗粒剂和传统汤剂的整体物质基础,颗粒剂与汤剂的物质基础基本一致,7个指标成分的含量结合指纹图谱能较为全面地体现加味二妙传统颗粒剂与汤剂的内在质量,可为二者的临床应用提供参考依据.

目的:建立HPLC-DAD波长切换法同时测定加味四妙颗粒中延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、木兰花碱、杯苋甾酮、甘草苷、甘草次酸共7个成分的含量.方法:采用Insert Sustain C18色谱柱 (250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈 (A) -0.05 mol·L-1磷酸二氢钾 (B) 为流动相,梯度洗脱,DAD检测器,检测波长268 nm (0～22.5 min,检测木兰花碱,67～71 min,检测盐酸小檗碱)、280 nm (22.5～30 min,检测延胡索乙素)、237 nm (30～45 min,检测甘草苷)、247 nm (45～55 min,检测杯苋甾酮,71～85 min,检测甘草次酸)、284 nm (55～67 min,检测盐酸黄柏碱).结果:各待测组分分离度良好;延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、木兰花碱、杯苋甾酮、甘草苷、甘草次酸7个成分的进样质量浓度分别在2.060～51.49μg·mL-1 (r=1.000)、3.111～77.77μg·mL-1 (r=1.000)、1.813～45.31μg·mL-1 (r=1.000)、1.960～49.00μg·mL-1 (r=0.999 9)、2.019～50.48μg·mL-1 (r=1.000)、2.468～61.70μg·mL-1 (r=0.999 9)、2.408～60.20μg·mL-1 (r=0.999 9) 范围内与各自峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率 (n=6) 分别为100.6％ (RSD=1.6％)、100.3％ (RSD=0.4％)、101.0％ (RSD=1.3％)、100.7％ (RSD=0.8％)、100.1％ (RSD=1.9％)、101.6％ (RSD=1.3％)、99.8％ (RSD=1.7％).结论:本试验建立的含量测定方法符合方法学验证要求,简便可靠,重现性好,可用于加味四妙颗粒的7个指标性成分的同时测定.

目的:观察加味二妙颗粒联合辛复宁治疗慢性宫颈炎伴高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV0持续感染的疗效.方法:将92例慢性宫颈炎伴HR-HPV持续感染的患者随机分为中药组、西药组、联合用药组,中药组30例仅采用加味二妙颗粒治疗,西药组31例仅采用辛复宁治疗,联合用药组31例采用加味二妙颗粒联合辛复宁治疗.以3个月为1个疗程,3组均使用2个疗程,比较3组临床疗效、HR-HPV转阴率以及中医证候积分变化情况.结果:(1)联合用药组HR-HPV转阴27例,中药组HR-HPV转阴19例,西药组HR-HPV转阴18例,3组HPV转阴率比较,联合用组显著高于中药组、西药组,差异均有统计学意义(P＜0.050,中药组与西药组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)3组治疗后中医证候积分均减少,治疗后组间比较,联合用药组积分明显低于中药组、西药组(P＜0.05).(3)联合用药组、中药组、西药组的总有效率分别为93.55％、73.33％、67.74％,联合用药组临床疗效优于中药组、西药组(P＜0.05),中药组与西药组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:加味二妙颗粒联合辛复宁治疗脾虚湿热型慢性宫颈炎伴HR-HPV持续感染的患者有较好临床疗效,可有效清除持续感染的高危型HPV,改善中医临床证候.

目的:探讨加味二妙颗粒联合重组人干扰素a2b阴道泡腾胶囊治疗宫颈上皮内瘤变的疗效及对患者免疫功能的影响.方法:将西北妇女儿童医院妇科门诊自2018年1月至2019年1月收治的确诊为宫颈上皮内瘤变患者300例作为研究对象,将其随机的分为研究组和对照组,每组各150例.研究组患者给予加味二妙颗粒联合重组人干扰素a2b阴道泡腾胶囊进行治疗,对照组患者给予重组人干扰素a2b阴道泡腾胶囊进行治疗,比较两组患者治疗后的临床总有效率,治疗前后CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞水平和中医证候评分的变化及不良反应的发生情况.结果:治疗后,研究组临床总有效率为91.33％,明显高于对照组(74.67％,P＜0.05).两组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞水平均较治疗前明显升高,且研究组以上指标显著高于对照组(P＜0.05).研究组治疗后中医证候评分降低程度明显优于对照组,其不良反应发生率为10.00％,明显低于对照组(28.67％,P＜0.05).结论:与单用重组人干扰素a2b阴道泡腾胶囊治疗相比,加味二妙颗粒联合使用重组人干扰素a2b阴道泡腾胶囊治疗宫颈上皮内瘤变患者可显著提高患者的免疫功能,缓解症状,提高治疗效果,且安全性更高.

复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)较难治愈,常反复发作,病程缠绵.国医大师夏桂成教授团队基于改邪养正学术观点,以分消走泄为基本治法,调理阴道整体内环境为立足点,重建阴道微生态为基础,扶植优势菌群如乳酸杆菌等的恢复,从而纠正局部免疫微环境的失调,发挥治愈疾病的目的,并研发了加味二妙颗粒用于临床治疗.