胡椒碱(PIP)是从胡椒是来自黑胡椒藤的干浆果中提取出的一种酰胺类生物碱,是胡椒发挥药理作用的主要成分.目前对于胡椒提取物及胡椒碱的研究发现,胡椒碱具有抗炎、抗氧化、镇痛、神经保护等作用.PIP对神经退行性疾病有较好的治疗作用.本文主要从胡椒碱对神经退行性疾病的作用机制方面进行讨论.①减轻炎症反应:PIP能调节NF-κB与丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关通路介导TNF-α,IL-1β,IL-6和HMGB1等相关炎症因子的分泌来降低脑内相关炎症反应.②抗氧化应激:PIP能通过调节5-HT能系统与BDNF的相互作用而发挥抗氧化作用.③调节自噬:PIP能调节嘌呤能受体P2X-配体阀门离子通道 4(P2RX4)来调控自噬,并且能通过肠脑轴调节mmu-miR-99a-5p及Atg5和Atg14自噬蛋白等相关因子.④ 清除淀粉样蛋白沉积:PIP能够调控β-淀粉样前体蛋白裂解酶1、早老素蛋白1、凋亡蛋白酶激活因子、胱天蛋白酶3和过氧化氢酶等相关因子的表达,降低淀粉样蛋白的沉积来保护大脑神经系统.⑤镇痛:PIP可以调节辣椒素受体—TRPV1降低疼痛反应,并且可以调节miR-520a,IL-10和TGF-β1等因子达到抑制疼痛的效果.综上所述,PIP可以通过减轻炎症反应、抗氧化应激、调节自噬、清除淀粉样蛋白沉积与镇痛等方式保护中枢神经系统,抑制神经退行性疾病的发生.本文对胡椒碱在治疗神经退行性疾病作用及机制进行综述,以期为其临床应用及研究提供参考.

目的 探讨二氢辣椒碱(DHC)诱导治疗性低体温对小鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用及其机制.方法 将20只成年野生型(WT)小鼠随机分为WT组和WT+ DHC组,每组10只;20只瞬时感受器电位香草酸受体1基因敲除(TRPV1 KO)小鼠随机分为TRPV1 KO组和TRPV1 KO+ DHC组,每组10只.所有小鼠建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型.WT组和TRPV1 KO组小鼠再灌注开始后皮下泵注生理盐水1.25 mg·kg-1·h-1,WT+ DHC组和TRPV1 KO+ DHC组小鼠再灌注开始后皮下泵注DHC 1.25 mg·kg-1·h-1.所有小鼠再灌注90 min后全部移入22℃的鼠笼中,每隔5 min记录小鼠再灌注期的中心体温变化至再灌注后24h.在麻醉开始前和再灌注后24 h对小鼠进行神经行为测试评分,测试结束后取小鼠脑组织切片行氯化三苯基四氮唑染色,计算小鼠的脑组织梗死率.结果 4组小鼠再灌注0、30、60 min时中心体温比较差异均无统计学意义(P＞0.05).WT组、TRPV1 KO组和TRPV1KO+ DHC组小鼠再灌注90 min时的中心体温与0、30、60 min时比较差异均无统计学意义(P＞0.05),2、3、4、6、12、24h时的中心体温与0、30、60、90 min时比较均显著降低(P＜0.05);WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+ DHC组小鼠2、3、4、6、12、24h时的中心体温在3组同时间点之间两两比较及组内不同时间点之间两两比较差异均无统计学意义(P＞0.05).WT+ DHC组小鼠再灌注后90 min及2、3、4、6、12、24 h时的中心体温与0、30、60 min时比较均显著降低(P＜0.05),且均显著低于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+ DHC组同时间点(P＜0.05).麻醉前4组小鼠神经行为学测试总分比较差异均无统计学意义(P＞0.05).再灌注后24 h4组小鼠神经行为学测试总分均低于麻醉前(P＜0.05),但WT+ DHC组小鼠的行为学测试总分明显高于WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+ DHC组(P＜0.05),而WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+ DHC组小鼠的行为学测试总分比较差异均无统计学意义(P＞0.05).再灌注后24 h,4组小鼠的自发性活动、攀爬实验、本体觉实验和对触摸触须的反应等4项神经行为学测试评分比较差异均无统计学意义(P＞0.05);WT+ DHC组小鼠的四肢运动对称性试验和前爪伸展试验评分显著高于WT组、TR-PV1 KO组和TRPV1 KO+ DHC组小鼠(P＜0.05);WT组、TRPV1 KO组和TRPV1 KO+ DHC组小鼠的四肢运动对称性试验和前爪伸展试验评分比较差异均无统计学意义(P＞0.05).再灌注后24h,WT+ DHC组小鼠的脑组织梗死率显著低于其他3组(P＜0.05);而WT组、TRPV1 KO组、TRPV1 KO+ DHC组小鼠脑组织梗死率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 小鼠局灶性脑缺血再灌注后皮下泵注DHC可通过激活TRPV1受体诱导治疗性低体温,并减少脑组织损伤,改善脑神经功能.

目的 建立RP-HPLC法同时测定辣椒碱透皮贴剂中辣椒碱、二氢辣椒碱、降二氢辣椒碱和高二氢辣椒碱4种生物碱类成分含量.方法 采用Kromasil C18(250 mm×4.60 mm,5μm)柱,以乙腈-水(体积比为42∶58)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,柱温为40℃,检测波长为280 nm.结果 4种生物碱类成分的色谱峰与邻近色谱峰均能良好的分离,辣椒碱和二氢辣椒碱的质量浓度分别在2.65～79.50mg·L-1(r =0.999 7)、1.08 ～64.80 mg·L-1(r =0.999 9)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为100.2％(RSD=1.5％)、99.5％(RSD=0.7％).结论 该方法可用于辣椒碱透皮贴剂的质量控制.

目的:运用网络药理学方法,分析天南星-生姜药对治疗疼痛的潜在靶点和作用机制.方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索出天南星和生姜的活性成分和靶点.以"pain"为关键词,通过DisGeNet数据库检索出和疼痛相关的靶基因,并得到共同的靶点.通过String数据库构建蛋白互作网络图(protein-protein interaction,PPI)并进行分析,筛选出重要靶点.通过DAVID网站对共同靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析.结果:从天南星和生姜药对中共筛选出10个有效成分,药物与疾病有63个共同靶点,包括CNR1、ESR1、MAPK3、CYP3A4、JUN、HDAC1等.GO分析得出的生物学过程包括炎症反应过程、EKR1和EKR2级联的正向调控、RNA聚合酶II启动子转录过程、G蛋白偶联受体信号通路等.KEGG富集共得到53条通路,其中与疼痛关系较为密切的包括钙信号通路、胆碱能突触信号传递、雌激素信号通路、癌症途径、5-羟色胺能通路等.结论:天南星-生姜药中的豆甾醇、β-谷甾醇、二氢辣椒碱等有效成分可能通过作用于CNR1、ESR1、MAPK3、CYP3A4、JUN、HDAC1等靶点,调节细胞内钙离子传导、胆碱能突出信号传递、癌症信号通路等对多种类型疼痛均可发挥作用,为进一步的实验设计提供理论基础.

运用UPLC-Q-TOF-MS、网络药理学和实验验证探讨穴位贴敷(acupoint sticking therapy,AST)干预支气管哮喘(bron-chial asthma,BA)的作用机制.TCMSP数据库中检索白芥子、延胡索、甘遂、细辛和生姜的化学成分作为自建库,采用UPLC-Q-TOF-MS解析AST中的活性成分,在TCMSP和SwissTargetPrediction中筛选靶点;在GeneCards中收集BA靶点,运用Venny 2.1.0平台,对活性成分靶点与BA靶点取交集获得潜在靶点;将潜在靶点导入STRING和DAVID中进行PPI、GO和KEGG分析;建立屋尘螨(house dust mite,HDM)诱导的哮喘小鼠,通过肺功能、免疫印迹法(Western blot)和流式细胞术(flow cytome-try)等研究AST对哮喘小鼠的作用机制.结果显示,UPLC-Q-TOF-MS得到54个活性成分,交集得到162个潜在靶点,选取前53个作为关键靶点.PPI分析、GO和KEGG分析发现,AST可能通过清风藤碱、芥子酸、二氢辣椒素、6-姜酚等活性成分,作用于SRC、PIK3CA等靶点,调节PI3K-AKT、ErbB、趋化因子、sphingolipid等信号通路以干预BA病理机制.AST能改善哮喘小鼠肺功能,下调肺组织中PI3K和p-AKT蛋白表达,增强PETN蛋白表达以及降低肺组织中Ⅱ型固有免疫细胞(typeⅡinnate lymphoid cells,ILC2s)水平.综上可得,AST可能主要通过下调PI3K-AKT通路,抑制ILC2s,从而减轻哮喘气道炎症、降低气道高反应等.