对亚洲兰茂牛肝菌 Lanmaoa asiatica("见手青")的化学成分和生物活性进行研究.采用多种柱色谱技术以及重结晶等方式对其 95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,共得到17 个单体化合物.根据波谱数据及文献比对鉴定了化合物的结构,其中 9 个为甾体类化合物:citreoanthrasteroid(1)、1(10→6)abeo-麦角甾-5,7,9,22-四烯-11β-甲氧基-3α-醇(2)、3β,5α,9α-trihydroxy-6β-methoxyergosta-7,22-dien(3)、过氧化麦角甾醇(4)、9(11)-去氢过氧化麦角甾醇(5)、3β-羟基-(22E,24R)-麦角甾-5,8(9),22-烯-7-酮(6)、(24S)-麦角甾-7-烯-3β-醇(7)、22E,24R-麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(8)和麦角甾醇(9);其余化合物分别为:腺嘌呤核苷(10)、5′-deoxy-5′-methylamino-adenosine(11)、5′-deoxy-5′-methylamino-9-(α-L-lyxofuranosyl)adenine(12)、(R)-4-methylpiperidin-2-one(13)、尿嘧啶核苷(14)、尿嘧啶(15)、烟酰胺(16)和 1(2)-linolyl-2(1)-palmityl-glycero-O-4′-(N,N,N-trimethyl)homoserine(17).其中化合物 1-3的核磁信号全归属为首次报道,化合物 13为新天然产物,化合物1-17 均为该种首次分离.利用MTT法测定化合物对肿瘤细胞的细胞毒活性,结果显示甾体类化合物 1、3-6 和 9 对人乳腺癌细胞(MCF-7)、小鼠小胶质细胞(BV2)和人肺癌细胞(A549)均有较强的细胞毒活性.化合物 10 对BV2 细胞呈现出中等强度的细胞毒活性,其IC50 值为 48.34 μmol/L.本研究对亚洲兰茂牛肝菌的化学成分进行了较为系统的研究,对亚洲兰茂牛肝菌的进一步开发利用具有重要意义.

亚洲兰茂牛肝菌Lanmaoa asiatica为云南珍稀的食药用真菌,属于外生菌根类真菌,在纯培养基上其部分菌丝能扭结形成原基.为了揭示调控原基发育的潜在物质,本研究运用核磁共振(1H-NMR)、气相质谱(GC-MS)和液相质谱(LC-MS)3 种代谢组学技术,结合 SMICA-P 软件,定性及定量分析了纯培养 35 d后菌丝体与原基的差异物质.结果表明,菌丝体与原基比较,3 种方法共检测到谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、4-氨基丁酸、甜菜碱和海藻糖等 96 个显著或极显著上调的差异物质;调控通路分析表明,这些差异物质在原基发育中可能涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸、精氨酸和脯氨酸、丁酸等 22 个通路;KEGG富集分析表明,谷氨酸涉及P＜0.05 的所有调控通路,推测谷氨酸在原基发育中起着重要的调控作用;在培养基中加入 0.16 g/L谷氨酸可促进原基的萌发与生长.上述研究为亚洲兰茂牛肝菌的人工繁育技术研发奠定了基础.

目的 对亚洲兰茂牛肝菌(Lanmaoa asiatica)内生真菌Penicillium cinereoatrum Chalab.JSQ-15的次级代谢产物进行分离与鉴定,并探究其细胞毒活性.方法 采用多种色谱技术分离纯化次级代谢产物,根据理化性质和波谱数据(质谱、核磁共振谱和Marfey分析)鉴定化合物结构,并采用噻唑蓝比色法(MTT法)评价其细胞毒活性.结果 与结论从内生真菌P.cinereoatrum Chalab.JSQ-15发酵产物中分离鉴定出18个化合物,分别为9(11)-去氢过氧化麦角甾醇(1)、过氧化麦角甾醇(2)、23-甲基过氧化麦角甾醇(3)、环(L-4-羟脯氨酸-L-亮氨酸)(4)、环(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(5)、环(L-4-羟脯氨酸-L-苯丙氨酸)(6)、3-甲氧基-环(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(7)、环(甘氨酸-L-脯氨酸)(8)、botryolide B(9)、decarestrictine I(10)、邻苯二酚(11)、5,6-二氢尿嘧啶(12)、2-哌啶酮(13)、trans-L-4-羟脯氨酸-L-亮氨酸(14)、1-亚油酰基溶血磷脂酰胆碱(15)、油酸-α-单甘油酯(16)、油酸(17)和丁二酸(18),18个化合物均为首次从P.cinereoatrum Chalab.中分离得到.化合物对肿瘤细胞的细胞毒活性测试结果表明:甾体类化合物1、2对小鼠小胶质细胞(BV2)、人肺癌细胞(A549)和人乳腺癌细胞(MCF-7)均呈现出较强的细胞毒活性(IC50≤30 μmol·L-1),化合物3、11对BV2细胞呈现出较强的细胞毒活性(IC50≤22μmol·L-1).本研究对亚洲兰茂牛肝菌内生真菌P.cinereoatrum Chalab.JSQ-15次级代谢产物进行了较为系统的分离鉴定,为该菌种次级代谢产物的首次报道.