目的:探讨血清CD36水平在RA患者心血管风险中的表达及预测价值，为临床识别及预测RA患者中的中、高心血管风险患者提供新的理论依据。方法:选取甘肃省兰州大学第二医院风湿免疫科住院治疗的84例RA患者作为研究对象，健康体检者34名作为对照。所有纳入对象根据中国动脉粥样硬化性心血管疾病风险预测研究（China-PAR）分为低心血管风险组和中高心血管风险组，同时于入院时接受血清CD36水平及其他血清学指标检测，且病例资料完整。应用SPSS 26.0软件进行资料的统计分析，计量资料比较采用 t检验或非参数检验，分类资料比较采用 χ2检验或Fisher精确检验，单因素分析中 P<0.05的变量进入Logistic多因素回归模型。 结果:与健康对照组比较，RA患者的中高心血管风险人数明显增多[8例（23.5%）与38例（45.2%）， χ2=4.80， P=0.029]，并和血清CD36呈负相关（ r=-0.27， P<0.05）。Logistic多因素回归分析结果显示，年龄[ OR值（95% CI）=1.654（1.157，2.365）， P=0.029]、舒张压[ OR值（95% CI）=1.225（1.040，1.442）， P=0.015]可能是RA患者的中高心血管风险的独立危险因素，血清CD36水平[ OR值（95% CI）=0.569（0.352，0.922）， P=0.022]升高可能是RA患者的中高心血管风险的保护因素。绘制受试者工作特征曲线，血清CD36水平诊断RA患者的中高心血管风险的曲线下面积=0.691，截断值为4.27 pg/ml，灵敏度和特异度分别为89.7%、41.0%，具有一定的预测价值。 结论:血清CD36水平在RA患者中随着心血管风险增高而降低，提示血清CD36水平升高是RA心血管风险的保护因素，且血清CD36水平对RA患者心血管风险具有一定的预测价值，是潜在预测指标。

目的:观察T-2毒素对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、人类白细胞分化抗原（CD）44及整合素表达的影响。方法:取1 ~ 2日龄SPF级Wistar乳鼠2只制备原代软骨细胞，进行体外培养，采用甲苯胺蓝染色法进行软骨细胞鉴定，细胞增殖/毒性检测试剂盒（CCK-8）法检测不同剂量T-2毒素（0、2、4、6、10、12、20 ng/ml）染毒24、48、72 h对软骨细胞的毒性作用，根据细胞存活率确定终浓度为0（对照）、2、4、6、8 ng/ml的T-2毒素作用48 h为后续实验条件。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测细胞上清液白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α及CD44含量；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测软骨细胞整合素α5、β1蛋白表达水平。结果:在相同作用时间下，不同剂量组间软骨细胞存活率比较，差异均有统计学意义（ F = 130.759、258.250、123.337， P均< 0.01）。作用48 h，不同剂量T-2毒素组软骨细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CD44含量比较，差异均有统计学意义（ F = 10.613、4.805、2.943、12.395， P < 0.01或< 0.05）。其中，2、4、6、8 ng/ml组IL-6含量均高于对照组（ P均< 0.05）；6、8 ng/ml组IL-1β含量均高于对照组和2 ng/ml组，且6 ng/ml组明显高于4 ng/ml组（ P均< 0.05）；6、8 ng/ml组TNF-α含量均低于对照组（ P均< 0.05）；2、4、6、8 ng/ml组CD44含量均低于对照组（ P均< 0.05）。作用48 h，不同剂量T-2毒素组软骨细胞整合素α5、β1蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（ F = 4.635、4.376， P均< 0.05）。其中，6、8 ng/ml组整合素α5蛋白表达水平均明显低于对照组（ P均< 0.05），整合素β1蛋白表达水平均明显高于对照组（ P均< 0.05）。 结论:T-2毒素可能通过上调IL-6、IL-1β和整合素β1的表达，同时下调TNF-α、CD44和整合素α5的表达，破坏软骨细胞与细胞外基质的平衡，造成软骨细胞损伤。

目的:探讨骨髓源性间充质干细胞(BMSCs)转化为神经干细胞(NSCs)的能力及其联合治疗对脑外伤的治疗作用。方法:将BMSCs(购自江苏无锡莆禾生物)进行培养和传代，再进行神经球诱导实验诱导分化为NSCs，对诱导后的NSCs进行功能鉴定，并检测其是否具有分化为神经细胞的能力。将15只6周龄、体重约为20 g、合格证号为SCXK(苏)2023-0009的C57BL/6J的雄性小鼠随机分成对照组、TBI组和MSCs+NSCs治疗组，并以水迷宫实验来检测小鼠的学习记忆能力。统计学方法应用GraphPad Prism(V8)统计软件分析，应用Student’s t检验和单向方差分析进行组间比较。 结果:BMSCs的特征性抗原，包括CD90、CD44、CD73和CD105，阳性率>95%；但不表达或低表达CD34、CD45和人类白细胞抗原(HLA-DR)，阳性率<5%。诱导分化的神经球细胞高表达CD90，阳性率>90%；并表达神经干细胞特异标志物巢蛋白(Nestin)和醛脱氢酶(LDHA1)，阳性率均超过10%。对NSCs进行荧光定量PCR检测，可见NSCs组Nestin(6.01±0.17比0.97±0.11， t＝43.74， P<0.05)、sry相关的高流动性组-box蛋白-2(Sox2)(7.92±038比0.94±0.08， t＝31.13， P<0.05)、配对框基因6(PAX6)(4.02±0.32比0.94±0.08， t＝16.71， P<0.05)高于MSCs对照组。免疫荧光检测培养第8天和第14天神经球干细胞，结果均显示NESTIN-PE染色阳性。神经球干细胞诱导神经细胞分化后，进行荧光定量PCR检测，结果显示NSCs诱导神经细胞分化后Nestin基因表达和微管蛋白β3(TUBB3)基因表达与BMSCs对照组比较没有改变；Sox2基因表达(2.48±0.49比1.00±0.08， t＝5.18， P<0.05)、少突胶质细胞系转录因子2(OLIG2)基因表达(4.37±0.23比1.01±0.20， t＝19.23， P<0.05)、PAX6基因表达(1.68±0.31比1.01±0.16， t＝3.33， P<0.05)和微管关联蛋白2(MAP2)基因表达(3.13±0.05比1.03±0.31， t＝11.44， P<0.05)与BMSCs对照组比较显著上调；胶质纤维酸性蛋白(GFAP)基因表达与BMSCs对照比较显著下调(0.05±0.02比1.04±0.38， t＝4.50， P<0.05)。水迷宫实验发现BMSCs+NSCs治疗组和TBI组相比潜伏期显著缩短(39.60±0.97比48.64±1.60， t＝10.81，7 d；29.40±0.55比35.00±1.41， t＝8.26，8 d；12.06±1.28比28.36±1.60， t＝17.83，9 d； P<0.05)。 结论:骨髓源性间充质干细胞具有转化为神经干细胞能力，且其联合治疗可减轻小鼠颅脑外伤后认知功能障碍。

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的条件培养基对人永生化Müller细胞系MIO-M1细胞增生、黏附和分化的作用。方法:BMSCs传至第3代进行成骨、成软骨及成脂诱导培养基诱导分化，并分别使用茜素红、阿利辛蓝及油红O染色进行分化鉴定；采用流式细胞仪检测细胞中间充质干细胞标志物CD73、CD90和CD105以及造血干细胞标志物CD34、CD45和人类白细胞DR抗原(HLA-DR)表达。采用免疫荧光染色法检测MIO-M1细胞中Müller细胞标志物SOX9、谷氨酰胺合成酶(GS)、vimentin和胞内视黄醛结合蛋白(CRALBP)，视网膜干细胞标志物SOX2、nestin和CHX10，以及细胞增生标志物细胞周期蛋白D3(CCND3)的表达。将MIO-M1细胞分为标准培养基组、293T条件培养基组和BMSC条件培养基组，分别在标准培养基、293T培养上清液和BMSC培养上清液中培养。定量分析各组细胞面积、圆度、伸长系数、周长等形态参数；采用流式细胞仪检测细胞周期，采用成球实验和5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测细胞增生情况。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组培养上清液中血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达；采用荧光定量PCR法检测各组细胞中VCAM-1 mRNA表达。采用免疫荧光染色法和荧光定量PCR法分别检测各组细胞诱导分化培养后视网膜神经元标志物蛋白激酶C(PKCα)、Rhodopsin、微管相关蛋白2(MAP2)和β-微管蛋白(Tuj1)的表达变化。结果:培养的BMSCs高表达CD73、CD90和CD105，低表达CD34、CD45和HLA-DR，并可成功诱导分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞。MIO-M1细胞表达SOX9、GS、vimentin、CRALBP、SOX2、CHX10、nestin和CCND3。与标准培养基和293T条件培养基组比较，BMSC条件培养基组的MIO-M1细胞形态发生改变，形成细长的纺锤形或多极形态，且细胞面积减少，伸长系数增加，圆度降低，差异均有统计学意义( F＝6.973、12.370、6.311，均 P<0.01)；与标准培养基和293T条件培养基组比较，不同时间点BMSC条件培养基组MIO-M1细胞形成的神经球面积明显增大，差异均有统计学意义( F组别＝134.300， P＝<0.001； F时间＝82.910， P<0.001)；与标准培养基和293T条件培养基组比较，BMSC条件培养基组MIO-M1细胞的EdU阳性率和细胞增生指数均显著提高，差异均有统计学意义( F＝6.973、74.110，均 P<0.05)；与标准培养基和293T条件培养基组比较，BMSC条件培养基组的细胞上清液中VCAM-1蛋白质量浓度和细胞中的VCAM-1 mRNA相对表达量均显著升高，差异均有统计学意义( F＝13.720、7.896，均 P<0.05)；MIO-M1细胞在分化条件下，BMSC条件培养基组的MIO-M1细胞在mRNA水平的PKCα、Rhodopsin、Tuj1和MAP2相对表达量较标准培养基组和293T条件培养基组均明显升高，差异均有统计学意义( F＝14.490、5.424、14.330、7.405，均 P<0.05)。 结论:BMSC条件培养基可以改变Müller细胞的形态，并促进其增生、黏附和向视网膜神经元的分化。

初始CD4 +T淋巴细胞在接受抗原刺激后可分化为不同的辅助性T细胞亚群，并分泌相应的细胞因子发挥生物学效应。Th22细胞是近年被发现的新型CD4 +T淋巴细胞亚群，不同于Th1、Th2和Th17细胞等亚群，Th22细胞分泌白细胞介素(IL)-22、IL-13和肿瘤坏死因子(TNF)-α等因子，不分泌IL-17、IL-4、干扰素-γ(IFNγ)等因子，表达CCR4、CCR6和CCR10趋化因子受体，其中IL-22被认为是Th22细胞的主要效应分子。Th22细胞的功能和分化的机制不断被完善，且在人类常见病毒感染中发挥重要作用。本文就Th22细胞的特征与功能及其分化机制，以及IL-22在人类常见病毒感染中的作用作一介绍，为人类病毒的防治提供新的免疫策略。

目的:探讨组织蛋白酶G(CatG)提高T细胞治疗胶质瘤效果的机制。方法:（1）收集胶质瘤数据库中397例胶质瘤患者的临床资料，采用Kaplan-Meier法进行生存分析，Pearson相关性分析胶质瘤组织中 CTSG mRNA与β2微球蛋白( β2M) mRNA表达的相关性。(2）从胶质母细胞瘤中分离培养胶质瘤干细胞（GSC)387和GSC3565，分别分化培养获得胶质瘤分化细胞（DGC)387和DGC3565。取GSC387细胞，分为CatG组、CatG抑制物组，分别用0.1 μg/μL重组人类白细胞抗原(HLA)-A *02∶01和HLA-B*15∶01与4 ng/μL CatG、10 μmol/L CatG抑制物共培养10 min，应用托马斯亮蓝染色检测细胞HLA-A *02:01和HLA-B *15:01的表达，应用Western blotting检测细胞主要组织相容性复合体（MHC)-Ⅰ、MHC-DR蛋白的表达。(3）取GSC387、GSC3565细胞和DGC387、DGC3565细胞，分别分为4组（CatG组、CatG抑制组、空白抗体1组，空白抗体2组），分别加入4 ng/μL CatG、10 μmol/L CatG抑制物、空白抗体1、空白抗体2处理24 h，采用流式细胞仪检测细胞HLA-ABC的表达。(4）取GSC387、GSC3565细胞和DGC387、DGC3565细胞，分别分为CatG组和CatG抑制组，采用荧光素酶实验检测CatG对T、自然杀伤细胞杀伤作用的影响。 结果:(1) CTSG mRNA高表达组患者的生存率高于 CTSG mRNA低表达组， β2M mRNA低表达组患者的生存率高于 β2M mRNA高表达组，差异均有统计学意义( P<0.05)。相关性分析显示胶质瘤组织中 CTSG mRNA与 β2M mRNA的表达呈负相关关系( r= -9.160， P=0.000)。(2）托马斯亮蓝染色检测显示：与CatG抑制物组比较，CatG组细胞HLA-A *02∶01和HLA-B *15∶01的表达增加。Western blotting检测显示：与CatG抑制物组比较，CatG组细胞MHC-Ⅰ的表达增加，MHC-DR的α和β链降低。(3)流式细胞仪检测显示：CatG组GSC387、GSC3565细胞HLA-ABC的表达高于CatG抑制物组，差异有统计学意义( P<0.05)。(4）荧光素酶实验显示：与CatG抑制物组比较，CatG组T细胞对GSC细胞的杀伤比例增加，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:CatG可提高免疫治疗GSC的效果，其机制为提高细胞表面的MHC-Ⅰ的表达。

目的:观察保存温度对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)制剂中干细胞存活率指标的影响，为干细胞制剂的保存与运输提供合理的温控建议。方法:新鲜脐带取自2018年12月至2019年6月于天津华兴医院行剖宫产的健康胎儿，均由产妇自愿捐献并签署知情同意书。分离hUC-MSCs后进行培养并传代及制剂制备，之后在4 ℃、10 ℃～15 ℃、25 ℃、37 ℃温度下对细胞存活率进行测定。不同保存温度下各组间细胞存活率的比较采用 t检验。 结果:细胞传代到第5代时，流式鉴定显示CD73、CD105和CD90阳性表达达到95%以上，CD45、CD34、CD14、CD19和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)表达率在0～1%。细胞三向分化能力呈阳性。在25 ℃保存温度下，放置10 h时，细胞活率为86.61%，与保存在4 ℃、10 ℃～15 ℃温度比较，细胞活率下降较快( t＝3.065， P<0.01)。在37 ℃保存温度下，放置4 h时，细胞活率为84.92%，细胞活率下降速度最快( t＝5.178， P<0.01)。 结论:hUC-MSCs制剂的适宜保存温度为4 ℃～15 ℃，该温度下的最长保存时间为10 h。

目的:观察脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、人类白细胞分化抗原（CD）44、基质金属蛋白酶（MMP）-13、整合素表达的影响。方法:提取1 ~ 2日龄Wistar乳鼠原代软骨细胞，采用甲苯胺蓝染色法进行软骨细胞鉴定，CCK-8法检测DON（剂量分别为0.0、0.1、0.2、0.4、0.8 μg/ml）染毒24、48、72 h软骨细胞增殖情况，根据细胞存活率选取0.00（对照）、0.05、0.10、0.15、0.20 μg/ml DON用于后续实验，确定作用时间为48 h。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞培养上清液白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、CD44及MMP-13含量；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测软骨细胞CD44和整合素α2、α5、β1蛋白表达水平。结果:随着DON剂量和作用时间增加，软骨细胞存活率逐渐降低，存在浓度和时间依赖性（ P均< 0.01）。细胞培养上清液IL-6含量组间比较差异有统计学意义（ H = 13.425， P < 0.01），其中0.10 μg/ml组[中位数（四分位数间距）：256.89（191.02，477.58）pg/ml]显著高于对照组[10.37（0.00，119.13）pg/ml， P < 0.05]；IL-1β和TNF-α含量组间比较差异无统计学意义（ F = 0.881、1.317， P均> 0.05）；0.10、0.15、0.20 μg/ml组CD44含量[（0.87 ± 0.21）、（0.85 ± 0.24）、（0.77 ± 0.17）pg/ml]明显低于对照组[（1.06 ± 0.19）pg/ml， P均< 0.05]；MMP-13含量组间比较差异有统计学意义（ F = 7.947， P < 0.01）。CD44和整合素α2、α5、β1蛋白表达水平组间比较差异有统计学意义（ F = 5.737、6.562、6.074、4.476， P < 0.05或< 0.01）。 结论:DON可能通过增加IL-6，MMP-13，整合素α2、β1表达和抑制CD44、整合素α5表达，破坏细胞与细胞外基质间的平衡，造成软骨损伤。

目的:探讨肾移植术后抗人类白细胞抗原特异性抗体(HLADSA)诱导人单核细胞向巨噬细胞分化的机制。方法:构建人内皮细胞(HAEC)与单核细胞(Mon)体外共培养模型。分为未活化(UT)组、完整HLADSA(Ab)活化组、Ides酶切HLADSA活化组(Fab)组，并添加中和抗体/融合蛋白阻断，流式细胞技术分析HLADSA活化后的HAEC对Mon分化及胞内信号转导的影响。采用方差分析检验。结果:Ab活化组Mon胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK) 1/2T202/Y204磷酸化水平高于UT组(2.163±0.311， F＝23.070， MD＝-1.163， P<0.01)，Fab组ERK仅部分磷酸化(1.211±0.072， F＝23.070， MD＝-0.211， P<0.05)，且低于Ab组( MD＝0.952， P<0.05)。U0126可完全阻断Ab和Fab活化组Mon胞内ERK磷酸化(1.045±0.087， F＝22.240， MD＝0.449， P<0.001；0.992±0.032， F＝9.474， MD＝0.122， P<0.01)。rPSGL-1-Ig及ICAM-1抗体预处理HAEC均可部分阻断Ab诱导的ERK磷酸化(1.375±0.168， F＝11.020， MD＝0.410， P<0.01；1.509±0.188， F＝11.020， MD＝0.277， P<0.01)。单用P-选择素糖蛋白配体1(PSGL-1)抗体、CD18抗体预处理Mon后均可完全抑制Fab活化诱导的ERK磷酸化(1.025±0.035， F＝21.050， MD＝0.242， P<0.01；0.982±0.031， F＝21.050， MD＝0.285， P<0.01)，而单用CD11a抗体仅能部分抑制(1.117±0.027， F＝21.050， MD＝0.150， P<0.05)，CD11b抗体则无法抑制(1.205±0.033， F＝21.050， MD＝0.062， P>0.05)。CD64抗体预处理Mon可部分抑制Ab诱导的ERK磷酸化(1.438±0.045， F＝26.250， MD＝0.415， P<0.05)，但当联合使用CD64及CD32抗体时可完全抑制(1.239±0.049， F＝26.250， MD＝0.614， P<0.01)。 结论:Ab活化后的HAEC主要通过激活Mon胞内ERK信号诱导后者分化。

目的:探讨人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）分泌的外泌体对损伤后肌腱细胞修复的影响及其机制。方法:组织块贴壁法分离并纯化筛选出能稳定传代培养的hUC-MSCs，倒置荧光显微镜观察细胞形态，通过流式细胞术检测hUC-MSCs的免疫表型。应用诱导培养基诱导hUC-MSCs向成骨细胞、成软骨细胞和脂肪细胞分化并进行鉴定。运用高速离心法提取MSCs的分泌物外泌体（MSCs外泌体），用Western blot技术和电镜检测外泌体，用PKH67染色荧光法检测外泌体膜融合能力。40只Wistar鼠按随机数字表法分为肌腱损伤组和正常组，每组20只。肌腱损伤组：切断跟腱1周后用100 mg/kg戊巴比妥钠处死，取跟腱组织用胰蛋白酶消化得到损伤肌腱细胞。正常组：不做任何处理直接处死，与损伤组并行处理得到正常肌腱细胞。将外泌体与体外培养的肌腱细胞共培养，12，24，48，72 h后通过细胞计数CCK-8检测肌腱细胞增殖情况。hUC-MSCs外泌体处理细胞24 h后，采用Western blot、qPCR、免疫荧光方法检测外泌体对肌腱细胞转化生长因子-β（TGF-β）、骨形态发生蛋白（BMP）、血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）和炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。结果:鉴定了hUC-MSCs，并成功分离hUC-MSCs外泌体。分离培养的MSCs呈梭形，丙氨酸氨肽酶（CD13）、整联蛋白β-1（CD29）、ecto-5'-核苷酸酶（CD73）、胸腺细胞表面抗原（CD90）和内皮素（CD105）呈阳性，人类白细胞DR抗原（HLA-DR）、造血祖细胞抗原（CD34）、白细胞共同抗原（CD45）呈阴性。分离出的外泌体经PKH67染色鉴定证实，在电镜下呈直径30~100 nm的圆盘、内部凹陷结构，Western blot检测高表达移动相关蛋白-1（CD9）和溶酶体相关膜蛋白3（CD63）。处理肌腱细胞后，CCK-8检测12，24，48，72 h细胞活性，结果表明肌腱损伤组显著高于正常组（ P < 0.01），qPCR结果表明肌腱损伤组TGF-β（1.850 ± 0.127）、BMP（2.133 ± 0.398）、FGF（1.610 ± 0.223）、VEGF（2.207 ± 0.059）的mRNA表达显著高于正常组TGF-β（1.004 ± 0.105）、BMP（1.007 ± 0.145）、FGF（1.007 ± 0.140）、VEGF（1.001 ± 0.065）（ P < 0.05），而肌腱损伤组IL-1β（0.102 ± 0.009）、TNF-α（0.130 ± 0.013）的表达显著低于正常组IL-1β（1.004 ± 0.113）、TNF-α（1.006 ± 0.134）（ P < 0.01）。Western blot检测结果与qPCR检测趋势一致。 结论:hUC-MSCs分泌的外泌体通过上调生长因子TGF-β、BMP、VEGF、FGF的表达，抑制炎性因子IL-1β、TNF-α的表达，促进肌腱细胞生长，促进肌腱细胞损伤修复。